Естественная и индуцированная изменчивость продуцента неполиенового противогрибкового антибиотика имбрицина

• Автор: Горбунова, Наталья Александровна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 150 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Естественная изменчивость продуцентов

биологически активных веществ

1.2. Индуцированная изменчивость продуцентов

биологически активных веществ.

1.2.1. Ультрафиолетовое облучение.

1.2.2. Мутагенное действие Мнитрозосодержащих

соединений.

1.2.3. Действие собственного антибиотика на культуру продуцента

1.2.4. Действие аминогликозидного антибиотика стрептомицина на культуры микроорганизмов продуцентов БАВ.
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Моноспоровый рассев популяции влэрЮтусев тЬпсаШэ
шт. на различные агаризованные среды
2.3. Определение активности вариантов Б. лЬ7саи шт. , отобранных при рассеве на различные
агаризованные среды.
2.4. Обработка культуры Я ипЬпсаэ шт. УФлучами
2.5. Обработка культуры в. 1тЬпсаи шт. ИнитрозоМметилбиуретом
2.6. Обработка культуры Э. 1тЬпсаЮ шт.
1,4бисдиазоацетилбутаном.
2.7. Обработка культуры в. 1тЬпса1и шт.
имбрицином и стрептомицином
2.8. Обработка культуры в. тЬпсаШ шт. МнитрозоМметилмочевиной.
2.9. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств мутантных вариантов Э. тЬпсаШ шт.
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение естественной изменчивости продуцента
имбрицина Э. тЬисаэ шт.
3.2. Действие УФлучей на изменчивость шт. по морфологокультуральным признакам и
активности образования имбрицина.
3.3. Отработка экспрессметода определения активности продуцента имбрицина по признаку антибиотикообразования методом агаровых блоков
3.4. Действие НМБ и ДАБ на изменчивость продуцента
имбрицина Э. тЬпсаШ шт.
3.5. Действие имбрицина на изменчивость Э. шЬлсаШз шт. по морфологокультуральным и
биохимическим признакам.
3.6. Сравнительная характеристика мутантов в. тЬгсаиа шт. , устойчивых к собственному антибиотику имбрицину и к стрептомицину.
3.7. Действие ЫнитрозоМметилмочевины на изменчивость
в. тЬгсаиа шт. по морфологокультуральным признакам и активности образования имбрицина
3.8. Действие имбрицина на морфологически измененный вариант продуцента Э. тЬгсаиа
3.9. Схема ступенчатого отбора продуцента имбрицина
в. тЬгсаи штамм .
3 Описание морфологических, культуральных и биохимических свойств мутантных вариантов в. тЬгсаив штамм , полученных в результате ступенчатого
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА


Ьудгоэсорюив штамм характеризовался значительной вариабельностью морфологокультуральных и антибиотических свойств. При рассеве в популяции штамма авторы наблюдали четыре типа колоний, различающихся по антибиотикообразованию. Колонии с плохо развитым воздушным мицелием III тип обладали низкой продуктивностью. Антибиотическая активность колоний с обильно развитым воздушным мицелием I, II и IV типы превышала суммарную активность популяции актиномицета. Отбор на фоне естественной изменчивости культуры 8. Ьудговсорюиз не дал положительных результатов, так как все выделенные варианты теряли повышенную активность уже в третьей генерации. Исследование популяционного состава актиномицетовпродуцентов противогрибных полиеновых антибиотиков по морфологии колоний показало, что популяции продуцентов амфотерицина В штаммы и 8, леворина 1 и , микогептина В1 и 5, и нистатина 3, , и 5 наряду с колониями основного типа были представлены колониями белого или блеклого, олигоспорового, аспорогенного и карликового типов. В популяциях низкоактивных штаммов продуцентов амфотерицина В штамм и микогептина штамм 1 содержались также колонии бугристого типа, выпуклые, имеющие неправильную форму и неравномерную окраску воздушного и субстратного мицелия. Кузнецовым в году, что популяции разных видов актиномицетов представлены сходными группами морфологических мутантов, повторяющихся в пределах каждого вида и находящихся в определенном количественном соотношении. Кузнецов показал, что спонтанная изменчивость актиномицетов прокариот подчиняется закону гомологических рядов, открытому Н И. Вавиловым в году при изучении высших растений эукариот. Изучение популяционного состава у продуцентов противогрибковых антибиотиков выявило у отдельных типов морфологических мутантов корреляционную зависимость между их морфологокультуральными и антибиотическими свойствами, что значительно повысило эффективность поддерживающего отбора промышленных культур и их селекцию с использованием мутагенных факторов. Подобные зависимости отмечены исследователями не только для продуцентов антибиотиков, но и для продуцентов ферментов. Так, при изучении спонтанной изменчивости продуцента литических ферментов . Чапека, была представлена в основном двумя близкими морфологическими типами колоний, которые находились в определенных количественных соотношениях. В популяции имелись также различного рода атипичные колонии, отнесенные авторами к 3му типу. Анализ литературы свидетельствует, что изучение естественной изменчивости микроорганизмов позволяет выявить в популяции наиболее перспективный тип колоний и отобрать активный вариант клон для дальнейшей селекции. ИНДУЦИРОВАННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ПРОДУЦЕНТОВ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ. Решающим приемом, обеспечивающим успех селекции многих продуцентов антибиотиков, является получение мутаций под влиянием сильнодействующих факторов, в том числе физических рентгеновское излучение, ультрафиолетовое облучение, быстрые нейтроны и химических азотистая кислота, перекиси, красители, аналоги азотистых оснований, этиленимин и его производные, алкилсульфаты, нитрозоалкилмочевины, нитрозогуанидин, антибиотики и др. Применение мутагенных факторов физической и химической природы в генетикоселекционной работе значительно увеличивает возможность отбора новых полезных мутаций живых организмов. Под влиянием мутагенов у микроорганизмов возникают в основном те же мутации, что и при естественной изменчивости, однако, частота их значительно возрастает. Изменения могут касаться любых признаков микроорганизмов морфологокультуральных и физиологических. Под влиянием мутагенов возникают и такие мутации, которые не появляются спонтанно. К числу последних относятся мутации, приводящие к нарушению синтеза пигментов, антибиотиков, аминокислот. Частота и разнообразие индуцированных мутантов зависят от специфики применяемого мутагена, используемых доз. Довольно часто в селекционной работе применяют последовательное воздействие на организм различных факторов. Основные закономерности индуцированной изменчивости были обобщены еще в году С. И. Алиханяном.