Гетерогенность тромбоцитов человека и животных. Связь морфологических особенностей с функциональным состоянием

• Автор: Бурячковская, Людмила Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 217 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУ РЫ

1. Гетерогенность циркулирующих тромбоцитов

2. Теории тромбоцитопоэза

2.1. История исследования происхождения тромбоцитов

2.2. Образование тромбоцитов

2.2.1. Продукция тромбоцитов путем фрагментации

цитоплазмы

2.2.2. Способность к образованию пузырьков или почкование

2.2.3. Инвагинация мембраны с дальнейшим отделением тромбоцитов в виде бус
2.2.4. Формирование и отшнуровка протромбоцитов
2.3. Циркулирующие мегакариоциты
3. олиплоидность ядра мегакариоцитов и ее значение для тромбоцитопоэза
3.1. Плондность мегакариоцитов и средний объем
тромбоцитов СОТ
4. Молекулярный механизм регуляции
мегакариоцитопоэза
4.1. Т и его рецептор сМр
4.2. Транскрипционный фактор 1.
4.3. Транскрипционный фактор 2
4.4. Регуляция мегакариоцитопоэза цитокинами
4.4.1. Интерлейкин1
4.4.2. Интерлейкин3
4.4.3. Интсрлсйкин6
4.4.4. Интерлейкин7
4.4.5. Интерлейкин9
4.4.6. Интерлейкин
4.4.7. Интерлейкин
4.4.8. ГМКСФ
4.4.9. Оритропоэтин
4.5. Молекулы адгезии
4.6. Катехоламины
5. Апоптоз мегакариоцитов
6. Нарушения мегакариоцитов и связанные с этим
изменения в тромбоцитах.
7. Дисковидные тромбоциты и их активация
8. Протромбоциты или биполярные тромбоциты
9. Большие и ретикулярные тромбоциты
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Подготовка обогащенной тромбоцитами плазмы
1.1. Растворы антикоа1улянтов
1.2. Взятие крови и выделение ОТП
2. Изучение морфологии тромбоцитов
2.1. Химические реактивы
2.2. Подготовка образцов
2.3. Визуализация тромбоцитов
3. Изучение структуры тромбоцитов
4. Функции тромбоцитов
4.1. Агре анионная активность
4.2. Адгезия тромбоцитов
4.3. Реакция эндоэкзоцитоза
4.4. Средний объем тромбоцитов СОТ
5. Выделение и хранение концентратов тромбоцитов
6. Модели животных
6.1. Создание модели гипер и гнпокатехоламинемии у
6.1.1. Вживление катетеров
6.1.2. Модель метаболического стресса
6.1.3. Модель демедулированных крыс
6.1.4. Введение фармакологических препаратов
6.2. Определение концентрации эндогенных катехоламинов
7. Группы здоровых лиц и пациенты
7.1. Здоровые лица
7.2. Пациенты
8. Статистическая обработка результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
1. Особенности морфологии и функций тромбоцитов человека и животных
1.1. Морфофункциональное состояние тромбоцитов человека
1.2. Влияние различных антикоагулянтов на морфо
функциональное состояние тромбоцитов человека
1.3. Влияние способа взятия крови на морфо
функциональное состояние тромбоцитов человека
1.4. Морфофункцнональные особенности тромбоцитов 2 животных разных видов
2. Роль катехоламинов в регуляции тромбоцитариого 4 пула
2.1. Влияние способа взятия крови на содержание ПТ в 4 крови крыс
2.2. Состояние тромбоцитов при гиперкатехоламинемин,
вызванной метаболическим стрессом
2.3. Морфологические свойства ПТ крыс
2.4. Функциональные особенности ПТ крыс
2.4.1. Агрегационная способность
2.4.2. Адгезия
2.4.3. Реакция освобождения зкзоцитоз
2.4.4. Взаимодействие ПТ с лейкоцитами
2.5. Влияние демодуляции крыс на появление ПТ в крови
2.6. Влияние наркоза на морфофункциональные
особенности тромбоцитов у крыс
2.7. Влияние адреноблокаторов на содержание ПТ в
крови крыс
3. Возможность образования ПТ в условиях i vi
3.1. Влияние различных веществ на трансформацию ПТ
человека в условиях i vi
3.2. Роль Са2 в поддержании формы ПТ
3.3. Влияние интерлейкинов на тромбоциты i vi
4. Состояние тромбоцитарного пула в условиях
хранения тромбомассы
5. Гетерогснность тромбоцитов человека с различными
патологиями
5.1. Состояние тромбоцитов больных бронхиальной
астмой после лечения с помощью тромбоцитафереза
5.2. Тромбоциты больных феохромоцитомой
5.3. Морфофункциональное состояние тромбоцитов у
больных с воспалением
6. Атеросклероз
6.1. Влияние дезагрегантной терапии на
функциональную активность и морфологическую
огероснность пула тромбоцитов больных ИБС ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Что касается ПТ и Сг форм, они остаются мало изученными, данные о них носят в основном описательный характер, а сведения о функциональных свойствах и роли в различных процессах единичны и носят противоречивый характер. Цель и задачи исследования. Основной целью данного исследования было выяснение взаимосвязи между морфологической гетерогенностью тромбоцитов, их функциональными свойствами и участием различных субпопуляций в гемостазе и тромбозе. Иными словами, основным направлением работы был поиск ответа на вопрос существует ли взаимосвязь между морфологией тромбоцитов, приобретенной ими в ходе мегакариоцитопоэза, и функционатьной активностью пластинок, а также, какие факторы внешней среды могли бы оказаться решающими в появлении различных субпопуляций Научная новизна. Практически все основные результаты работы получены впервые. Для исследования особенностей морфологии и функций тромбоцитов была использована модель метаболического стресса у крыс. Это позволило выявить условия повышения количества протромбоцитов в крови и провести исследование редко встречающихся в норме форм тромбоцитов. Разработанный нами метод смыва неактивных тромбоцитов с адгезивных поверхностен дал возможность выделить высокогомогенную фракцию протромбоцитов, что помогло получить доказательства их функциональной инертности. Впервые получены экспериментальные данные о форме и структуре протромбоцигов. Количественное определение таких клеток у больных повышает возможности более адекватной оценки риска возникновения у них геморрагических осложнений. Впервые обнаружено, что длительно поддерживающееся высокое содержание катехоламинов в крови приводит к продукции протромбоцитов. Наиболее значительное количество функционально инертных протромбоцитов обнаружено у больных феохромоцитомой и пациентов с инфекционными заболеваниями на стадии гипокоагуляции. Показано, что циркулирующие мегакариоциты из донорской крови, способны к тромбоцитопоэзу в условиях хранения тромбомассы i vi. Появление молодых тромбоцитов влияет на сохранение функциональной активности хранящейся тромбомассы и способствует продлению срока пригодности ее для переливания. Экспериментально подтверждено, что протромбоцнты секвестируются в селезенку и возвращаются в кровоток под действием катехоламинов. Установлено, что присутствие в крови больших сферических тромбоцитов повышает агрегационную способность всего пула. Существует тесная взаимосвязь между количеством этих клеток в пуле и спонтанной агрегацией. Выявлено отсутствие типичной для тромбоцитов грануляции и сильно развитая сеть канальцев, заполненных аморфным материалом. Метод оказался нетрудоемким и высокоэффективным, отличается более высокой точностью и воспроизводимостью по сравнению с использованием гематологических анализаторов. Большие ретикулярные тромбоциты отсутствуют в крови здоровых добровольцев. У всех больных с верифицированным атеросклерозом, независимо от места его локализации, в крови выявлены большие тромбоциты. Риск тромботических осложнений тесно связан с увеличением количества больших тромбоцитов, обладающих повышенной активностью. Отмечено, что при развитии ДВСсиндрома присутствие в крови до больших сферических форм соответствует фазе тромбозов, а увеличение количества биполярных протромбоцитов до фазе геморрагий. Научнопрактическая значимость работы. За период выполнения исследования разработаны методы выделения и количественной оценки протромбоцитов и больших ретикулярных тромбоцитов. Получены данные о количесгве протромбоцитов в норме у человека и животных и о его повышении при различных сердечнососудистых патологиях. Показано, что количество биполярных протромбоцитов резко возрастает в условиях гиперкатехоламинемии. Обнаружено, что при феохромоцитоме на их долю приходится от до от общего числа тромбоцитов, и это может служить диагностическим критерием. Нами получено авторское свидетельство Метод диагностики феохромоцнтомы. Этот метод используется в клинической практике. Отмечено, что увеличение количества нрогромбоцитов в крови соответствует фазе геморрагии.