Обоснование биотехнологии БАД к пище из печени тихоокеанских лососей

• Автор: Чепкасова, Анна Ивановна
• Шифр специальности: 05.18.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 131 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика печени лососей

1.2 Печень как источник внелогически активных веществ

1.3. Использование пептидов в качестве БАВ и лекарственных средств

1.4 ГЕПАТОПРОТЕКТОРЫ

1.5. Обзор рынка современных гепатопротекторных препаратов

1.6. МЕТОДЫ выделения и получения пептидных компонентов из наземных животных и рыб

1.7. Хитозан. Строение и свойства

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты и материалы исследований
2.2. Методы исследований
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
3.1. Характеристика печени лососей
3.2. Технология получения сушеной печени лососей
3.3. Технология выделения водорастворимых компонентов печени лососей и получения хитозан-липидных комплексов
3.4. Характеристика сорбционной емкости хитозанов из панциря камча тского краба и углохвостой креветки
3.5. Характеристика водорастворимого пептидного комплекса из печени лососей
3.6 Характеристика хитозан-липидных комплексов из печени лососей
3.7. Медико-биологические испытания
3.8. Расчет экономической эффективности производства БАД к пище на основе ВПК
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Тихоокеанские лососи (лососи) являются одним из массовых объектов морского промысла на Дальнем Востоке. Прогноз вылова лососей составляет от 300,0 до 500,0 тыс. т (Состояние промысловых ресурсов..., 2012, 2014; Лососи-2014..., 2014). Т1а пищевые цели используется около 70 % массы в зависимости от вида рыб. Отходы промышленной переработки лососей привлекают внимание исследователей как потенциальный источник биологически активных веществ. Неиспользуемыми отходами переработки лососей являются внутренние органы (печень, кишки), жабры, головы, плавники, костные ткани, некондиционные молоки. На долю внутренностей приходится 11,0-18,0 %, а на долю печени 1,4-3,8 % массы в зависимости от вида рыбы, места вылова и биологического состояния (Бассейновые нормы..., 2007). Расчетное количество отходов внутренностей при глубокой переработке, таким образом, составляет 33,0-90,0 тыс. т, включая порядка 4,2-19,0 тыс. т печени.
В предыдущие годы в ТИРГРО-Центре были разработаны технологии получения биологически активных веществ из отходов переработки лососей: выделен и изучен цитохром С из сердец лососей (Пат. № 1297278; Аюшин, Ковалев, 2006), комплекс протеолитических ферментов из пилорических придатков (Пивненко, 1995), ДНК (Касьяненко и др., 1997) и нуклеопротеидный комплекс (Позднякова, 2003) из молок лососей. Разработана технология БАД к пище «Артротин» из хрящевой и костной ткани лососей (Суховерхова, 2006), позиционируемая в качестве источника гексозаминов и хондроитинсульфата. Разработана технология БАД к пище «Гепатокортин» (ТУ 9283-284-00472012-06), которая является источником со-3 полиненасыщенных жирных кислот и витамина Е. Сырьем для изготовления Ге-патокортина являются печень и сердца дальневосточных лососевых рыб.
Несмотря на то, что печень лососей считается пищевым сырьем (ТУ 9267-037-33620410-04), привлечению ее в пищевую промышленность для приготовления продукции, аналогичной продукции из печени трески и минтая, препятствует трудность отделения желчного пузыря, содержимое которого придает продукции из печени лососей горький привкус (Шульгина и др., 2013), а также по причине ограниченных сроков ее хранения вследствие окислительной порчи липидов.

Исходя из анализа литературы и данных по влиянию на организм сравнительно новых компонентов, получаемых из животного сырья, а именно - пептидов (Ашмарин, 1982, 1986; Хавинсон, Кветная, 2005, Хавинсон, 2009, Хавинсон и др., 2012), представляется целесообразным расширить перечень биологически активных добавок из печени лососей, которая потенциально является источником биологически активных веществ. Таким образом, разработка технологии получение из печени лососей биологически активных веществ, является актуальной.
Цель работы: обоснование технологии получения из печени тихоокеанских лососей гепатопротекторных добавок к пище, содержащих биологически активные компоненты пептидной и липидной природы.
Задачи исследования:
- исследовать состав белков, аминокислот, липидов, жирных и желчных кислот печени тихоокеанских лососей как сырья для производства БАД;
- исследовать влияние различных способов консервации печени тихоокеанских лососей, используемой для получения БАД, на изменение состава липидов в процессе хранения;
- обосновать рациональные условия экстракции пептидных фракций из печени тихоокеанских лососей (pH, гидромодуль, температура, время);
- обосновать и разработать технологию биологически активных добавок пептидной и липидной природы из печени тихоокеанских лососей и определить их состав;
- провести оценку биологической активности БАД из печени тихоокеанских лососей: исследовать антиоксидантную активность и гепатопротекторные свойства;
- разработать и утвердить нормативную документацию на сушеную печень тихоокеанских лососей как сырье для производства БАД;
- разработать нормативную документацию на БАД к пище из печени тихоокеанских лососей.

2.2.12 Ультрафильтрация
Ультрафильтрацию проводили согласно инструкции к прибору на аппарате Мііііроге (50-650 ЯРМ) (Франция) с плоскими мембранными модулями Реііісоп, рассчитанными на пропускание молекул с массой в 1 и 10 кДа.
2.2.13 Определение показателя «Кинематическая вязкость»
Кинематическую вязкость определяют для 1 %-го раствора хитозана в 1% уксусной кислоте (Бондалетова, Сутягин, 2003).
Навеску хитозана массой 1,0 г, помещали в плоскодонную колбу и добавляли 99 см3 1 %-ой уксусной кислоты. Перемешивали на магнитной мешалке до полного растворения хитозана. Полученный раствор фильтровали через фильтровальную бумагу. Вязкость раствора хитозана определяли по инструкции, прилагаемой к вискозиметру.
2.2.14 Определение показателя «Ионный эквивалент»
Ионный эквивалент добавки определяли по иону меди (II). Метод основывается на определении концентрации комплекса иона меди (II) с трилоном Б в растворе.
Приготовление рабочего раствора хлорида меди. На аналитических весах взвешивали 76,25 мг безводного хлорида меди (II). Навеску переносили в аналитическую колбу вместимостью 25 см3 и добавляли дистиллированную воду в количестве 10-15 см3. После растворения соли объем раствора доводили до 25 см3. Полученный раствор имел концентрацию ионов меди 3,05 мг/см3.
Построение калибровочного графика. Готовили стандартные растворы хлорида меди методом разбавления рабочего раствора с содержанием соли от 35 до 3600 мкг/см3. К 2 см3 стандартного раствора хлорида меди добавляли 4 cмJ 0,1 н раствора трилона Б. перемешивали, оставляли на 1 ч. Доводили pH раствора до 4,8-6,5 и измеряли оптическую плотность при длине волны 740 нм на спектрофотометре. В кювету сравнения помещали 4 см3 раствора трилона Б и 2 см3 воды.
Определение ионного эквивалента. К навеске массой 0,2 г, помещенной в коническую колбу вместимостью 25 см3, добавляли 10 см3 рабочего раствора хло-