Морфофункциональные особенности эмбрионов мыши на двуклеточной стадии развития, анализ двуклеточного блока in vitro

• Автор: Боголюбова, Наталья Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 126 с. : ил.

Имеющиеся сведения получены при исследовании всего доимплантационного периода эмбриогенеза мыши и весьма фрагментарны. Исключение составляет лишь подробно описанное поведение микротрубочек, связанное с осуществлением митотическою цикла . Функциональная роль митохондрий на начальных этапах эмбрионального развития остается малоизученной. Вместе с тем, показано, что эти органоиды предсгавляют важный информативный маркер при наблюдениях за структурной реорганизацией цитоплазмы , . Это определяется тем, что вопервых, существует возможность прижизненного изучения локализации и функциональною сосгояния митохондрий с использованием специфичных витальных люминесцентных красителей, в частности родамина 3. Вовторых, анализ поведения митохондрий на широком круге объектов , , . V . Имеющиеся в настоящее время данные свидетельствуют о наличии специфического перераспределения митохондрий в ходе оогенеза и на одночетырехклеточной стадиях эмбрионального развития i . Сведения такого рода представляют несомненный интерес, поскольку становится все более очевидным, что существует определенная связь между способностью зародышей осуществлять организованное и специфическое изменение внутриклеточной локализации митохондрий и способностью успешно проходить первые деления дробления i, , vi . Однако, подобные наблюдения входят в противоречие с данными о низкой метаболической активности и отсутствии дефинитивной структуры митохондрий вплоть до восьми клеточной стадии развития i, , i, . Полагают, что на начальных этапах развития все энергетические потребности эмбриона покрываются за счет расходования запаса АТФ, накопленного в процессе оогенеза i, i, . Возможно вследствие этого общепринято, что митохондрии не шрают или играют лишь незначительную роль в формировании структурной организации зародыша на ранних этапах эмбрионального периода. Исходя из вышеизложенного, основная цель работы состояла в прижизенном изучении структурнофункциональной организации эмбрионов мышей различных генотипов на двуклеточной стадии развития, соответствующей периоду активации эмбрионального генома. Провести анализ влияния эксплантации эмбрионов разных генотипов, находящихся на различных этапах активации эмбрионального генома, на потенции к их дальнейшему развитию i vi. Исследовать динамику локализации митохондрий на протяжении двуклегочной стадии развития у эмбрионов мышей разных генотипов, обладающих неодинаковыми потенциями к развитию i vi. Изучить перераспределение митохондрий в бластомерах зародышей, разное время находящихся в состоянии двуклегочного блока i vi. Сопоставить динамику внутриклеточной локализации митохондрий, наблюдаемую у эмбрионов в состоянии генетически предопределенного двуклеточного блока i vi и в ходе остановки их развития на стадиях и 2 второго клеточного цикла, вызванной дейстивием ингибиторов клеточной пролиферации. Исследовать взаимосвязь между процессом интеграции цитоплазмы и ядер при соматической гибридизации бластомеров двуклеточных эмбрионов разных генотипов и способностью таких реконструированных зародышей к дальнейшему развитию i vi. Морфофункцнональная характеристика двуклеточной стадии развития в эмбриогенезе мыши. Молекулярнобиологическая характеристика. Доимшгантационный период в эмбриогенезе мыши составляет в среднем 4,5 суток и включает в себя события от оплодотворения до имплантации бластоцисты в матку рис. Характерной особенностью этого этапа эмбриогенеза млекопитающих, являегся невысокий темп дробления бластомеров зародышей Дыбан и др. Однако, даже на этом фоне первый и второй клеточные циклы выделяются своей продолжительностью. При развитии мыши каждый из них занимает около ч Пратт, . Важной особенностью клеточных циклов начальных этапов дробления являегся присутствие в них всех четырех фаз , , 2, М . Во втором клеточном цикле у мыши фаза длится всего час, но в этот период времени уже отмечаегся транскрипция ряда генов, в том числе генов белков из семейства белков теплового шока, выполняющих функции поддержания жизнедеятельности эмбриона .