Роль холестерина мембраны в секреции медиатора и экзоцитозе синаптических везикул в двигательных нервных окончаниях

• Автор: Тараканова, Оксана Ивановна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 125 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1 ВВЕДЕНИЕ
1.1. Актуальность исследования
1.2. Цель и задачи исследования:
1.3. Научная новизна
1.4. Положения, выносимые на защиту:
1.5. Научно-практическая ценность
1.6. Апробация работы
1.7. Реализация результатов исследования
1.8. Структура и объем диссертационной работы
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Нервно-мышечный синапс
1.1. Пресинаптическая область
1.2. Основные белка активной зоны
1.3. Активная зона двигательного нервного окончания лягушки
1.4. Активные зоны в двигательных НО крыс и мышей
1.5. Синаптические везикулы
1.6. Постсинаптическая область нервно-мышечного синапса
1.7. Квантово-везикулярная теория секреции медиатора
2. Экзоцитоз
2.1. Этапы экзоцитоза СВ
2.2. Сцепление
2.3. Докирование
2.4. Прайминг СВ. SNARE-комплекс
2.5. Регуляция сборки SNARE-комплекса
2.6. Ионы Са, сенсоры кальция в экзоцитозе
2.7. Разборка SNARE комплекса
2.8. Холестерин липидных плотиков и его роль в экзоцитозе СВ
2.8.1. Что такое липидные плотики
2.8.2. Как образуются липидные плотики
2.8.3. Зачем нужны липидные плотики
2.8.4. Липидные плотики в синаптической передаче
2.9. Фосфоинозитиды в экзоцитозе СВ
3. Эндоцитоз СВ
5.1. Белки вовлеченные в эндоцитоз СВ
3.2. Снятие клатринового покрытия
3.3. Механизмы транспорта везикул
3.3.1. Механизмы транспорта везикул и роль актинового цитоскелета
3.3.2. Пути рециклирования и пулы синаптических везикул
3.4.МЕСТО ЭНДОСОМАЛЬНОЙ сортировочной станции в рециклировании везикул
3.5. Холестерин и эндоцитоз СВ
3.6. Фосфоинозитиды в эндоцитозе
3. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1.1. Регистрация синаптических сигналов
1.2. Флуоресцентная микроскопия
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1.1. Изменения концентрации холестерина в мембранах нервно-мышечных
ПРЕПАРАТОВ ЛЯГУШКИ И МЫШИ, ОБРАБОТАННЫХ МЦЦ
1.2. Влияние МЦД на спонтанную секрецию медиатора из двигательных НО
1.3. Эффекты МИД на частоту МТКГ1 при уменьшении концентрации ионов СавНО
1.4. Действие МЦД на электрогенез двигательного НО
1.5. Влияние МЦД на квантовый состав ТКП
1.6. Выраженность облегчения секреции медиатора при высокочастотном ритмическом раздражении на фоне действия МЦД
1.7. Влияние МЦД на депрессию секреции медиатора при длительном
высокочастотном раздражении

1.8. Изменения загрузки красителя РМ1 -43 в НО на фоне действия МЦД
1.9. Динамика выгрузки красителя РМ1-43 из НО на фоне действия МЦД
2. Эффекты ХО на спонтанную и вызванную секрецию медиатора
5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
1.1. Получасовая аппликация нервно-мышечных препаратов в МЦД ПРИВОДИТ К ДОЗОЗАВИСИМОМУ ВЫМЫВАНИЮ ХОЛЕСТЕРИНА из поверхностных МЕМБРАН
1.2. Экстракция большого количества холестерина из мембран приводит к
УСИЛЕНИЮ СПОНТАННОЙ СЕКРЕЦИИ МЕДИАТОРА
1.3. Окисление холестерина мембраны не оказывало влияния на секрецию МЕДИАТОРА В ПОКОЕ
1.4. Усиление интенсивности спонтанной секреции не связано с ионами

1.5. Эффект удаления и окисления холестерина мембраны на
ПОСТСИНАПТИЧЕСКУЮ ОБЛАСТЬ СИНАПСА
1.6. Действие МЦД на электрогенез двигательного НО
1.7. Экстракция холестерина из мембраны 1 ммоль/л МЦ Д приводит к СНИЖЕНИЮ СЕКРЕЦИИ медиатора при редкой стимуляции
1.8. Выраженность облегчения секреции медиатора при высокочастотном ритмическом раздражении на фоне действия МЦД
1.9. Влияние МЦД на депрессию секреции медиатора при длительном
ВЫСОКОЧАСТОТНОМ РАЗДРАЖЕНИИ
2. Вымывание холестерина мембраны 1 ммоль/л МЦД вызывает ухудшение
ЗАГРУЗКИ КРАСИТЕЛЯ В ДВИГАТЕЛЬНЫЕ НО ЛЯГУШКИ И МЫШИ
2.1. Удаление холестерина мембраны 1 ммоль/л МЦД приводит к НАРУШЕНИЮ ЭКЗОЦИТОЗА СВ
6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
7. ВЫВОДЫ

Непосредственно взаимодействуя с холестерином, ФТИ-4,5-Ф2. и через связывание с белками плотиков (SNАР-25).
В олигодендроцитах, липидные плотики вероятно принимают участие в создании необходимой компартментализации для взаимодействия комплекса субстрат-фермент. Так, для активности fyn киназы Src семейства требуется сборка плотиков [Kramer Е.М., 1999]. Предотвращение образования рафтов сильно тормозит фосфорилирование fyn tau белка [Klein C., 2002].
В дополнение к регуляции активности ферментов, есть данные, которые говорят о вовлечении рафтов также в работу молекул адгезии. У мышей с недостатком сфинголипидов миелина галактосереброзида и сульфатида [Coetzee Т., 1996] молекула адгезии - нейрофасцин 155, не связываетсяс рафтом и не кластеризуется в параноде [Schafer D.P., Rasband M.N., 2004; Dupree J.L., et al., 1999; Menon K., et ab, 2003], что приводит к потери стабильности паранода с возрастом, предполагая, что галактоцереборозид неоходимое условие для сортировки нейрофасцина155 [Marcus J., et ab, 2006].
2.8.4. Липидные плотики в синаптической передаче
По последним данным липидные плотики вовлечены в механизм синаптической передачи. Здесь, липидные плотики задействованы в двух сферах деятельности - это клатеризация и регуляция рецепторов и экзоцитоз СВ.
Хотя показано, что некоторые рецепторы медиаторов (субъединицы ионотропного рецептора глутамата NR1A [Yamamoto, М. et ab, 1998] и GluRl [Ledesma, M.D. et ab, 1998] биохимически не локализуются в липидных плотиках, другие каналы (потенциал-активируемые К каналы Kv2.1 [Martens, J.R. et ab 2000], 7nAChR [Bruses, J.L. et ab, 2001], GABA рецепторы [Becher, A. et ab, 2001] являются резидентами липидных плотиков. Так, 7nAChR колокализуются с GM1 в цилиарных нейронах in vivo [Bruses, J.L. et ab, 2001]. Локализация ионных каналов в липидных плотиках, по-видимому, зависит от