Генетическое разнообразие и родство двуполых и однополых ящериц комплекса Lacerta saxicola на основе молекулярных маркеров RAPD

• Автор: Рябинина, Наталия Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.26
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 107 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика и проблемы таксономии

скальных ящериц Кавказа комплекса xi.

1.2. Нерегулярные способы размножения. И

1.2Л. Партеногенез как тип клонального размножения.

1.2.2. Другие типы клонального размножения

гиногенез, аидрогенез, гибридогенез.

1.2.3. Партеногенетические виды ящериц рода .

1.2.4. Преимущества партеногенеза.

1.3. Гипотезы о происхождении и причинах
возникновения однополого размножения у позвоночных.
1.3.1. Гибридогенное происхождение однополых ящериц
рода .
1.3.1.1. Мейотический партеногенез у однополых видов ящериц.
1.4. Биохимические и молекулярногенетические
исследования партеногенетических видов рода .
1.5. Молекулярногенетические маркеры
в изучении полиморфизма ДНК.
1.5.1. Молекулярные маркеры, основанные на полиморфизме
длины рестрикционных фрагментов.
1.5.2. Молекулярные маркеры, выявляемые
с помощью полимеразной цепной реакции.
1.5.2.1. анализ.
1.5.2.1.1 .Методология метода .
1.5.2.2. Микросателлитные варианты молекулярных маркеров.
1.5.2.3. Использование в популяционной генетике.
1.5.2.4. Использование маркеров для
меж и внутривидовых исследований.
1.5.2.5. Возможность использования маркеров
в изучении проблемы гибридизации видов.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАИЯ
2.1. Объект исследования.
2.2. Методы исследования ДНК.
2.2.1. Выделение ядерной ДНК.
2.2.2. Полимеразная цепная реакция с использованием
случайных праймеров РСК.АРО, оптимизация условий.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Внутрипопуляционный полиморфизм ДНК однополых
ящериц рода Ьасена
3.2. Внутрисемейный полиморфизм ДНК
в партеногеиетических семьях вида ТасеПа ипйехиаШ.
3.3. Внутрипопуляционный полиморфизм ДНК
у двуполых видов рода ЪасгПа
3.4. Межпопуляционный полиморфизм ДНК
однополых и двуполых видов рода ЬасегШ
3.5. Межвидовой полиморфизм ДНК некоторых
двуполых видов ящериц рода ЬасеПа
3.6. Родительские виды партеногеиетических форм
скальных ящериц по данным метода ЯАРЭ.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Расегббае комплекс 1мсеПа ахко1а Кавказа, формообразование внутри которой началось сравнительно недавно, после последнего оледенения и, повидимому, продолжается и в настоящее время. Предложенная на основе морфологии систематика чрезвычайно сложна и оставляет много неясностей в характеристике многочисленных популяций комплекса. В тоже время эта группа рептилий имеет в своем составе популяции, размножающиеся бесполым путем партеногенез, которые, как полагают, являются продуктом межвидовой гибридизации двуполых видов. Вопрос о происхождении однополых форм животных привлекает внимание исследователей с момента открытия этого уникального биологического явления Астауров, Vi, . Как было показано, в разных таксонах линии, размножающиеся партеногенетически, могут возникать либо спонтанно, из известных материнских форм, либо их происхождению предшествует акт гибридизации двух разных видов, в результате которого нарушается система редукционного деления мейоза и образуются зародышевые клетки с диплоидным набором хромосом ii, . Партеногенез у рептилий, изучавшийся, в основном, на примере ящериц сем. i Даревский, ii , и i i . , v, , . Однако до начала работ нашей лаборатории, не было опубликовано данных по прямому анализу геномной ДНК партеноформ в сравнении с ДНК предполагаемых родительских видов, что единственно являлось бы прямым доказательством их гибридного происхождения. Анализ митохондриальных ДНК, предпринятый Морицем и соавт. i . Данные указанных авторов показали, что предполагавшиеся в качестве материнских на основе косвенных сведений виды действительно могли бы участвовать в гибридогенезе, однако в этой работе набор видов был крайне ограничен, и не проанализированными остались многие виды, находящиеся в достаточно близком родстве с партеновидами, участие которых нельзя было исключить ii. Ше, вопрос о реальных участниках гибридогснсза оставался до конца не выясненым. Метод таксонопринта, использованный ранее в нашей лаборатории, свидетельствовал в пользу гибридогенной природы образования 3х из 5ти исследованных партеногенетических форм скальных ящериц. Но остались не разрешенными вопросы, конкретно какие виды со стороны отца принимали участие в гибридообразовании для Ь. М, Ь. пагет или . Шв участвовал с материнской стороны. Мы полагали, что использование метода ЯАРО может оказаться незаменимым в изучении вопроса об участии полиморфных двуполых популяций и видов в образовании партеногенетических форм, в поисках в составе их генома молекулярных маркеров того или иного двуполого вида. Проблема гибридогенного видообразования весьма актуальна в настоящее время, а объект исследования партеногенегические ящерицы маю изучен, чрезвычайно интересен и важен для понимания процессов формообразования и видообразования. В нашем распоряжении имелись двуполые виды как предполагаемых И. С. Даревским в качестве основных кандидатов Даревский, , так и ряд близкородственных видов, до сих пор не исследованных в качестве таковых. Некоторые из предполагаемых родителей . Поскольку до нашей работы ДНК ящериц комплекса асега яахсоа не были исследованны методом КАРО, были не известны уровни внутрипопуляционной, межпопуляционной и межвидового полиморфизма по локусам ЯДРО. Поэтому в нашей работе были поставлены следующие задачи. Проанализировать возможно большее число доступных популяций двуполых видов комплекса 1мсега ах1со1а методом ЯАРО с помощью нескольких праймеров и решить вопрос о возможности использования этого метода в филогенетических исследованиях этой группы. Исследовать дивергенцию доступных популяций четырех однополых видов. Сопоставив молекулярные характеристики, найти возможные пары двуполых видов потенциальных участников партеногенеза четырех однополых видов, и сравнить результаты с данными других авторов по мтДНК и аллозимному анализу. В связи с этим в литературном обзоре мы рассмотрим данные по использованию других молекулярногенетических маркеров в исследовании ящериц и других организмов.