Изучение регуляции транскрипции гена tag7/PGRP на различных модельных системах

• Автор: Рузов, Алексей Сергеевич
• Шифр специальности: 03.00.26
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 107 с. : ил.

Список нсполыуемых сокращений. Обзор лнгеразуры. Введение. Мышиный ген 7. Лизоцимы. Общая характеристика. Эиханссрные последовательности куриного лкзоцнма. Влияние мегнлиовая ДНК на экспрессию лнзоцнма. Санленсерные элементы в регуляции лнзоцнма. Цитокнны семейства фактора некроза опухолей ссмснс ва и регуляция их экспрессии. Посттранскрипцнонная регуляция ФНО. Регуляторные последовательности промоторимх областей генов лнмфотокснна млекопитающих. Лммфо токсин р и регуляция его экспрессии. Материалы и методы . Бактериальные штаммы и плазмиды. Определение нуклеотидной последовательности ДНК. Картирование участков гиперчувствительности к ДНКазе I. Выделение ядернмх белковых экстрактов. Сайтиаправленный мутагенез. Анализ ядерных белковых экстрактов с помощью экспериментов по торможению ДНКбелковых комплексов в геле. Иммуиопреципитацыи с поликлональными 7 антителами н разделение белков в денатурирующем ПААГ. Определение последовательности ДНК промоторной области мышиного гена . КСМЛО, КСМЛ0 и ВМРпечсиь. Определение участков ДНКбелковых взаимодействий i vi в области с координатами 2, п. Изучение индукции транскрипции гена 7 под действием липополнсахарата в клетках линии КСМЛО. Изучение индукции транскрииини гена 7 под действием и РМА по измерению САТакгивиости конструкции 3i в клеточных линиях мыпжных лымфом I 1 и . Изучение индукции транскрипции гена 7 на модельной сисгемс клеток человеческой лимфомы линии . Промоторная область, знхансср, сайленсер, 7, , кВ, , регуляция транскрипции. Введение. Изучение регуляция экспрессии различных генов важное направление в современной молекулярной генетике. Регуляция экспрессии может осуществляться на нескольких принципиально различных уровнях. К таковым надо отнести уровень регуляции транскрипции, регуляции трансляции, уровень посттранскрипционных модификаций РНК. Знание о процессах регуляции экспрессии генов позволяет во многом приблизиться к пониманию механизмов функционирования не только клетки, как основной единицы живого, но и многоклеточного организма. Такие процессы как днфференцнровка тканей, эмбриогенез, иммунный ответ, образование опухолей и т. Именно изза этого изучение регуляции генов является во многом центральным ДЛЯ современной науки. Именно в згой области молекулярная биология с одной стороны, и науки, изучающие такие многоклеточные структуры, как ткали и органы, их системы гистология, иммунология, организмы, как целое, физиология, биология развития, эмбриология, с другой стороны, практически смыкаются друг с другом. Продукт гена 7 интересен тем. Поэтому, изучение регуляции транскрипции этого гена представляет несомненный интерес как для понимания фундаментальных закономерностей регуляции работы генов, так и для понимания роли 7 в функционировании эукариотического организма. Основной целью данной рабош являлось изучение регуляции транскрипции мышиного гена 7 на различных модельных системах и выявление и характеристика элементов иромоторной области данного гена, ответственных за поддержание транскрипционной активности в клетках тех линий, где наблюдается экспрессия 7 и за подавление транскрипционной активности в клетках линий, где экспрессия гена отсутствует. Ставилась также задача изучить возможность индукции данного гена различными агентами в ряде клеточных линий и характеризовать элементы его промогорной области, ответственные за нее. Мышиный ген 7 был клонирован в лаборатории молекулярной генетики рака института биологии гена РАН . Авторами была показана структурная близость гена к цнгокинам семейства фактора некроза опухолей ФНО, а также то, что геномная структура 7 близка к геномной структуре генов локуса фактора некроза опухолей . В работе 2 белок 7 характеризуется как новый цитокнн. Экспрессия гена характерна для лимфоидных тканей, коспюго мозга, а также отдельных частей мозга, легких и селезенки мыши и различных раковых клеточных линий.