Иммуноферментный метод определения трофобластического бета1-глобулина в сыворотке крови человека и его применение при исследовании герминативных опухолей яичка

• Автор: Якобидзе, Вахтанг Эдуардович
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ. Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫв. Иммуноферментный метод . Трофобластический бета2глобулин. Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Иммунодиффузионный метод. Определение хорионического гонадотропина в моче . Определение альфафетопротеина в сыворотке крови . Глава Ш. Приготовление очищенного препарата ТБГ. Глава У. I. Изучение ТБГ в сыворотке крови доноров . Стр. Иммуноферментное определение ТБГ в сыворотке крови больных с трофобластическими опухолями матки . Изучение ТБГ в сыворотке крови больных с нетрофобластическими опухолями. Глава У. Содержание ТБГ в сыворотке крови больных с опухолями яичка в зависимости от стадии заболевания . Глава У1. ВЫВОДЫ. УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУШ7
ный метод , основанный на обработке фермента глютаровым альдегидом, выделение модифицированного фермента с последующим соединением его с антигеном антителом. При этом происходит образование гибридных молекул однородного состава с молекулами фермента на одну молекулу иммуноглобулина. В данном случае имеет место сохранение как ферментативной, так и иммунологической активности.


Например, изза
быстрого гидролиза молекул фтора и хлора, 4,4дифтор2,2динитродифенил сульфон и хлористый цианур могут быть использованы исключительно только в одноэтапном синтезе, что естественно уменьшает эффективность их применения. Другие, в частности, 2,4дзоцианатотолуол и цбензохинон являются более стабильными в водной среде, поэтому их можно использовать как при одноэтапном, так и двухэталном методах приготовления конъюгатов 9. Хотя во втором случае и удается получить высокоактивные конъюгаты, однако их выход в большинстве случаев невелик и составляет . Более эффективен метод получения иммуноферментных конъюгатов, основанный на принципе модификации сульфгидрильных групп Пофенилендималеимидом, используемый, в основном, для мечения галактозидазой ,. Ковалентные конъюгаты можно хранить в замороженном и в лиофиагизированном виде, а также и в глицериновом растворе. Стабильность при хранении более одного года в растворе при 4С отмечена для конъюгатов пероксидазы 9, галактозидазы , глюкозоксицазы ,1,2 и щелочной фосфатазы ,,,4, а при хранении в лиофилизированном виде до двух лет. При связывании фермента с антигеном антителом следует использовать такой метод, который бы позволял получать большой выход конъюгатов, при сохранении высокой каталитической и иммунохимической активности. Каталитическая активность фермента обусловливает чувствительность детекции ферментной метки и чувствительность способа определения продукта ферментативной реакции. Для проявления ферментной активности и оценки опыта подбирают такие субстраты хромогены, которые дают значительный цветовой эффект после ферментативной деградации.