Биотехнологическая разработка некролитической мази и ее исследования

• Автор: Верниковский, Владислав Владиславович
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Пятигорск
• Количество страниц: 144 с. : ил.

Введение.
Глава 1. Современное состояние исследований лекарственных форм с иммобилизованными протеолитическими ферментами, предназначенных для биологического очищения ран.

1.1 Протеолитические ферменты краткая характеристика

1.2 Использование протеолитических ферментов в терапии раневого процесса.

1.3 Иммобилизованные протеолитические ферменты, применяемые для местного лечения гнойнонекротических процессов.

1.3.1 Источники получения протеолитических ферментов.

1.3.2 Лекарственные формы иммобилизованных препаратов протеолитических ферментов.

1.3.3 Методы иммобилизации, используемые в раноочищающих средствах с протеолитическими ферментами.
1.3.4 Определение активности иммобилизованных протеолитических ферментов и единицы ее измерения.
1.3.5 Комбинирование протеолитических ферментов с лекарственными веществами других групп.

Заключение по обзору литературы.

Глава 2. Объекты и методы исследований
2.1 Объекты исследования
2.2 Вспомогательные вещества и оборудование.
2.2 Методы исследования.
2.2.1 Изучение технологических и физикохимических свойств мазевых основ
2.2.2 Изучение свойств иммобилизованных ферментов
2.2.3 Химические и физикохимические методы анализа
2.2.4 Исследования антимикробного действия и фармакологической активности.
2.2.5 Обработка результатов исследований
Глава 3. Выбор оптимального носителя для иммобилизации протеолитического фермента и разработка состава раноочищающей мази на его основе.
3.1 Выбор композиции мазевой основы
3.1.1 Изучение осмотической активности мазевых основ
3.1.2 Изучение термостабильности мазевых основ
3.1.3 Исследование микробиологической устойчивости мазевых основ при хранении в естественных условиях.
3.1.4 Выбор основ для дальнейшего исследования
3.2 Изучение биотехнологических характеристик иммобилизованных ферментов
3.2.1 Сравнительное исследование активности иммобилизованных ферментов в оптимальных условиях и в условиях, моделирующих условия раны.
3.2.2 Исследование устойчивости полученных иммобилизованных препаратов трипсина в условиях, моделирующих условия раны
3.3 Разработка и биофармацевтические исследования состава раноочищающей мази
3.3.1 Разработка состава раноочищающей мази.
3.3.2 Исследование влияния хлоргексидина биглюконата на активность и устойчивость иммобилизованного трипсина в условиях раны.
3.3.3 Исследование процесса высвобождения хлоргексидина биглюконата из разработанной раноочищающей мази
3.3.4 Структурномеханические исследования разработанной раноочищающей мази.
Выводы по главе
Глава 4. Разработка технологии и норм качества предлагаемой раноочищающей мази с иммобилизованным трипсином.
4.1 Разработка технологии раноочищающей мази с иммобилизованным трипсином
4.2 Разработка норм качества разработанной раноочищающей мази с иммобилизованным трипсином.
4.2.1 Качественный анализ разработанной раноочищающей мази.
4.2.2 Количественный анализ разработанной раноочищающей мази
4.2.3 Нормы качества разработанной раноочищающей мази с иммобилизованным трипсином
4.2.4 Установление сроков годности разработанной раноочищающей мази с иммобилизованным трипсином.
Выводы по главе.
Глава 5. Исследования антимикробного действия и фармакологической активности мази Пиолит
5.1 Сравнительные исследования антимикробного действия
5.2 Исследование эффективности мази Пиолит на модели
термического ожога.
Выводы по главе
Общие выводы.
Практические предложения.
Литература


Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на ежегодных научных региональных конференциях Пятигорской государственной фармацевтической академии Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции гг. Пятигорск, IV научнопрактической конференции молодых ученых и студентов юга России Медицинская наука и здравоохранение апрель г. Анапа, межрегиональной научной конференции Актуальные проблемы фармации апреля г. Владикавказ. Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 9 работ. В научных изданиях, входящих в перечень ВАК, опубликованы 3 работы. Связь задач исследования с планом НИР учреждения, где выполнялась диссертация. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научноисследовательских работ ГОУ ВПО Пятигорская ГФА Росздрава госрегистрации 6. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 6 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы и 3 глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит таблиц и рисунков. Список литературы включает 4 источника, из них на иностранных языках. Глава 1. Протеолитические ферменты краткая характеристика Протеолитические ферменты протеазы КФ 3. Протеазы катализируют расщепление пептидных связей в молекулах пептидов и белков. В зависимости от положения расщепляемых связей в структуре молекулы субстрата протеазы разделяют на эндопептидазы протеиназы, расщепляющие внутренние пептидные связи, и экзопептидазы, расщепляющие пептидные связи с аминного аминопептидазы или карбоксильного карбоксипептидазы конца полипептидной цепочки. В зависимости от строения активного центра протеиназы подразделяются на четыре класса сериновые, цистеиновые, аспарагиновые, металлопротеиназы. Сериновые протеиназы трипсины содержат в активном центре серии, вырабатываются большинством организмов позвоночными, грибами, ракообразными и насекомыми. Цистеиновые тиоловые протеиназы содержат в активном центре остаток цистеина тиоловая функциональная группа и широко распространены в бактериальных, животных и растительных клетках. Аспарагиновые кислые, или карбоксильные протеиназы, содержащие в структуре активного центра остаток аспарагиновой кислоты и активные при низких значениях , немногочисленны и встречаются только у эукариот. Металлопротеиназы содержат ионы металлов чаще всего 2п2. Этот класс протеиназ немногочисленен, но широко распространен. К нему относятся разнообразные коллагеназы, желатиназы, пептидазы и др. Протеолитические ферменты весьма значительно отличаются и по субстратной специфичности. В то же время, протеазы, выделенные из пищеварительных органов беспозвоночных, обладают широкой специфичностью по отношению к белкам различной структуры . Раневой процесс представляет собой сложный комплекс физиологических реакций, развивающихся в организме при повреждении тканей . Согласно классификации, предложенной М. И. Кузиным с соавт. I фаза воспаления II фаза регенерации, образования и созревания грануляционной ткани III фаза образования и реорганизации рубца. Причем для каждой из фаз раневого процесса следует выбирать соответствующий подход мри терапии. Следует отметить, что лекарственного препарата, пригодного для лечения ран вне зависимости от фазы процесса, не существует . В I фазе раневого процесса рана характеризуется открытой раневой поверхностью, покрытой некротизированными тканями, часто обсемененной различными микроорганизмами. Также характерны воспаление и отек прилежащих к ране тканей. Свежие раны до момента полного покрытия их грануляциями способны всасывать токсины, бактерии, продукты распада тканей. Поэтому все применяемые в I фазе раневого процесса лекарственные препараты должны обладать высокой осмотической активностью, чтобы обеспечить интенсивный отток экссудата из глубины раны в повязку, оказывать антибактериальное воздействие на возбудителей инфекции, отторжение и расплавление некротических тканей и эвакуацию раневого содержимого . Это подтверждается тем, что наибольший эффект при лечении гнойных ран в 1 фазе оказывают именно мази на гиперосмолярных гидрофильных основах 5.