Использование метода полимеразной цепной реакции для генетического маркирования ремонтантной малины

• Автор: Соболев, Владимир Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Род , подрод I.

1.1.2. Биологические особенности малины.

1.1.3. Генетические аспекты ремонтантносте

1.2. Современные методы исследования генома растений.

1.2.1. Морфофенотипические и биохимические методы

1.2.2. Молекулярно генетические методы исследования генома растений

1.2.2.1. Подход основанный на полиморфизме длин рестрикционных фрагментов.

1.2.2.2. Использование метода ЩР для молекулярно генетического исследования генома растений.
1.2.2.3. аиализ.
1.3. Микросателлиты и их типы
1.3.1. Методы исследования генома с помощью микросателлитных последовательностей
1.4. Использование молекулярных маркеров в изучении генома и селекции малины.
1.4.1. Биохимические маркеры.
1.4.2. Изоферментные маркеры.
1.4.3. маркеры
1.4.4. маркеры
1.4.5. маркеры
1.4.6. ДНК секвенированис
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.1. Объекты исследований
2.2. Методы исследования
2.2.1. Выделение геномной ДНК.
2.2.2. ЕКЗКРСЯ.
2.2.3. ЯДРОРСЯ.
2.2.4. МРСЯ
2.2.5. Создание филогенетического дерева на основе КЭЯмаркеров
2.2.6. Приготовление компетентных клеток
2.2.7. Лигирование
2.2.8. Трансформация
2.2.9. Выделение ДНК из агарозных гелей.
2.3. Материалы и оборудование.
2.3.1. Оборудование.
2.3.2. Реактивы, среды и ферменты.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Выделение ДНК малины.
3.2. Выбор метода для молекулярногенетического анализа малины
3.3. Полиморфизм межмикросателлитных последовательностей ДНК на межвидовом уровне.
3.4. Использоание КЭЯмаркеров для изучения филогенетических связей сортов и видов ремонтантной малины
3.5. Использование 1маркеров для молекулярногенетической идентификация и паспортизация сортов малины.
3.6. Молекулярное маркирование признака ремонтантности у малины с
использованием КБЯРСК
БЛАГОДАРНОСТИ.
ЛИТЕРАТУРА


Сообщалось о 00 видах, отнесенных к этому роду, главным образом из холодной и умеренной зон северного полушария однако некоторые были найдены в тропических горных районах южного полушария и за Полярным кругом, а также на многих океанических островах . Систематика рода была сильно затруднена вследствие скудости и неполноты гербарных образцов, собранных во многих районах земного шара, но, тем не менее, I. Бейли сохранил огромное количество образцов. Многие природные и выведенные формы были сочтены гибридами исходя из предположений об их происхождении i, . Плоидность у при основном числе хромосом х7 колеблется от диплоидов 2п до додекаплоидов 2п. Большинство форм малины диплоиды 2п, за исключением немногих триплоидов, а также естественных и индуцированных тетраллоидов, тогда как ежевики имеют большой и непрерывный ряд плоидности и включают многочисленные межвидовые гибриды , ,. Морфология хромосом у видов и вторичная конъюгация в мейозе полиплоидных форм, указывают, что набор хромосом состоит из семи основных хромосом х 7 длиной от 1,5 до 7,0 мк. . vii показал их высокую дифференциацию положение центромер легко определяется по хроматическим участкам с каждой стороны, и каждая хромосома заканчивается хорошо обрисованными телохромомерами. Сравнение хромосом не было возможно по их абсолютной длине, но было надежным исходя из соотношения плеч и хроматического рисунка. У диплоидных . . ii . i, i, . Розанова определила три автотетраплоидные расы . Малина это кустарник с жесткими, прямостоячими дуговидными или стелющимися побегами. Большинство форм образует двухлетние побеги, но некоторые виды этого же рода побеги только многолетние. Большинство видов теряет листья осенью, но имеются также немногие вечнозеленые виды. Размножение может быть и апомиктичным и половым. В настоящее время все сорта малины разделяют в основном на две группы это сорта с летним типом плодоношения и с ремонтантным типом плодоношения. Сорта с летним типом плодоношения в первый год жизни образуют побеги замещения и корневые отпрыски, которые растут в длину и толщину. Их высота может достигать 1,53 метров, в зависимости от сортовых особенностей и условий выращивания. Интенсивный рост побегов происходит обычно в первой половине вегетации, когда их удлинение происходит не только в результате деятельности верхушечной меристемы, но и в значительной степени интеркалярно. Плодоношение начинается на втором году вегетации, после чего побеги отмирают Е. И. Ярославцев, Казаков И. В.,. Ремонтантные сорта формируют урожай на однолетних побегах и, следовательно, начинают плодоносить в первый год жизни. Возделывание ремонтантной малины по типу однолетней культуры значительно упрощает борьбу с болезнями и вредителями и, как правило, исключает применение химических средств защиты, что в свою очередь приводит к получению экологически чистой продукции. Это достигается, прежде всего, ежегодным удалением отплодоносивших стеблей, что резко снижает уровень грибной инфекции и количество зимующих на побегах вредителей, так, например, практически снимается проблема вредоносности малинного и паутинного клещей, а также таких грибковых болезней, как дидимелла и антракноз Казаков и др. Казаков, . Однолетний цикл формирования урожая в позднелетние сроки нарушает синхронизацию прохождения взаимосвязанных фенофаз развития растения и отдельных паразитов. Благодаря этому, например, ягоды малины осеннего урожая не повреждаются личинками малипного жука, которые уходят в почву еще до цветения однолетних побегов малины Кичина В. В.,. Казаков И. В., Казаков, . Ягоды ремонтантных сортов малины значительно меньше подвержены загниванию, по сравнению с обычными сортами, так как их формирование происходит при контрастных дневных и ночных температурах суточные колебания достигают С, что сдерживает развитие серой гнили и, в то же время, стимулирует образование более плотной мякоти и толстой кожицы ягод Казаков И. В., Кичина В. В., . К сожалению, пока, нет ясных представлений о структуре генетического контроля признака осеннего плодоношения у малины. Существует целый ряд гипотез и предположений на этот счет.