Топология компонентов конденсинового комплекса в оогенезе шпорцевой лягушки Xenopus Laevis и морского ежа Paracentrotus Lividus

• Автор: Картавенко, Татьяна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 113 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Структурная организация БМСбелков.

Функции БМСбелков

БМС2БМС4 конденсация митотических хромосом.

БМС1БМСЗ когезия сестринских хромат ид.

БМСбелки репарация и рекомбинация ДНК.

БМСбелки регуляция генной экспрессии

Компенсация дозы гена.

Ядрышко
Структурнофункциональная организация ядрышка.
Белки ядрышка.
Кольчатые тельца.
Структура и динамика ядрышек ооцитов морского ежа
РагасегЦгоШБ УбиБ в оогенезе.
Особенности организации ооцитов шпорцевой лягушки
Хепорив аеуБ.
Хромосомы типа ламповых щеток.
БМСбелки в мейозе.
Задачи работы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1. Объекты исследования
2. Выделение хромосом типа ламповых щеток
из ооцитов X. vi.
3. Воздействие актиномицина Д.
4. Иммуноцитохимическая окраска препаратов хромосом типа ламповых щеток X. vi.
5. Получение фракции изолированных ооцитов морского ежа.
6. Получение фракций 24 бластомеров и поздней гаструлы .ivi.
7. Диссоциация клеток гаструлы . ivi.
8. Получение хромосомных препаратов из бластомеров.
9. Гибридизация i i.
. Электрофорез белков и иммуноблотинг. Ъ
. Илшуноцитохимический анализ локапизации конденсинов в клетках морского ежа.
. Иммуноэлектронная микроскопия ооцитов и клеток гаструлы морского ежа с применением метода серебряного
усиления сигнала от наночастиц золота.
. Выявления ядрышкового организатора
по методу окрашивания .
. Развитие морского ежа .ivi в присутствие
глутарового альдегида.

. Выделение тотальной РНК и полимеразная цепная реакция
с обратной транскрипцией.
РЕЗУЛЬТАТЫ.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В частности, они могут играть роль в регуляции транскрипции, контролируя структурное состояние хроматина комплекс, содержащий белки, специфически связывается с Xхромосомами нематоды . . Кроме этого, представители конденсинового комплекса обнаружены в составе ядрышек интерфазных клеток . Тимирбулатова и др. . В настоящее время существуют две основные гипотезы, объясняющие присутствие конденсинового комплекса в ядрышках интерфазных клеток. По одной из гипотез кондсисины участвуют в структурных модификациях хроматина, связанных с активацией генов, кодирующих рибосомпую РНК рРНК . .vii конденсины ассоциированы с рибосомальной ДНК рДНК . Альтернативная гипотеза предполагает, что белок конденсинового комплекса, ХСАРЕ, рекрутируется в виде комплекса на частицах, содержащих малые ядерные РНК мя РНК в гранулярном компоненте ядрышка, для участия в одном из этапов процессинга рРНК Тимирбулатова и др. v . К сожалению, нет однозначного ответа на вопрос с какими биологическими молекулами ДНК, РНК или белки связан конденсиновый комплекс или отдельные субъединицы конденсинового комплекса в ядрышке интерфазных клеток. Подводя итог краткому изложению данных о роли конденсинов, можно заключить, что на сегодняшний день их функции, как в процессе конденсации митотических и мейотических хромосом, так и в интерфазных ядрах, остаются не выясненными. В связи с вышесказанным, основной целью настоящей работы явилось исследование структурнофункциональной роли конденсинового комплекса в ядрышках и в мейотических хромосомах. Обзор литературы. Роль ДНК и составе как интерфазных хромосом, так и митотических хромосом заключается в хранении и реализации генетической информации. Однако для выполнения этих функций в составе интерфазных ядер необходимо иметь четкую структурную основу, которая позволяла бы расположить огромные по длине молекулы ДНК в строгом порядке, чтобы с определенной временной последовательностью протекали процессы, как синтеза РНК, так и редупликация ДНК. В среднем па интерфазиое ядро млекопитающих приходится около 2м ДНК. Это значит, что такая огромная масса ДНК должна быть уложена с коэффициентом упаковки 1x3 1х4. До сих пор остается невыясненным каким образом такая гигантская по длине молекула ДНК укладывается в хромосому. В течение последних лет описаны и частично охарактеризованы различные структурные белки, которым приписывается решающая роль в специфической компактизации хроматина в составе митотических хромосом. К таким белкам относятся белки i оГ iv . i ii, . Было установлено, что хромосомная конденсация и когезия сестринских хроматид регулируется структурно сходными белковыми комплексами, в состав которых входят белки. Эти белковые комплексы были названы кондененнами и когезинами, соответственно i . . . . Структурная организация белков. Молекулярная масса белков колеблется в пределах от 0 до 0 кДа iv . Первичная структура белков представлена пятью разными доменами. Два нуклсотидсвязывающие мотива, А и В, локализуются в высококонсервативных глобулярных и Скоицевых доменах и обладают АТФсвязывающей и гидролизирующей способностями, соответственно i . iv , . Центральный спиральный домен разделен на два субдомена коротким шарнирным участком, присутствие которого позволяет молекуле белка изгибаться . Такая структурная организация белков способствует образованию гомо и гетсродимеров iv, . Vобразную форму . . Схема Ле. Общая схема строения белков. Предполагают две модели димеризации БМСбелков. Согласно первой модели, образование димера осуществляется за счет соПебсой взаимодействий между двумя разными субъединицами схема 2, В Мс1Ьу а А Нйапо е1 а И в том. 1 и Сконцевые домены располагаются антипараллельно.