Морфологические изменения межпозвонковых дисков крыс в условиях асимметричной статичной компрессии

• Автор: Волков, Алексей Вадимович
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 74 с. : 59 ил.

1.1. Актуальность темы.

1.2. Цель и задачи исследования

1.5. Положения, выносимые на защиту

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Экспериментальные модели дегенеративных заболеваний позвоночника.

2.1 .Ногохордальные клетки.

2.2. Внеклеточный матрикс.

2.3. Экспериментальные модели.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Экспериментальная модель.

3.1.1. Методика повреждения.

3.2. Группы исследования
3.3. Рентгенологические методы исследования.
3.4. Гистологические методы исследования
3.5. Иммуногистохимическое исследование.
Морфометрия.
3.6.1. Измерение высоты межпозвонкового диска.
3.6.2 Измерение площади среза.
3.6.3 Угол между замыкательными пластинками.
3.6.4. Определение ядросодержащих клеток на срезе пульпозного ядра
центральной части диска.
мм. Подсчет осуществлялся ручным способом с использованием
гематологического счетчика Рис. 3.9.
3.8. Статистические методы исследования.
ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ.
4.1. Контрольная группа, интактные животные Ы.
4.1.1. Рентгенологическое исследование
4.1.2 Гистологическое исследование
4.1.3. Иммуногистохимическое исследование.
4.2. Группа М1. 1 месяц воздействия
4.2.1. Гистологическое исследование.
4.2.2. Иммуногистохимическое исследование.
4.3. Группа М2. 2 месяца воздействия.
4.3.1. Гистологическое исследование.
4.3.2 Иммуногистохимическое исследование
4.4. Группа М3. 3 месяца воздействия.
4.4.1. Рентгенологическое исследование
4.4.2. Гистологическое исследование.
4.4.2 Иммуногистохимическое исследование
4.5. Группа К1. Резекция хвоста, срок 2 месяца
4.5.1. Гистологическое исследование
4.5.2 Иммуногистохимическое исследование.
4.5. Статистический анализ данных
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
СИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
ВВЕДЕНИЕ


Одним из них у человека является факт прямохождения бипедализм и связанное с этим повышенное давление на межпозвонковый диск, особенно в поясничном отделе, на который приходится основная нагрузка. Исчезновение или снижение количества нотохордальных клеток у человека происходит относительно рано по сравнению с большинством млекопитающих , . Также немаловажную роль играют травматические факторы, профессиональные вредности, профессиональные занятия спортом и др. Это наблюдение согласуется с находками, обнаруженными при аутопсии тканей межпозвонковых дисков людей различных возрастных групп, погибших по не зависящим от заболеваний позвоночника причинам. Выявлено, что до летнего возраста в пульпозном ядре нотохордальные клетки расположены кластерами и активно синтезируют внеклеточный матрикс. II типа, гликозаминогликаны, иротеогликаны. К годам, а у детей с нарушениями осанки к годам, количество нотохордальных клеток значительно снижается, появляются первые макрофаги СО клетки . К годам в пульпозном ядре присутствуют в основном макрофаги и фибробласты, в него прорастают кровеносные сосуды и нервы, тогда как нотохордальные клетки практически отсутствуют. Вследствие этих изменений ремоделирование внеклеточного матрикса прекращается, и возникают признаки дегенерации ткани. Одним из маркеров начинающихся изменения в диске может служить повышенная экспрессия металлопрогеиназ и в большей степени аггреканазы АПАМТ4 . Впоследствии пульпозное ядро перестает выполнять функции шарнира и амортизатора, уменьшается в размере, секвестрируется. В нем обнаруживаются в равной степени признаки как некротических, так и апоптотических проявлений гибели клеток. Асимметричное давление, особенно в областях физиологических изгибов позвоночника, приводит к повреждению фиброзного кольца, потере его эластичности, гидрофил ьности и, как следствие, к образованию расслоений волокон и разрыву. В последствии через этот дефект пролабирует секвестрированное пульпозное ядро, что клинически выражается в межпозвонковых грыжах , , , , . В свою очередь, в замыкательных пластинках, выше и нижележащих к диску позвонков, отмечаются явления склероза и пролиферации косной ткани остеофиты. При проведении магниторезонансной томографии в режиме Т2 данные морфологические изменения выражаются в симптоме черного диска. Интересным фактом является обнаружение экспрессии нотохордальными клетками одновременно эпителиальных цитокератин 8 и мезенхимальных маркеров аггрекан, коллаген II типа. Таким образом, пульпозное ядро по своему иммуногистохимической характеристике находится между эпителиальными и мезенхимальными тканями. Изменения в клеточном составе тканей межпозвонковых дисков приводят к изменению химического состава. Основными маркерами дегенеративных заболеваний хрящевой ткани разрушение протеогликанов аггрекаиа, денатурация коллагена II типа, появление коллагена I типа в пульпозном ядре, развитие склеротических изменений. Это приводит появлению несвязанных гликозаминогликанов и перераспределение связанной и свободной воды между анатомическими образованиями межпозвонкового диска пулыюзное ядро фиброзное кольцо, что приводит к дегидратации тканей с потерей их основной функции . Строение аггрекаиа, осуществляющего гидратацию пульпозного ядра, претерпевает ряд возрастных изменений. В течение внутриутробного периода и до школьного возраста происходят его синтез и накопление. В старшем школьном возрасте и пубертатном периоде появляются первые признаки разрушения аггрекаиа, выражающиеся в отщеплении протеогликанов от гиалуроновой кислоты с последующим разрушением молекул протеогликана под воздействием аггреканаз, которые вызывают фрагментацию осевой белковой молекулы. Кроме того, в этот период также происходит денатурация коллагена II типа. В совокупности все эти процессы приводят к потере способности внеклеточного матрикса связывать воду , , . Данные литературы об экспериментальных моделях дегенеративных заболеваний межпозвонковых дисков на лабораторных животных можно разделить на четыре основных группы табл.