Биофармацевтический анализ антидотных свойств кальция фолината при высокодозной химиотерапии метотрексатом остеосаркомы у детей

• Автор: Кошечкин, Константин Александрович
• Шифр специальности: 15.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 162 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность темы.

Цель и задачи исследования

Научная новизна исследования.

Научнопрактическая значимость исследования

Внедрение в практику.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Высокодозная химиотерапия метотрексатом на фоне антидотной терапии кальция фолинатом остеосаркомы у детей.
1.2. Механизм действия метотрексата и роль сопроводительной терапии кальция фолинатом
1.3. Токсические проявления метотрексата, купируемые введением кальция фолината.
1.4. Значение применения кальция фолината при высокодозной терапии метотрексатом
1.5. Химическое строение, фармакокинетические и фармакологические характеристики кальция фолината.
1.5.1. Химическое строение и свойства кальция фолината
1.5.2. Фармакологическое действие кальция фолината
1.5.3. Роль фолиевой кислоты и се производных в организме человека и их метаболизм
1.5.4. Способы применения и дозы кальция фолината.
1.5.5. Препараты кальция фолината.
1.6. Контроль качества препаратов кальция фолината по данным государственных фармакопеи и НД производителей.
1.6.1. Обзор государственных фармакопейных статей на субстанцию кальция
фолитата
1.6.2. Обзор фармакопейных статей предприятий на лекарственные формы кальция фолитата
1.6.3. Мониторинг производных ФК в сыворотке крови
1.7. Мониторинг биохимических показателей крови
1.7.1.Некоторые клинические и молекулярные аспекты токсических осложнений
ВДХТ М1х
1.7.2. Биохимические показатели в оценке поражения печени при ВДХТ МГх ОС у детей.
1.8. Нарушение состояния антиоксидантиой системы.
1.8.1. Механизм возникновения свободных радикалов.
1.8.2. Методики для определения активности АОС
1.9. Математическое моделирование биокинетики
Заключение по главе I
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.1. Характеристика группы больных остеосаркомой и аспекты проводимой терапии .
2.1.1. Характеристика группы больных остеосаркомой
2.1.2. Схема проведения химиотерапии больным ос геосаркомой.
2.1.3. Введение кальция фолината больным остеосаркомой
2.1.4. Клиническая характеристика результатов проводимой терапии
2.2. Методы определения лекарственных препаратов кальция фолината
2.2.1. Оборудование и реактивы
2.2.2. Стандартные образцы
2.2.3. Объекты анализа
2.2.4. Оценка хроматографических параметров.
2.2.5. Расчет количественного содержания кальция фолината.
2.3. Определение биохимических показателей крови при ВДХТ М1х остеосаркомы у детей.
2.4. Определение показателей состояния антиоксидаптной системы.
2.4.1. Методика определения общего антиоксидантного статуса в сыворотке крови.
2.4.2. Методика определение активности супероксиддисмутазы в эритроцитах.
2.4.3. Методика определение активности глутатионредуктазы
2.4.4. Методика определения активности у глутамилтрансферазы
2.5. Определения кинетических параметров биохимических показателей крови.
2.6. Статистическая обработка результатов
Заключение по главе II.
3.1 Разработка методики определения кальция фолината.
3.1.1 Подготовка стандартных растворов
3.1.2. Подбор оптимальных условий разделения кальция фолината и фолиевой кислоты.
3.1.3. Выбор условий детектирования.
3.1.4. Параметры разделения и метрологическая характеристика методики.
3.2 Определение подлинности и содержания кальция фолината в инъекционных лекарственных формах
3.2.1 Подготовка проб для хроматографического анализа.
3.2.2 Анализ лекарственных препаратов кальция фолината
3.2.3 Определение концентрации кальция фолината методом ВЭЖХ в сыворотке
крови.
3.3. Мониторирование биохимических показателей гепатотоксичности и их роль при проведении сопроводительной терапии кальция фолинатом
3.3.1. Динамика содержания общего белка и альбумина
3.3.2. Динамика содержания креатинииа и мочевины.
3.3.3. Динамика содержания кальция.
3.3.4. Динамика содержания АСТ.
3.3.5. Динамика содержания АЛТ.
3.3.6. Динамика содержания ЛДГ.
3.3.7. Динамика содержания общего билирубина.
3.3.8. Кинетические характеристики показателей гепатотоксичности.
3.4. Показатели состояния антиоксидантной системы и их значение в проведении антидотной терапии кальция фолинатом.
3.4.1. Результаты мониторинга показателей АОС
3.4.2. Биокинетика изменения показателей АОС при сопроводительной терапии кальция фолинатом
3.5. Применение препарата Гептрал совместно с кальция фолинатом.
Заключение по главе 3.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Чтобы преодолеть резистентность этого препарата, была предложена концепция высокодозной терапии . Использование препаратов кальция фолината, при ВДХТ Ми с одновременным фармакокинетическим контролем позволило выбрать оптимальные дозы препарата, характеризующиеся максимальным терапевтическим эффектом и минимальной токсичностью. Одним из примеров такого лечения в детской онкологии является протокол ВБМ , который в г. Берлина, Франкфурта и Мюнстера, что и отражено в его названии , 2. Этот протокол в различных вариантах стал применяться для лечения гемобластозов острого лимфобластного лейкоза и неходжкинских лимфом. В настоящее время Ми начал широко применяется в онкологии, особенно детской при лечении ОС. Проблема индивидуализации лечения ОС у детей остается
актуальной до настоящего времени. Не вызывает сомнения, что выявление больных с высокой злокачественностью, требующей изначально более агрессивного лекарственного лечения, является сложной задачей, решение которой возможно только при учете множества биологических характеристик опухоли. Некоторые их них изучаются в контексте их прогностической значимости, т. В исследованиях , , , , 7, 2 показано, что при локализованных формах ОС на прогноз влияет гистологический подтип опухоли, возраст пациента и размеры внекостного компонента опухоли. М4х относится к препаратам группы антиметаболитов и является структурным аналогом и антагонистом ФК. Создание антиметаболитов ФК обосновано тем, что тетрагидрофолиевая кислота ТГФК имеет большое значение для биосинтеза многих метаболитов нуклеинового обмена, особенно тимидиловой кислоты и пуринилнуклеозидов. А так как в опухолевых клетках биосинтетические процессы происходят довольно бурно, потребность в этих соединениях повышена. Известно, что образование тетрагидрофолисвой кислоты ТГФК из ФК происходит в две ступени через промежуточный продукт дигидрофолиевую кислоту ДГФК при участии ферментов фолатредуктазы и дигидрофолатредуктазы. Ингибиторы этих ферментов могут действовать как антагонисты ФК. Под влиянием 1уИх тормозится активность дигидрофолатредуктазы ДГФР и нарушается превращение ФК в ТГФК, участвующую в метаболизме и репродукции опухолевых клеток . Установлено чрезвычайно высокое и практически необратимое сродство метотрексата к ДГФР, связанное с резким увеличением основности . Обнаружена тесная связь клеточного деления с синтезом ДГФР перед началом митоза ее количество удваивается, а затем поддерживается на постоянном уровне , , . Проникая в клетку, МЙх прочно связывается с ДГФР, необратимо ее инактивирует и выводит из строя биосинтетические процессы, сопряженные с циклом ФК. Однако значительное снижение активности фермента в опухолевой клетке происходит лишь при высокой концентрации ДГФК. Лишь после связывания Мйс избытка ДГФК начинается уменьшение содержания ДГФР, т. МКх относится к пороговым ингибиторам. Сильнее и чаще всего в опухолях и нормальных тканях костный мозг, селезенка, слизистая кишечника нарушается биосинтез пуринов и тимидилата. В некоторых лейкозных клетках МЙх почти полностью угнетает синтез тимидилата в результате блока тимидилат синтетазы. Для восстановления этих процессов больным вводится кальция фолинат на час после введения М1х , 0. Поразному действует Мх на активность ДГФР. У детей препарат приводит к угнетению синтеза тимидилата и пуринов, а у взрослых синтез пуринов не нарушается. При воздействии препаратом на опухолевые клетки вначале изменяется пул предшественников ДНК, что в свою очередь вызывает снижение уровня РНКсинтезируюицих ферментов РНКполимеразы А и В, а затем тормозится синтез РНК. Кроме того, происходит усиленное дезаминирование дЦМФ. Совокупность этих изменений и приводит клетку к гибели. Предотвращение этого процесса в здоровых клетках возможно за счет введения кальция фолината, который является донором ТГФК без участия ДГФР, и восстанавливает работу клеточного синтеза в обход заблокированной реакции , 6, 8. М1х конкурирует с восстановленными фолатами за активный, опосредованный транспорт через клеточные мембраны.