Выявление нарушений гемостаза при сепсисе с помощью метода пространственного роста сгустка

• Автор: Сошитова, Наталья Павловна
• Шифр специальности: 03.01.02, 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 114 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Современные представления о системе гемостаза

1.1.1. Плазменное звено системы свертывания крови .

1.1.2. Активация свертывания

1.1.3. Рост сгустка в пространстве, петли положительной обратной связи

1.1.4. Ингибиторы свертывания.

1.1.5. Роль диффузии в процессе свертывания.

1.1.6. Взаимодействие системы свертывания с другими системами.

1.2 Нарушения плазменного звена системы свертывания крови

1.3 Современные методы диагностики состояния системы свертывания

1.3.1. Тесты времени свертывания
1.3.2. Маркеры активации свертывания
1.3.3. Тромбоэластография.
1.3.4. Тест генерации тромбина
1.4 Пространственный рост сгустка
1.5 Нарушения свертывания при сепсисе. ДВСсиндром.
1.5.1. Взаимодействие систем свертывания и воспаления.
1.5.2. ДВСсиндром
1.6 Постановка задачи
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1 Общий объем работы.
2.2 Материалы
2.3 Контрольные группы
2.3.1. Здоровые добровольцы.
2.3.2. Больные с различными нарушениями в системе свертывания крови.
2.4 Больные в состоянии сепсиса, септического шока.
2.5 Дизайн исследования
2.6 Подготовка плазмы крови
2.6.1. Получение крови и плазмы.
2.6.2. Стабилизация плазмы.
2.6.3. Ингибирование контактной активации.
2.6.4. Рекальцификация плазмы.
2.7 СТА 1ДАРТНЫЕ КОЛГУЛОЛОГИЧЕСКИЕ ГЕСТЫ И ТЭГ
2.7.1 Клоттинговые тесты и тест на Ддимеры
2.7.2 Тромбоэластография.
2.8 Иммобилизация тромбопластина на пластиковый активатор
2.9 ПР0СТРАСТВЕ1II1ЫЙ РОСТ СГУСТКА.
2.9.1. Метод пространственного роста сгустка
2.9.2. Схема и принцип работы прибора Тромбоимаджер.
2.9.3. Обработка полученных при исследовании кадров и анализ данных.
2. Контрольные исследования для теста пространственного роста сгустка. .
Диапазон нормальных значений параметров пространственного роста
сгустка
Влияние условий осаждения клеток на пространственный рост сгустка
ространственный рост сгустка в бедной тромбоцитами плазме
Стабильность параметров иространетвешюш роста сгустка
2. Статистическая обработка результатов
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1 Пространсгвенный рост сгустка в норме и при нарушениях свертывания. .
3.1.1 Диапазон нормальных значений параметров пространственного роста
сгустка
3.2 Контрольные тесты для пространственного роста сгустка
3.2.1 Зависимость пространственного роста сгустка от условий осаждения клеток.
3.2.2 Пространственный рост сгустка в бедной и свободной от тромбоцитов
плазмах
3.2.3 Стабильность пространственного роста сгустка в бедной тромбоцитами
плазме.
3.2.4 Воспроизводимость теста пространственного роста сгустка на образцах
плазмы крови, полученной из разных венозных сосудов
3.2.5 Воспроизводимость теста пространственного роста сгустка, выполненного на
одном образце плазмы крови.
3.2.6 Изменение параметров пространственного роста сгустка у здоровых доноров
в течение длительного периода времени
3.3 Пространственный рост сгустка у больных с сепсисом и септическим ШОКОМ
3.3.1. Изменения параметров пространственного роста сгустка у больного с септическим шоком, осложнившимся тромбозом внутренней яремной вены
3.3.2. Больная с повторными эпизодами септического шока
3.3.3. Влияние антикоагулянтной терапии на пространственный рост сгустка.
3.4 Динамика стационарной скорости роста сг устка и плазменной концентрации Ддимеров у больных с гиперкоагуляцией
3.5 Оценка различий в плазменной концентрации Ддимеров у больных с гипокоагуляцией, либо нормой и гиперкоагуляцей по данным АЧТВ и ТЭГ
3.6 Информативность тесга пространственного роста сгустка у больных без прогрессирующей гиперкоагуляции
3.7 Корреляции между параметрами коагулологических тестов
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Чувствительность метода пространственного росга сгустка к нарушениям гемостаза при сепсисе
4.2. Стабильность параметров пространственного роста сгустка.
4.3. Перспективы дальнейших исследований и применения метода пространственного роста сгустка в клиниках для лабораторной диагностики
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Приложение
Список литературы


Такие глобальные тесты свертывания, как тромбоэластография ТЭГ и тест генерации тромбина, выявляют при сепсисе замедление фазы активации свертывания с последующей нормальной либо ускоренной фазой распространения процесса . Гипокоагуляция, согласно ТЭГ, чаще наблюдается у больных с ДВС ,. Аналогичные результаты получены и в исследованиях, проведенных с помощью теста генерации тромбина . Эти данные не позволяют сделать однозначный вывод о возможности использования глобальных тестов для мониторинга системы гемостаза при сепсисе. Тест пространственного роста сгустка основан на принципе видсомикроскопнческого наблюдения за ростом фибринового сгустка в плазме после активации свертывания иммобилизованным на поверхности тканевым фактором . Этот метод моделирует условия протекания процесса свертывания i viv, так как отражает как биохимические реакции каскада свертывания, так и процессы диффузии . Данный тест ранее использовался при изучении нарушений свертывания при гемофилиях А и Б и других врожденных и приобретенных дефицитах факторов свертывания ,. VII VII и аптамера антагониста ингибитора пути тканевого фактора I . Эти результаты позволяют предполагать, что тест пространственного роста сгустка может быть чувствителен к изменениям гемостаза, возникающим при сепсисе. Однако данные о применении этого метода для диагностики нарушений системы гемостаза у больных сепсисом отсутствуют. Цель работы Исследовать изменения пространственного роста сгустка у больных сепсисом и септическим шоком в процессе их лечения и сравнить информативность нового метода с традиционными методами оценки состояния гемостаза. Исследовать стабильность параметров пространственного роста сгустка к преаналити чес кому и аналитическому этапам проведения теста, определить диапазоны нормальных значений параметров теста. Исследовать изменения пространственного роста сгустка и показателей стандартных тестов состояния системы свертывания у пациентов с сепсисом и септическим шоком в процессе их терапии. Сравнить чувствительность метода пространственного роста сгустка с чувствительностью стандартных тестов времени свертывания и тромбоэластографии. Научная новизна. В работе оценен диагностический потенциал пространственно гетерогенной экспериментальной модели свертывания крови, изначально разработанной как модель для фундаментальных и прикладных научных исследований. Исследованы изменения динамики пространственного роста сгустка у больных с сепсисом и септическим шоком на протяжении месяца с момента выявления инфекции, измерена стационарная скорость роста сгустка показатель, учитывающий принципиальную особенности протекания свертывания крови в организме пространственную неоднородность. Показано, что увеличение стационарной скорости роста сгустка ассоциируется с последующим увеличением в плазме крови концентрации Ддимеров. Научнопрактическое значение. Возможность выявлять с помощью пространственного роста сгустка гипо и гиперкоагуляцию, а также изменения, возникающие при проведении антикоагуляитной терапии, открывает широкий спектр для применения этого метода как для проведения исследований системы гемостаза у больных со склонностью к кровоточивости либо тромбообразованию так и для изучения действия препаратов, воздействующих на свертывание крови. Положения, выносимые на защиту. Диапазоны нормальных значений параметров пространственного роста сгустка лаг период от 0. Параметры пространственного роста сгустка стабильны на этапах подготовки образца и постановки теста. Относительные погрешности определения начальной и стационарной скоростей роста сгустка в тесте не превышают 8. У больных с сепсисом традиционные клотгинговые тесты, а также параметры ТЭГ не отражают активацию свертывания крови. Пространственный рост сгустка отражает развитие гиперкоагуляции у больных с сепсисом и септическим шоком и гипокоагуляцию на последней стадии ДВС при коагулопатии потребления. Пространственный рост сгустка регистрирует развитие гиперкоагуляции у больных с сепсисом и септическим шоком раньше, чем в плазме крови выявляется повышение концентрации Ддимеров.