Биология и особенности распространения морских бактерий - продуцентов α-галактозидаз и α-nацетилгалактозаминидаз

• Автор: Недашковская, Ольга Ильинична
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 120 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Глава Е Литературный обзор
1.1. Особенности океанических экосистем как среды обитания морских микроорганизмов
1.2. Важнейшие таксономические группы морских гетеротрофных микроорганизмов
1.3. Биологически активные вещества, синтезируемые морскими микроорганизмами
1.3.1 Протеолитические и литические ферменты
1.3.2. Ферменты, гидролизующие сложные полисахариды морской среды
1.3.2.1. Целлюлолитические ферменты
1.3.2.2. Агаразы
1.3.2.3. Ламинараназы
1.3.2.4. Хитиназы
1.3.2.5. Липолитические ферменты
1.3.2.6. Другие гидролазы
1.3.2.7. Тирозиназы
1.4. а-Галактозидазы и а-Хацетилгалактозаминидазы как перспективный объект медицинской и сельскохозяйственной биотехнологии
1.4.1. Распространение и функции а-галактозидаз
1.4.2. Механизм действия а-галактозидаз
1.4.3. Физико-химические свойства а-галактозидаз
1.4.4. Локализация а-галактозидаз в клетках эу- и прокариот
1.4.5. Применение а-галактозидаз
1.4.6. а-Галактозидазы, модифицирующие эритроциты человека
1.4.7. Механизм действия а-Кацетилгалактозаминидаз
1.4.8. Распространение а-Ыацетилгалактозаминидаз
1.4.9. а-Кацетилгалактозаминидазы, участвующие в ферментативной конверсии эритроцитов человека
1.4.9.1. а-1Лацетилгалактозаминидазы эукариот
1.4.9.2. а-Ыацетилгалактозаминидазы прокариот
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 2. Объекты и методы исследования.
2.1. Объекты исследования
2.2. Условия выделения. Среды культивирования и консервации
2.3. Методы изучения биологических свойств
2.3.1. Физиолого-биохимические признаки
2.3.2. Изучение ферментативной активности
2.3.3. Изучение действия ферментов на эритроциты
2.3.4. Чувствительность к антибиотикам
2.3.5. Электронная микроскопия
2.4.6. Анализ жирных кислот
2.4.7. Методы геносистематики
Глава 3. Особенности распространения штаммов-продуцентов гликозидаз
в различных районах Мирового Океана и их таксономический состав
3.1. Соотношение штаммов - продуцентов а-галактозидаз и a-Nацетил-галактозаминидаз среди свободноживущих и ассоциированных с морскими животными и растениями микроорганизмов
3.2. Распространение штаммов - продуцентов a-галактозидаз и а-Хацетилгалактозаминидаз в различных раонах Мирового океана
3.3. Таксономический состав штаммов, показавших a-галактозидазную и а-
N ацетил галактоз аминидазную активности
3.3.1. Встречаемость штаммов-продуцентов a-галактозидаз и а-Кацетилгалактозаминидаз среди бактерий рода Pseudoalteromonas
3.3.2. Встречаемость штаммов-продуцентов a-галактозидаз и а-Иацетилгалактозаминидаз среди бактерий родов Vibrio, Bacillus и Corynebacterium
3.4. Некоторые особенности таксономического состава микробных
ассоциаций
Глава 4. Таксономическая и филогенетическая характеристика штамма КММ
4.1. Физиолого-биохимические свойства штамма
4.2. Некоторые хемо-таксономические характеристики
4.3. Установление таксономического положения
4.4. Описание рода Arenariobacter
4.5. Диагноз вида АгепапоЬасгег Шегісіш
Глава 5. Штамм КММ 426 - продуцент уникальной а-Ыацетилгалактозаминидазы
5.1. Схема очистки фермента
5.2. Некоторые характеристики фермента
Глава 6. Штамм аэробных гетеротрофных бактерий Р.чеисіоаііеготопаіур.
КММ 701 - продуцент а-галактозидазы
6.1. Фенотипические признаки штамма КММ 701
6.2. Некоторые характеристики фермента
6.3. Сравнительный анализ а-галактозидазы штамма КММ 701 и
а-галактозидаз других морских бактерий
Выводы
Список литературы

У дрожжей Saccharomyces carlsbergensis а-галактозидазная активность локализована в клеточной стенке (Fris, Ottolenghi, 1959). Позже были найдены внеклеточная и связанная с клеткой, расположенная, по-видимому, в периплазматическом пространстве, а-галактозидаза. Исследованиями Лазо с соавт. (Lazo et al., 1977) было показано, что а-галактозидаза Saccharomyces carlsbergensis находится, вероятно,- между мембраной и клеточной стенкой и оттуда выделяется в культуральную жидкость. В более поздних работах (Oda, Tonomura, 1996) при выращивании дрожжевых клеток Torulaspora delbrueckii на мелибиозе или галактозе была показана локализация а-галактозидазы на внешней стороне клеточной мембраны: периплазматическом пространстве или (и) клеточных стенках.
Анализ литературных данных показывает, что у прокариот, например, у Pseudomonas atlantica, теперь Pseudoalteromonas atlantica (Gautier et al., 1995), неактивная а-галактозидаза локализована в цитоплазматической мембране (Day et al. 1975). Активность а-галактозидазы Micrococcus sp. обнаруживается в цитоплазме (Akiba, Horikoshi, 1978).
Таким образом, к настоящему времени наиболее изучена локализация а-галактозидаз у дрожжей и мицелиальных грибов, в то время как местонахождение бактериальных ферментов изучено недостаточно.
1.4.5. Применение а-галактозидаз
а-Галактозидаза находит применение в пищевой промышленности при использовании мелассы. Расщепляя присутствующую в мелассе рафинозу, а-галактозидаза не только увеличивает выход сахара, но одновременно способствует формированию кристаллов сахара (Силин, 1967; Obara, Hashimoto, 1976). Обработка соевой муки и соевого молока частично очищенным препаратом а-галактозидазы вызывает расщепление трудноусвояемых организмом олигосахаридов, таких как