Разработка набора реагентов для определения уровня антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе

• Автор: Кочиш, Татьяна Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Шелково
• Количество страниц: 156 с.

Разработать компоненты набора для определения уровня антител к РСвирусу крупного рогатого скота в иммуноферментноь анализе на основе аффинноочищеных антигенов РСвируса. Провести сравнительную оценку чувствительности и специфичности , РНГА, РСК и разработанного иммунофермеитного Набора при определении уровня аитиРСВ антител в крови больного, переболевшего и вакцинированного крупного рогатого скота. Научная новизна. В результате проведенной работы разработан одноэтапный метод получения очищенных и концензрированных антигенов РСвируса, репродуцированного в культуре клеток, с помощью препаративной аффинной хроматографии на антиРСВ I Сефарозе. При изучении в электрофорезе белков РСвируса, штамм , которые отщепляются при обработке Тритоном Х0, выявлено 9 структурных гликопротеинов с молекулярной массой от до 0 кД. РСВ антител в организме восприимчивых животных. РСвируса, штамм . Практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований позволили разработать временную инструкцию по изготовлению набора реагентов для определения уровня антител к респираторносинцитиальному вирусу крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе и проект нормативной документации. Набор предназначается для индикации и количественного определения антиРСВ антител в сыворотках крови КРС. Внедрение в практику ветеринарии иммуноферментного набора для определения уровня антител к респираторносинцитиаль эму вирусу позволит решить проблему массового эпизоотологического обследования поголовья КРС, составляющего основу мероприятий по ликвидации и предупреждению распространения данного заболевания. Апробация работы. Материалы исследований доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ВНИТИБП г. Научные основы производства ветеринарных биологических биопрепаратов, Щелково г. По материалам диссертации опубликовано 3 работы. Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 3 страницах машинописного текста и состоят из следующих разделов введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, выводы и практические предложения, список литературы, содержащий отечественных и 1 зарубежный источник, и приложение. В приложении представлены документы, подтверждающие результаты отдельных этапов работы, их научную и практическую ценность. Диссертация иллюстрирована таблицами, рисунками и 1 схемой. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Впервые в г. Ченнок описал СА i вирус, выделенный от детей с острым ларинготрахеитом, а затем в г. Ченнок с соавторами выделили от детей с респираторными заболеваниями новые вирусы в культуре ткани почки обезьяны методом гемадсорбции. Сходный вирус М был выделен в г. Джонсоном и сотрудниками от детей и взрослых лиц. Парамиксовирусы были идентифицированы только у позвоночных животных. Парамиксовирусы относятся к вирусам, содержащим односпиральную несегментиро ванную РНК негативной полярности, семейству xvii, входящее в отряд vi. Семейство включает в себя 2 подсемейства xvii и vii в первое подсемейство входят 3 рода ivi, vi, iivi во второе 2 рода vi и vi. Помимо двух идентифицированных вирусов, обозначаемых vi рептилий V и iv vi V грызунов, известно еще несколько вирусов, выделенных от пингвинов, и отличающихся от парамиксовирусов таблица 1. Более того, вирус , родственный подсемейству xvii родственны гены , Н, М, I. V, С, был выделен от растительноядных летучих мышей и лошадей в Австралия. Большинство вирусов имеет узкий спектр естественных хозяев, но они способны к репродукции в разных культурах клеток. Инфекция клеток в культуре обычно логическая, но может быть кратковременная или персистентная. Одной из особенностей является образование телецвключений и синцития. Нуклеокапсиды ассоциируются с протеинами вирусной мембраны на плазматической мембране, после чего при почковании приобретают липидную мембрану. Парамиксовирусные инфекции начинаются с респираторного тракта, но могут распространяться на вторичные очаги, например, лимфоидные и эндотелиальные ткани для V, эндотелиальные ткани для V. Данные инфекции, как правило, ограничены и элиминируются иммунгой системой хозяина. Таблица 1.