Оценка численности и структуры биомассы микроорганизмов в Al-Fe-гумусовых подзолах коренных лесов Кольского полуострова

• Автор: Фомичева, Олеся Александровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 148 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 1

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 4

Глава 1. Методы определения численности и биомассы

микроорганизмов в почве 4

1.1. Культуральные методы

1.2. Методы микроскопии 5

13 Биохимические методы.

Глава 2. Содержание микробной биомассы в почвах.

2.1. Качественная и количественная оценка

состояния почвенной микробиоты

2.2. Пространственное варьирование показателей
микробной биомассы
2.3 Сезонное варьирование биомассы почвенных
микроорганизмов.
2.4. Влияние естественных свойств почвы на
биомассу почвенных микроорганизмов
2.5. Влияние антропогенных факторов на почвенные
микроорганизмы
Глава 3. Краткая характеристика природных условий Кольского
полуострова.
3.1. Геологическое строение, рельеф
3.2. Климат
3.3. Растительный покров
3.4. Общие особенности почв, как компонента
лесных биогеоценозов
3.5. Ьиогеохимические особенности почв
3.6. Влияние внутренней структуры биогеоценоза на
свойства почв.
3.7. Общие особенности первичной биологической
продуктивности
3.8. Общие особенности минерального состава
растений
3.9. Общие особенности подстилки как компонента
лесных биогеоценозов
3 Общие особенности микробного комплекса как
компонента лесных биогеоценозов.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
Глава 4. Объекты и методы исследования.
4.1. Объекты исследования.
4.2. Методика подготовки образцов почвы к
микробиологическому анализу.
Г лава 5. Численность и биомасса почвенных микроорганизмов в
коренных старовозрастных северотаежных еловых
лесов.
5.1. Микроорганизмы.
5.2. Питательный режим почв.
5.3. Сравнительная характеристика биомассы и численности микроорганизмов в разных типах ельников.
5.4. Взаимосвязи между параметрами питательного режима почв и численностью и биомассой микроорганизмов
Глава 6. Численность и биомасса почвенных микроорганизмов в
коренных старовозрастных северотасжных сосновых
лесов.
.1. Микроорганизмы
6.2. Сравнительная характеристика биомассы и численности микроорганизмов в разных типах сосновых лесов.
6.3. Питательный режим почв
6.4. Взаимосвязи между параметрами питательного режима почв и численностью и биомассой микроорганизмов
6.5. Сукцессия и микоризообразование в северотаежных сосновых лесах. 0
Глава 7. Сравнительная характеристика численности и биомассы
микроорганизмов в хвойных биогеоценозах Кольского
полуострова 6
I лава 8. Оценка влияния различных факторов на дисперсию
показателей численности основных компонентов
микробной биомассы. 7
8.1. Двухфакторный анализ 7
8.2. Четырехфакторный анализ для хвойных типов
ВЫВОДЫ 7
ЛИТЕРАТУРА


Много проблем возникает при дифференциации частиц детрита и клеток микроорганизмов, особенно, когда в результате голодания в естественном местообитании размер клеток приближается к пределу разрешающей способности микроскопа. Для того чтобы отделить клетки от твердой фазы, используют разнообразные методы предварительной подготовки, включая встряхивание, ультразвуковую обработку, растирание, изменение ионной силы и раствора, обработку поверхностноактивными агентами Звягинцев, , . Применяемые в микробиологии специальные счетные камеры Горяева, и и др. i . рекомендует добавлять в образцы для фиксирования 4 поливиниловый спирт. При использовании агаровых пленок, по Джонсу и Моллисону, достигается более равномерное нанесение почвенной суспензии, в то же время значительная толщина пленки мкм приводит к ошибке при учете клеток на Мирчинк, Паников, . Большинство методов микроскопии связано с применением красителей. Изучение бактерий, актиномицетов, грибов, простейших и нематод в естественных почвенных образцах может проводиться и без окрашивания с помощью цветной инфракрасной микрофотосъемки, отраженной и отраженно поляризованной световой микроскопии, фазового контраста с переменной амплитудой i, , . При светлопольной микроскопии мембранные фильтры обычно окрашивают эритрозином, анилиновым голубым и др. , i, , . При использовании мембранных фильтров экранирование клеток почвенными частицами является основным источником погрешностей. Разрешающая способность для оптической микроскопии обычно не превышает . Для сканирующей электронной микроскопии, трансмиссионной электронной . . Сузина и др. Дуда и др. . . i . всегда обнаруженные клетки являются живыми, но в ряде работ показана хорошая сходимость результатов счета бактерий между световой и прямой электронной микроскопией , . , i, . Обычно порядок величин счета бактерий чашечным методом на 24 порядка ниже, чем при микроскопии. Одни авторы считают, что первый метод недооценивает плотность бактериальных популяций, другие полагают, что при микроскопии ошибочно учитываются неживые частицы. Опыт исследования самых разнообразных микробных биоценозов свидетельствует, что методы, основанные на подсчете колоний микроорганизмов, выросших на селективной питательной среде в определенных условиях, не в состоянии учесть реальное количество микроорганизмов, содержащееся в исследуемых образцах воды или. Получаемые результаты в большинстве случаев оказываются намного ниже реальной численности микроорганизмов. Прямые методы подсчета численности микроорганизмов, основанные на окрашивании фиксированных на стеклах или фильтрах образцов воды почвенной суспензии разнообразными красителями, позволяют избежать основных недостатков классических методов. Быстрое развитие этого направления связано, прежде всего, с созданием новых типов красителей, появлением более совершенной техники микроскопии лазерной конфокальной сканирующей микроскопии, а также развитием методов компьютерного анализа изображения. Использование флуоресцентной микроскопии в проходящем и, особенно, отраженном свете значительно увеличило возможности изучения микроорганизмов в их природных местообитаниях, позволило учитывать не только свободные, но и адсорбированные клетки менее 0,1 мкм, дало возможность надежнее дифференцировать клетки микроорганизмов и почвенные частицы. Этот вид микроскопии применяется для определения первичной флуоресценции автофлуоресценции клеток, исследования вторичной флуоресценции после окрашивания флуорохромами , , или мечеными ферментами лизоцим меченный родамином i, i, , а также позволяет использовать специфически меченые антитела , . Ограничения всех этих методик связаны с собственной флуоресценцией минералов и органического вещества в природных средах. Использование правильно подобранных красителей и времени окрашивания позволяет снять эти ограничения.