Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях

Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях

Автор: Ващенко, Владимир Иванович

Шифр специальности: 14.00.46, 03.00.01

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2000

Место защиты: Санкт-Петербург

Количество страниц: 243 с. : ил.

Стоимость: 250 руб.

Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях  Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях 

Глава 1. Методы исследования субпопуляций лимфоидных клеток
. Изучение фагоцитоза и метаболической стимуляции гранулоцитов крови и костного мозга. Глава 2. Современные методы изучения сверхспиральной ДНК эукариот
наложением зажима на контралатеральный главный бронх. Во избежание значительной примеси крови в смывах животных предварительно обескровливали путем перерезки брюшной аорты. При этом проводился визуальный осмотр органов брюшной полости и грудной клетки. Бронхоальвеолярные макрофаги получали путем шестикратного промывания бронхов 0,2 раствором версена НИИ вирусных препаратов, Москва при комнатной температуре РаадПагс Е. Я., . При этом клетки пребывали в растворе версена не более минут. Затем их осаждали в центрифужных пробирках при обмин на лабораторной центрифуге ОПН3 в течение 8 минут, ресуспендировали в инкубационной среде 9 и хранили при пониженной температуре 4С во избежание агрегации до момента посева на чашки. Подсчет клеток из бронхиальных смывов проводили в камере Горяева на микроскопе МБИ3.


После однократного центрифугирования при 0д в течение минут клетки ресуспендировали в среде 9 без гепарина в объеме мл, фильтровали через слоев медицинской марли
и подсчитывали содержание миелокариоцитов в камере Горяева. Далее клетки костного мозга разбавляли до 1,,0x6 кл. Выделение субпопуляций лейкоцитов человека. Лимфоциты. Получение лимфоцитов из периферической или венозной крови осуществляли по методу Хейфеца и Абалакина Хейфец X. Б. . Абалакин А. В., в градиенте фиколверографина либо в стандартномтном растворе фиколлпака i, Швеция. Гранулоциты, лимфоциты, моноциты. Выделение этих субпопуляций клеток из периферической или венозной крови человека производили по модифицированному методу Бикало i . Для этого использовали многоступенчатый градиент фиколлверографина, который готовили из трех заранее подготовленных растворов А, Б, В . Раствор А состоял из мл раствора верографина, раствор Б из мл 9 фиколла, раствор В из мл ,6 фиколла. Для получения раствора Г мл Б смешивали с мл раствора А. Раствор Д получали смешивая мл раствора В и мл раствора А. Затем в стандартную центрифужную пробирку объемом мл осторожно наливали 2 мл полученного раствора Д а сверху наслаивали 2,5 мл раствора Г. На сформированный таким образом двухступенчатый градиент осторожно наслаивается 5 мл крови разбавленной в два раза забуференным 0,9 раствором хлорида натрия. Центрифугирование производили на центрифуге Т Чехия в горизонтальном роторе в течение минут при 0 и С. Из полученных после осаждения семи слоев использовали фракцию 5 и фракцию 6 после стандартной трехкратной отмывки раствором Хенкса или средой 9. Цитологические методы оценки состояния клеток. Оценка жизнеспособности клеток при помощи витальных красителей.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

10.02.2018

Бесплатные авторефераты диссертаций

Дорогие друзья! Мы развиваем наш сервис и спешим сообщить, что на нашем сайте для ознакомления доступны афторефераты диссертаций. На данный ...

02.01.2018

С Новым 2018 Годом!

Поздравляем Вас с Новым 2018 Годом и наступающим Рождеством! Желаем Счастья и новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.125, запросов: 159