Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Козлов, Сергей Александрович
02.00.10
Кандидатская
1998
Москва
95 с.
Стоимость:
499 руб.
ОГЛАВЛЕНИЕ
I. ВВЕДЕНИЕ
II. МОЛЕКУЛЯРНАЯ ОРЕАНИЗАЦИЯ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ТОКСИНОВ, ВЗАИМОДЕЙСТВУЮЩИХ С Ю-КАНАЛАМИ (ОБЗОРЛИТЕРАТУРЫ)
И. 1. Введение
II. 2. Типы К+-каналов
II. 3. Природные токсины ингибиторы К+-каналов
II. 3.1. "Длинные" токсины ингибиторы К+-ТОКОВ
II. 3.2. Апамин и MCD пептид - нейротоксины из яда пчелы Apis mellifera
II. 3.3. Нейротоксины из яда скорпионов
II. 3.3.а) Токсины, обладающие широкой специфичностью к разным типам калиевых
каналов
II. 3.3.Ь) Токсины, специфичные к потенциал-активируемым К+-каналам задержанного
выпрямления
II. 3.3.с) Токсины, специфичные к потенциал-активируемым К+-каналам А-типа
II. 3.3.d) Токсины, специфичные к Са++-активируемым К+-каналам большой
проводимости (ВК-типа)
II. 3.3.е) Токсины, специфичные к Са++-активируемым К+-каналам малой
проводимости (SK-типа)
II. 3.4. Токсины, выделенные из морских анемон и пауков, демонстрируют новый тип
пространственной организации молекулы
И. 4. Заключение
III. РЕЗУЛЬТА ТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
III. 1. Исследование влияния цельного яда скорпиона Orthochirus
SCROBICULOSUS НА ИНГИБИРОВАНИЕ ПРОВОДИМОСТИ К+-ТОКОВ В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК NG
III. 2. Исследование влияния цельного яда скорпиона Burnus eupeus ha
ИНГИБИРОВАНИЕ M-TOKOB В КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК NG
III. 3. Получение препаратов яда
III. 4. Стратегия выделения токсинов
III. 5. Выделение токсина ВеКм-1 из яда скорпиона Витнсз ЕиРЕиз
III. 6. Исследование влияния токсина ВеКм-1 на ингибирование М-токов в
культуре клеток N С
III. 7. Определение первичной структуры ВеКм
III. 8. Выделение токсина ОвКП из яда скорпиона Октноснжиэ $сков1сиьозт49
III. 9. Определение биологической активности промежуточных фракций и токсина 08К-1 в электрофизиологических экспериментах на КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК N0
III. 10. Определение первичной структуры ОьК
III. 11. Сравнительный анализ первичных структур токсинов ОвКИ и ВеКм
III. 12. Анализ пространственной организации токсина 08К
IV. МА ТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
IV. 1. Материалы
IV. 1.1. Оборудование
IV. 1.2. Расходные материалы
IV. 1.3. Реактивы и ферменты
IV. 1.4. Клетки
IV. 1.5. Растворители и основные растворы
IV. 1.5.а) Хроматографические буферные растворы
IV. 1.5.Ь) Буферные растворы для электрофореза
IV. 1.5.с) Растворы для проведения электрофизиологических экспериментов
IV. 2. Методы
IV. 2.1. Получение и первичное фракционирование ядов
IV. 2.1 .а) Получение яда скорпионов
IV. 2.1 .Ь) Первичное фракционирование яда скорпиона Вшкиз еиреиз
IV. 2.1 .с) Первичное фракционирование яда скорпиона ОпЬосМгиз зсгоЫсиЬзих
IV. 2.1.6) Проведение гель-фильтрационной хроматографии
IV. 2.1 .е) Анализ полученных фракций SDS электрофорезом
IV. 2.2. Выделение полипептидных токсинов
IV. 2.2.а) Выделение ВеКт
IV. 2.2.Ь) Выделение OsK
IV. 2.2.с) Анализ чистоты полученных фракций методом капиллярного электрофореза70
IV. 2.2.d) МАЛДИ-анализ молекулярной массы токсинов
IV. 2.3. Определение первичной структуры белков
IV. 2.3.а) Восстановление и модификация SH-групп остатков цистеина
IV. 2.3.Ь) Ферментативное расщепление полипептидиой цепи
IV. 2.3.с) Определение N-концевого аминокислотного остатка
IV. 2.3.d) Определение С-концевого аминокислотного остатка
IV. 2.3.е) Раскрытие заблокированного N-концевого аминокислотного остатка
IV. 2.3.f) Определение N-концевой аминокислотной последовательности методом
Эдмана
IV. 2.4. Компьютерный анализ белковых последовательностей
IV. 2.5. Анализ биологической активности токсинов и промежуточных фракций
IV. 2.5.а) Определение концентрации белка
IV. 2.5.Ь) Электрофизиологические исследования
V. ВЫВОДЫ
VI. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
VII. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Обзор литературы
/WV с I D T I Р К S R ч /W С Т A F Q АЛ ЛЛА CKHSMKYRLSF - - - < 3 R К Т : g т с
РТСК01_ I Р V Э Е С Т Э I РСР тем КУР I N I - - СРКТССЭС НтК
А С К О N Р А А А Т СКНУ/КЕМКЫСС- вОКУАТМСА КТ СвКС АвКэ УСРО№РКЕТАСРНАК8 16МСКТ8аКУРАМСАКТСЕ1С ВдК
ЕСРУ I. РОССКТТЭО- С С К Н I С С К Е К О К У С АИ О Е Т Е 3 НаТх
ЕСРУ I. ЕСССКТТАО - С С КН Ь С С К Е Р О К У С А№ О Е Т ЕЭ НаТх
ВС5 у | д/ н у С О Т О С! 3 Е С С Е 3 'Л' К С 3 Р О Е - - С К У V ! О УУ НрТх
О ОССКЬ Е Б вС ОТ МА й -ССЕСУУСР1.Л/- - - CKLDW НрТх
ЕССП Р 5 вС Э Т Н А О - С С Е вЕ I CKLW - - - СРУЕРТИ НрТх
Рис. 8 Аминокислотные последовательности токсинов — ингиби-
торов К+-каналов, выделенных из пауков и морских анемон. Над структурой 8Ж токсина схематично приведены элементы вторичной структуры токсина и схема замыкания дисульфидных связей. Аминокислотные остатки, важные для взаимодействия 8Ж с К+-каналом, подчеркнуты.
Анализ аминокислотных последовательностей токсинов морских анемон выявил в них общий мотив структурной организации данных токсинов. Пространственная структура этого класса токсинов была определена при исследовании токсинов ВдК и БИК методами спектрального анализа [126,127].
Рис. 9 Пространственная структура токсина БЖ, полученная спектроскопией ЯМР.
Молекула токсина ShK представляет собой глобулу, состоящую из трех спиральных единиц: двух а-спиральных участков в средней части молекулы Ala14-HiSi9, Met2i-Arg24 и N-концевой спирали типа 310, образованной аминокислотными остатками Рго8 - Cys12. C-Концевой фрагмент молекулы
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Модифицированные субтилизины в сегментной конденсации пептидов | Колобанова, Светлана Викторовна | 1999 |
Галектин-опосредованное связывание вируса гриппа с клетками-мишенями | Черный, Евгений Станиславович | 2013 |
Конъюгаты нуклеозидов и флуоресцентных красителей, содержащие сопряженную систему кратных связей | Малахова, Екатерина Владимировна | 1998 |