Получение противосибиреязвенных иммуноглобулиновых препаратов человека в эксперименте и изучение их биологических свойств

• Автор: Долматов, Владимир Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.23, 14.00.29
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Киров
• Количество страниц: 105 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

1.1. Эпидемиология и этиопатогенез сибиреязвенной инфекции

1.2. Клинические проявления сибирской язвы и лечение инфицированных людей.

1.3. Технологические аспекты получения препаратов на основе иммуноглобулинов человека для лечения инфекционных заболеваний

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Материалы исследования.

2.2. Технологические примы выделения иммуноглобулинов из донорской плазмы

2.3. Технология заготовки иммунной плазмы.

2.4. Методы определения физикохимических, химических, биохимических, иммунохимических и биологических
параметров препаратов
2.5. Методы экспериментальной оценки превентивных свойств, профилактической и лечебной эффективности
2.6. Статистический анализ
Результаты исследования и их обсуждение
Глава 3. Получение противоепбиреязвепных иммуноглобулиновых
препаратов человека
3.1. Изучение стабильности антител к протективному антигену сибиреязвенного микроба в процессе фракционирования
плазмы.
3.2. Установление уровня антител в иммунном сырье, достаточного
для получения специфичных иммуноглобулинов.
3.3. Получение экспериментальных серий препаратов и определение
их основных параметров
Глава 4. Технологические примы заготовки иммунного сырья и
определение условий его хранения
4.1. Изучение гуморального ответа доноров на иммунизацию сибиреязвенными вакцинами.
4.2. Оценка стабильности специфической активности иммунной плазмы в процессе хранения
Глава 5. Изучение биологических и защитных свойств
иммуноглобулиновых препаратов
5.1. Определение спектра антител к различным антигенным детерминантам сибиреязвенного токсина.
5.2. Оценка токсин нейтрализующей активности.
5.3. Изучение профилактической и лечебной эффективности внутривенного иммуноглобулина.
Заключение
Выводы
Список литературы


Однако даже при использовании антибиотиков последнего поколения, передовых методов диагностики и высокотехнологичного оборудования смертность при лгочной форме инфекции достигает 8. Проведение интенсивной химиотерапии может вызывать ряд неблагоприятных побочных эффектов вплоть до летального исхода вследствие масштабного высвобождения токсина при разрушении клеток возбудителя , . Единственный антитоксический препарат противосибиреязвснный лошадиный иммуноглобулин предназначен для внутримышечного введения, поэтому его применение не позволяет достичь быстрого нарастания антител в крови реципиента до протективного уровня. Современная научная разработка, направленная на ферментативное расщепление молекул иммуноглобулина, содержащихся в препарате, и выделение иммунохимически чистых РаЬ2фрагментов, может привести к созданию антитоксического лекарственного средства, пригодного для внутривенного введения . Центральным звеном в патогенезе сибирской язвы признан протективный антиген . Выполняя функцию молекулыпереносчика, он является необходимым компонентом реализации цитотоксических эффектов летального и отчного токсинов . Кроме того, протективный антиген в организме млекопитающих индуцирует образование антител, препятствующих развитию сибирской язвы, поэтому представляет собой перспективную антигенную детерминанту с точки зрения получения лечебных иммунобиологических препаратов , 1. Мировой опыт разработки и применения специфичных внутривенных иммуноглобулинов человека свидетельствует об их высокой эффективности и ареактогснности при лечении тяжлых инфекционных заболеваний различной этиологии , , , , , . В связи с этим перспективным направлением решения актуальной проблемы лечения людей, заражнных сибирской язвой, является создание аллогенного антитоксического противосибпреязвенного иммуноглобулина, пригодного для внутривенного введения. Основой нового препарата могут стать антитела к протективному антигену В. ЬгаЫв. Отечественные технологии получения внутривенных иммуноглобулинов предусматривают два варианта снижения антикомплсментарной активности либо ферментативную обработку полупродукта , либо его инкубацию в кислой среде . Препараты, полученные с применением этих методов, содержат 10, в то время как немаловажную роль в иммунной защите человека играют также плазменные и 1А. Метод дополнительного извлечения иммуноглобулинов всех трх классов из фракции Б позволяет получать комплексный препарат для энтерального применения. Разработка нового лекарственного средства достаточно длительна и включает множество этапов, от лабораторных опытов изготовления экспериментальных образцов продукта до клинических испытаний препарата. При этом необходим комплексный подход к решению целого ряда задач. Следовательно, актуальной проблемой является определение принципиальной возможности получения эффективных противосибиреязвенных препаратов на основе иммуноглобулинов человека. Цель исследования получение экспериментальных образцов противосибиреязвенных иммуноглобулиновых препаратов из плазмы крови человека и изучение их биологических свойств. Оценить возможность выделения антител человека к протективному антигену В. ВггаЫв из донорской плазмы, определить минимальную специфическую активность иммунного сырья, достаточную для получения противосибиреязвенных препаратов. Изучить динамику гуморального ответа доноров на иммунизацию комбинированной сибиреязвенной вакциной и ревакцинацию живой вакциной, установить возможный период заготовки и условия хранения иммунной плазмы. Получить из иммунной плазмы по трм различным технологическим схемам концентраты иммуноглобулинов, пригодные для внутривенного и энтерального применения, и определить их биохимические параметры. Ц Изучить спектр антител к различным антигенным детерминантам сибиреязвенного токсина и оценить токсиннейтрализующую активность полученных экспериментальных образцов препаратов т i. Определить профилактическую и лечебную эффективность внутривенного иммуноглобулина в эксперименте на животных.