Особенности эволюции вирусов гриппа в период 1986-98 гг. : Индикация, молекулярно-биологические свойства, структура

• Автор: Иванова, Валерия Тимофеевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 290 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА 1. СТРУКТУРА И ФУНКЦИЯ ГЕНОМА ВИРУСОВ, СВОЙСТВА КОДИРУЕМЫХ ИМ БЕЛКОВ.
1.1. Классификация вирусов гриппа
1.2. Структура вирусов гриппа
1.3. Геном вируса гриппа
1.4. Структура и свойства поверхностных и внутренних вирионных белков.
1.4.1. белки полимеразного комплекса (РВ 1,РВ2,РА)
1.4.2. гемагглютинин (НА)
1.4.3. нуклеопротеин (ИР)
1.4.4. нейраминидаза (КА)
1.4.5. матриксный белок (М1, М2)
1.4.6. неструктурные белки (N81, N82)
ГЛАВА 2. ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИРУСОВ ГРИППА В ЕСТЕСТВЕННЫХ
УСЛОВИЯХ.
2.1. Молекулярные механизмы изменчивости вирусов гриппа
2.2. Реверсия вирусов гриппа А(НШ1)
2.3. Особенности структуры и антигенных свойств вирусов гриппа А(Н2Ш), 49 циркулировавших в период 1957-1967гг.
2.4. Циркуляция вирусов гриппа А/НЗЦ2 в биосфере
2.4.1. Основные направления изменчивости вирусов гриппа А(НЗХТ2)
2.4.2. Связь между вирусами гриппа с гемагглютинином НЗ, изолированными 55 из разных источников.
2.5. Две ветви эволюции вирусов гриппа В. 57 ГЛАВА 3. ПРОИСХОЖДЕНИЕ ПАНДЕМИЧЕСКИХ ШТАММОВ ВИРУСОВ ГРИППА.
3.1. Циркуляция в биосфере вирусов гриппа А.
Реассортация генов в природных резервуарах.
3.2. Ограничительные механизмы межвидового перехода (host range).
3.3. Гипотезы происхождения пандемических штаммов.
3.1. Зооантропонозная теория
3.1. Альтернативные гипотезы
ГЛАВА 4. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА ГРИППА.
4.1. Особенности противогриппозных вакцин.
4.2. Сравнительное изучение прививочных свойств ИГВ и ЖГВ.
4.3. Методы ранней диагностики гриппа.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РАЗДЕЛ А. ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИРУСОВ ГРИППА В ПРИРОДЕ ГЛАВА 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭТИОЛОГИИ ЭПИДЕМИЙ ГРИППА В РОССИИ В 1986-98гг.
1.1. Анализ циркуляции вирусов гриппа А и В.
1.2. Индикация и свойства вирусов, изолированных в процессе надзора и не имевших эпидемического значения.
1.2.1.Исследование вирусов гриппа A(H3N2), подобных А/Гонконг/68 изолированных от детей в СССР в 1986г.
1.2.2.Антигенные и биологические свойства парамиксовирусов птиц, изолированных во время подъема заболеваемости гриппом в 1986г.
ГЛАВА 2. ИЗМЕНЧИВОСТЬ И ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ВИРУСОВ ГРИППА A/H1N1 В ИССЛЕДУЕМЫЙ ПЕРИОД (1986-98гг).
2.1. Сравнительный анализ белков эпидемических штаммов, вызвавших эпидемии в 1986-87гг., 1988-89гг. в странах, имевших общие границы с СССР.
2.2. Возврат вирусов гриппа A/H1N1 в эпидемический процесс 1995-96гг. и социркуляция их со штаммами A/H3N2 и В в 1996-98гг

ГЛАВА 3. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННЫХ И МОЛЕКУЛЯРНО- БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВИРУСОВ ГРИППА A/H3N2, ВЫДЕЛЕННЫХ В ЭПИДЕМИЯХ.
3.1. Изучение антигенного дрейфа поверхностных белков гемагглютинина и 141 нейраминидазы с использованием поликлональных и моноклональных антител.
3.2. Особенности структуры гемагглютинина эпидемических штаммов
3.3. Антигенная вариабельность внутренних белков
3.4. Анализ штаммов и сывороток от больных, ранее вакцинированных противогриппозными вакцинами.
3.4.1. Антигенная характеристика штаммов,изолированных от 163 вакцинированных.
3.4.2. Использование лектин- теста для определения динамики роста антител 166 к нейраминидазе при массовой вакцинации школьников.
ГЛАВА 4. НОВОЕ НАПРАВЛЕНИЕ ЭВОЛЮЦИИ ВИРУСОВ ГРИППА ТИПА В.
4.1. Сравнительный анализ эпидемически активных вариантов В/Виктория- 170 подобных) и новых (В/Ямагата-подобных), вызвавших эпидемию гриппа
1990-91гг. в России.
4.2. Антигенный дрейф поверхностных белков вирусов гриппа, 177 доминирующих в настоящее время в вирусных популяциях.
4.3. Структурные изменения в молекуле гемагглютинина вирусов гриппа В в 181 процессе естественной изменчивости.
4.4. Анализ материалов, полученных от школьников, привитых 188 противогриппозными вакцинами, содержащими В/Виктория-подобный
вакцинный штамм, в эпидсезон 1990-91гг.
РАЗДЕЛ В. РАЗРАБОТКА ПОДХОДОВ И МОДИФИКАЦИЯ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ И ТЕСТ СИСТЕМ ДЛЯ ИНДИКАЦИИ И ИССЛЕДОВАНИЯ ВИРУСОВ ГРИППА.

подтипов A/H1N1,H2N2,H3N2,H12N5,H7N6 (Ber et al.,1980, Lamb, Lai,1980, Porter et al., 1980, Narajima,1984, Buanagurio et al., 1986).
Анализ гена NSI 15 человеческих штаммов A/H1N1,H2N2 ,H3N2,изолированных за период 53 лет (1933-85), выявил постоянно происходящие изменения в этом гене. Скорость замен составляла 2x10 3 нуклеотидов/сайт/год .Эволюционная картина для гена NS1 представляет собой ствол дерева, основанием которого является NS штаммов A/WSN/33,A/PR/8/34. Далее на коротких ответвлениях находятся согласно годам изоляции вирусы A/H1N1,H2N2,H3N2. Сравнительный анализ генов NS1 штамма А/СССР/90/77 и A/FW/50 выявил только 5 замен вместо 46, получаемых теоретически. Эти данные указывают на необычность происхождения штамма А/СССР/90/77. Что же касается пандемических штаммов 1957, 1968гг, то при их возникновении ген NS1 не менялся (Buanagurio et al., 1986).
Белок NS1 (М=26 000Д) является ранним белком, вырабатывается в больших количествах в цитоплазме, затем мигрирует в ядро. Белок NS1 фосфорилирован, в результате посттрансляционного фосфорилирования фосфаты прикрепляются к одному-двум остаткам Тре в пересчете на молекулы (Privalsky, Penho et al., 1981).
NSI последовательность на NSI mPHK и контролирует сплайсинг в NS2 MRNA (Alonso-Caplen, Krug., 1991, Nemeroff et al., 1992). Продукт сплайсинга NS2 mPHK кодирует белок NS2 (М=14 200). Первые девять аминокислот у NS1 и NS2 одинаковы, а затем их последовательности расходятся, так как считывания 3 участка происходит со сдвигом рамки на +1 нуклеотид (Lamb, Lai, 1980).
Уровень NS2 mPHK оценивается в 10% от уровня NSI mPHK, но NS2 синтезируется только в последней фазе инфекции. В вирус инфицированных клетках NS2 присутствует в основном в ядрах.(Smith et al., 1987).
В вирионе NS2 ассоциирован с рибонуклеопротеидным ядром, этот комплекс диссоциируется после удаления Ml белка. Установлены прямые протеин-протеиновые контакты между Ml и NS2. NS2 связан с С концом М белка.
О функции NS2 известно немного. Мутации в NS2 приводят к аберрантной