Изменения ДНК-связывающей активности транскрипционных факторов при реорганизациях актинового цитоскелета клеток А431

• Автор: Емельянов, Артем Николаевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 194 с. : ил.

Фибронектин крупный мультидоменный гликопротеин с молекулярной массой примерно 0 кДа, секретируемый клетками соединительной ткани и состоящий из двух белковых цепей субъединиц, одинаковых по общему плану строения, которые связаны друг с другом двумя дисульфидными мостиками у Сконцов этих цепей , . Каждая субъединица формируется, в основном, тремя типами аминокислотных повторов и разделена на глобулярные домены, связанные между собой участками гибкой полипептидной цепи. Ыконцевой домен может связываться с фибрином, гепарином, а также с самим ФН. Этот домен играет основную роль в формировании полимерной ФНсети. В других доменах существуют специфические сайты узнавания и связывания фибрина, гепарина, коллагена и др. ЗесЫег с а. Существуют три формы ФН 1. ФН олигомерная форма олигомеры могут быть временно прикреплены к поверхности клеток 3. ФН труднорастворимая фибриллярная форма , , . Образование полимерной сети ФН происходит только на клеточной поверхности. Это обстоятельство принципиально отличает его от ламинина и других белков ВКМ , , . Клетки соединительной ткани разных органов синтезируют различные изоформы ФН. Вс разнообразие изоформ ФН складывается в результате альтернативного сплайсинга РНК единственного гена, содержащего около ти экзонов . Как уже было сказано, ФН взаимодействует с клеткой через интегрииовые рецепторы. Семейство интегринов содержит или более членов, которые участвуют во взаимодействиях клеткаматрикс и клеткаклетка. По меньшей мере, 5 из них могут связываться с ФН и 8 с ламинином, причем некоторые имеют сродство только к ФН или только к ламинину, а некоторые и к ФН и к ламинину одновременно. Кроме ФН и ламинина различные типы интегринов могут связывать также коллаген, эпилигрин, энтакрин, инвазии, витронектин, тенасцин и др. Интегрины это трансмембранные гетеродимерные гликопротеины, состоящие из а и р субъединиц. Для человека известно 9 типов Р субъединиц и типа а субъединиц. Комбинации разных типов субъединиц составляют разнообразие интегринов , . Интегрииовые рецепторы отличаются от других поверхностных клеточных рецепторов тем, что связывают свои лиганды с относительно низким сродством Ка
лмоль и тем, что их концентрация на поверхности клеток в 0 раз больше, чем других рецепторов. Поэтому они могут функционировать кооперативно. В результате клетка отвечает на организованную группу лигандов в матриксе, а не на отдельные молекулы . Кластеры интегриновых рецепторов составляют основу фокальных контактов. Как уже было сказано, кластеры интегриновых рецепторов составляют основу фокальных контактов ФК, через которые осуществляется фокальная адгезия, т. В КМ через ФК. ФК это плоские структуры размером до нескольких микрон в диаметре и часто локализованные на периферии клетки , i, . ФК имеют разную форму в зависимости от степени взаимодействия с ВКМ и осуществляют крепкую фиксацию клеток к субстрату, соединяя филаменты актина с элементами ВКМ и могут, в определнные периоды времени после нанесения клеток на субстрат, состоять, по некоторым данным, более чем из ти различных молекул, присутствующих там постоянно или временно i, i, . На схеме 1 приведены основные участники фокальной адгезии и их пространственные отношения. Показано значение ФК для клеточной миграции, морфогенеза, сигналинга, пролиферации, дифференцировки и др. Сейчас различают несколько вариантов ФК ранние ФК фокальные комплексы, зрелые ФК и поздние ФК фибриллярные комплексы. Каждый из видов ФК характеризуется наличием определнных маркерных белков и другими свойствами. Так, ранние ФК характеризуются наличием паксилипа и винкулииа, расположены на периферии клетки в ламеллоподиях, имеют размер не более 1 мкм. Их образование стимулируются малой ГТФазой . Такие ФК образуются на начальном этапе процесса адгезии клетки к субстрату. Контакт интегриновых рецепторов с субстратом приводит к их кластеризации, рекрутированию к мембране и автофосфорилированию по тирозину киназы фокальной адгезии . К фосфорилированному тирозину присоединяется своим 2 доменом киназа . В дальнейшем эти два фермента фосфорилируют множество других белков, запуская различные сигнальные каскады . V .