Роль катехоламинов мозга в развитии гиперпролактинемии

• Автор: Дильмухаметова, Лилия Кадыровна
• Шифр специальности: 03.03.01, 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Пролактин в гипофизе
1.1 Л. Ген и структура пролактина
1.1.2. Секреция пролактина в гипофизе
1.1.3. Функциональное значение пролактина
1.1.4. Регуляция секреции пролактина
1.2. Катехоламинергическая система мозга
1.2.1. Метаболизм катехоламинов
1.2.1.1. Синтез катехоламинов
1.2.1.2. Обратный захват катехоламинов
1.2.1.3. Деградация катехоламинов
1.2.2. Рецепторы дофамина
1.3. Нигростриатная дофаминергическая система
1.4. Тубероинфундибулярная катехоламинергическая система
1.4.1. Дофамин-синтезирующие нейроны аркуатного ядра
1.4.1.1. Топография и морфология дофамин-синтезирующих нейронов аркуатного ядра
1.4.1.2. Функционирование и нейрогуморальная регуляция дофаминергических нейронов аркуатного ядра
1.4.2. Катехоламинергические аксоны в аркуатном ядре
1.4.2.1. Топография и морфология катехоламинергических аксонов
1.4.3. Роль дофамина и норадреналина в регуляции секреции пролактина
1.5. Патология тубероинфундибулярной дофамин-продуцирующей и норадренергической систем
1.5.1. Синдром гиперпролактинемии
1.5.2. Экспериментальные модели гиперпролактинемии
1.5.2.1. Генетические модели
1.5.2.2. Фармакологические модели
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
II. 1. Животные
11.2. Эксперименты и подготовка материала
11.2.1. Инъекции 6-гидроксидофамина (6-ГДА) и десметилимипрамина (ДМИ)
П.2.2. Подготовка крови и гипофиза к исследованиям
П.2.3. Выделение стриатума, черной субстанции, аркуатного ядра и срединного возвышения
H.2.4. Проточная инкубация слайсов медиобазального гипоталамуса
П.З. Методы
П.3.1. Биохимическое определение содержания катехоламинов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией
П.3.2. Иммуноферментное определение пролактина в крови и гипофизе
П.3.3. Оценка синтеза мРНК Д2-рецепторов в гипофизе методом полимеразной цепной реакции
П.3.4. Иммуноцитохимическое исследование срезов аркуатного ядра
П.3.4.1. Пероксидазное моно-иммуномечение тирозингидроксилазы в аркуатном ядре
П.3.4.2. Пероксидазное моно-иммумечение дофамин-Р-гидроксилазы в аркуатном ядре
I.3.5. Световая микроскопия и анализ изображений
П.4. Статистика
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ

ІІІ.1. Уровень пролактина у крыс после введения 6-ГДА или ДМИ и 6-ГДА
ІГІ.1.1. Концентрация пролактина в плазме крови
111.1.2. Содержание пролактина в передней доле гипофиза
111.2. Катехоламины в нигростриатной системе после введения ДМИ и 6-ГДА
111.2.1. Содержание катехоламинов в черной субстанции
111.2.2. Концентрация катехоламинов в стриатуме
Ш.З. Катехоламины в тубероинфундибулярной системе после введения
ДМИ и 6-ГДА
ІП.3.1. Содержание катехоламинов в аркуатном ядре
ИІ.3.2. Содержание катехоламинов в срединном возвышении
ИІ.4. Катехоламины в инкубационной среде, в ткани медиобазального
гипоталамуса после инкубации и их общее содержание после введения 6-ГДА или ДМИ и 6-ГДА
11.4.1. Содержание катехоламинов в инкубационной среде
111.4.1.1. На 14-й день после введений
ИІ.4.1.2. На 45-й день после введений
111.4.2. Содержание катехоламинов в медиобазальном гипоталамусе после проточной инкубации
111.4.2.1. На 14-й день после введений
111.4.2.2. На 45-й день после введений
ІІІ.4.3. Общее содержание катехоламинов в инкубационной среде и в ткани медиобазального гипоталамуса после инкубации
111.4.3.1. На 14-й день после введений
111.4.3.2. На 45-й день после введений
111.5. Уровень экспрессии мРНК Д2-рецепторов в передней доле гипофиза после введения 6-ГДА или ДМИ и 6-ГДА
111.6. Вес передней доли гипофиза после введения 6-ГДА или ДМИ и 6-ГДА
111.7. Морфо-функциональные изменения в аркуатном ядре после введения 6-ГДА или ДМИ и 6-ГДА

ДА практически не обнаруживается в вентролатеральной области (Borisova et al, 1991; Zoli et al., 1993), однако, иммуноцитохимически там выявлены нейроны, содержащие промежуточный продукт синтеза ДА - L-ДОФА (Okamura et al., 1988).
В отличие от нейронов дорсомедиальной области, ТГ-содержащие нейроны вентролатеральной области не являются ДА-ергическими, эти нейроны не экспрессируют ДАА (Okamura et al., 1988а) и не синтезируют ДА (Jaeger et al., 1984., Okamura et al., 1988; Meister et al., 1988), однако экспрессируют L-ДОФА (Okamura et al., 1988). Согласно нашей гипотезе о кооперативном синтезе ДА, L-ДОФА выделяется из ТГ-содержащих, но не содержащих ДАА, нейронов в межклеточное пространство, а затем захватывается нейронами, экспрессирующими ДАА, где и превращается в ДА (Угрюмов, 1999; Ugrumov et al., 2002а,б; Ugrumov et al., 2004; Ugrumov, 2009). В пользу этой гипотезы также свидетельствует тот факт, что в нейронах промежуточного мозга моноферментные ДАА-содержащие нейроны могут захватывать (Lidbrink et al., 1974;Tison et al., 1991) и декарбоксилировать вводимый из внеклеточной среды L-ДОФА (Tison et al., 1991), синтезируя ДА (Lidbrink et al., 1974). Обсуждается также возможная роль L-ДОФА как самостоятельного нейротрансмиттера (Slominski and Paus, 1990; Zoli et al., 1993; Misu et al., 1996, 2002). В пользу последнего предположения свидетельствует наличие кальций-зависимого механизма выделения L-ДОФА из клеток (Goshima et al., 1988) и способность L-ДОФА специфически активировать адренорецепторы (Goshima et al., 1991).
Интересно отметить, что предпринятые единичные попытки оценить абсолютное количество моноферментных нейронов и их долю во всей популяции нейронов, экспрессирующих ферменты синтеза ДА в гипоталамусе у взрослых крыс показали, что число моноферментных ТГ-содержащих нейронов (Van den Pol et al., 1984) во много раз превышает число ДА-содержащих (флюоресцирующих) нейронов (Björklund and Lindvall, 1984). Это означает, что большинство ТГ-содержащих нейронов не содержит ДАА и, следовательно, не может синтезировать ДА из L-тирозина, аминокислоты-предшественника (Okamura et al., 1988а).
Данные об особенностях половых различий в экспрессии ферментов синтеза ДА у взрослых животных немногочисленны. Арбогастом отмечено, что интенсивность иммуноцитохимической реакции при выявлении ТГ, а также уровень мРНК ТГ в АЯ выше у самок по сравнению с самцами (Arbogast and Voogt, 1990).