Миграция эпидермальных клеток человека в культуре

• Автор: Воротеляк, Екатерина Андреевна
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ЭКЦ - эпидермальные кератиноциты ЭТС - эмбриональная телячья сыворотка EGF - эпидермальный фактор роста FGF - фактор роста фибробластов HGF - фактор роста фибробластов IGF - инсулиноподобный фактор роста KGF - фактор роста кератиноцитов PDGF - фактор роста из тромбоцитов SP - субстанция Р
TGFa - трансформирующий фактор роста а TGFß - трансформирующий фактор роста ß TNF - фактор некроза опухолей

СОДЕРЖАНИЕ

Введение
1 .Обзор литературы
1.1. Морфологические аспекты миграции
1.2. Скорость движения
1.3. Роль элементов цитоскелета в клеточной миграции
1.4. Влияние межклеточного матрикса на миграцию эпителиальных клеток
1.5. Регуляция пролиферации эпидермальных клеток в культуре
1.6. Соотношение процессов пролиферации и миграции в эпителиальных клетках
1.7. Действие факторов роста на миграцию эпителиальных клеток
1.8. Синтез макромолекул и миграция клеток
1.9. Межклеточные взаимодействия в регуляции миграции
1.10. Комплексные взаимодействия в регуляции миграции эпителиальных клеток
1.11. Характеристика линии эпидермоидной карциномы человека

? 2. Материалы и методы
3. Результаты и обсуждение
3.1. Миграция колоний первичных ЭКЦ человека в культуре
3.1.1. Морфология колоний и характер миграции
3.1.2. Ультраструктура мигрирующих колоний кератиноцитов
3.1.3. Изучение связи процессов миграции и пролиферации в колониях ЭКЦ
3.1.3.1. Характер миграции колоий в условиях подавления клеточной пролиферации
3.1.3.2. Распределение пролиферирующих клеток на тотальных гистоло-

гичеких препаратах
3.1.3.3. Изучение распределения меченых клеток на полутонких срезах
колоний ЭКЦ
3.1.4. Изучение характера миграции колоний ЭКЦ под коллагеновым гелем
3.1.5. Морфометрические характеристики колоний ЭКЦ (компьютерный анализ)
3.2. Миграция колоний клеток эпидермоидной карциномы А
3.2.1. Формирование колоний
3.2.2. Связь пролиферации и миграции
3.2.2.1. Ингибирование пролиферации и миграции колоний А
3.2.2.2. Характер распределения меченых клеток в колониях А-431 после инициации пролиферации и миграции
3.2.2.3. Влияние пролиферативного статуса клетки на ее положение в мигрирующей колонии
3.3. Влияние факторов роста на миграцию и пролиферацию эпидермо-цитов in vitra
3.3.1. Миграция клеток эпидермоидной карциномы человека А-431 в
рану
3.3.2. Действие EGF и инсулина на миграцию клеток А-431 в рану
3.3.3. Базальный уровень миграции клеток А
3.3.4. Влияние KGF на миграцию клеток А-431 в рану
3.3.5. Изучение дейтвия сурамина на KGF-стимулированную миграцию клеток А
3.3.6. Действие KGF на пролиферацию клеток А
3.4. Влияние компонентов внеклеточного матрикса на миграцию
эпидермоцитов
3.4.1. Влияние коллагена I типа и фибронектина на миграцию клеток
А-431 в рану

рецепторов клеточной поверхности показало, что пул субъединицы р, не изменялся при изученных условиях, тогда как пул субъединицы аг увеличивался при культивировании клеток и на ламинине и на коллагене. В то же время при росте клеток на ламинине менялась организация интегриновых рецепторов. В этом случае наблюдалась колокализация субъединиц <х2 с винкулином и фокальными контактами, что свидетельствует о взаимодействии клеток с матриксом (170). Интересно, что после обработки клеток митомицином С все субстраты гораздо сильнее стимулировали миграцию. В последующих исследованиях было показано (124), что тирозинкиназа модулирует взаимодействие рецепторов ЕОЛ с межклеточным матриксом.
Элементы внеклеточного матрикса, с другой стороны, могут изменять клеточные реакции на факторы роста. Так, например, клетки мышиной карциномы при культивировании на пластике не размножаются в присутствии бЛЭЛ или активина А, но начинают пролиферировать при культивировании на ламинине или фибронектине под действием этих факторов роста (171)
Межклеточный матрикс может оказывать влияние также на пролиферативный статус клеток. Так, например, фибронектин вызывает повышение внутриклеточного pH и стимулирует синтез ДНК в эндотелии капилляров (172), а тромбоспондин стимулирует миграцию, но ингибирует пролиферацию эндотелиальных клеток (56).
1.11. Характеристика линии эпидермоидной карциномы человека А-431.
Линия А-431 была получена в 1977 году в лаборатории Тодаро из опухоли эпителия влагалища человека (173). В этой же работе было показано. что клетки полученной линии способны связывать очень