Разработка набора реагентов для определения уровня антител к вирусу гриппа А кур иммуноферментным методом

• Автор: Хашин, Олег Валентинович
• Шифр специальности: 03.00.23, 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Шелково
• Количество страниц: 138 с. : ил.

Ключевым моментом в отработке твердофазного непрямого ИФА является получение коньюгата, то есть иммуноглобулина меченого пероксидазой. Качество получаемого коньюгата находится в прямой зависимости от серологической активности иммуноглобулина, активности фермента и условий связывания этих компонентов. Быстрый и точный диагноз гриппа кур является решающим условием организации необходимых мер борьбы с этим заболеванием. Цели и задачи исследования. В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы являлась разработка набора на основе очищенных и концентрированных антигенов вируса гриппа Л кур, использзуемых в качестве компонента набора для определения уровня антител в крови больной, переболевшей и вакцинированной птицы в иммуноферментнм анализе. Провести сравнительную оценку чувствительности РТГА и разработанного иммуноферментного Набора при определения уровня антигриппозных антител в сыворотках больной и вакцинированной вирусом гриппа А птицы. Научная новизна. Проведена сравнительная оценка чувствительности РТГА и разработанного иммуноферментного Набора при определения уровня антигриппозных антител в сыворотках больной и вакцинированной вирусом гриппа А птицы. Практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований позволили разработать инструкцию по изготовлению набора реагентов для определения уровня антител к вирусу гриппа А кур в иммуноферментном анализе и проект нормативной документации. Набор предназначается для индикации и количественного определения антигриппазных антител в сыворотках крови кур. Внедрение в практику ветеринарии иммуноферментного набора реагентов для определения уровня антител к вирусу гриппа А кур в иммуноферментном анализе позволит решить проблему массового эпизоотологического обследования поголовья кур, составляющего основу мероприятий по ликвидации и предупреждению распространения данного заболевания. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Обшая характеристика семейства ортомиксовирусов. Вирусы гриппа принадлежат семейству xvii . Это семейство включает в себя четыре рода род Ivi, к которому относят вирус гриппа типа А, род Ivi, к которому относят вирус гриппа типа В, род Ivi, к которому относят вирус гриппа типа С, и род vi. Такая классификация вирусов гриппа получила свое применение с х годов при участии Международного Комитета Таксономии Вирусов 0. Вирионы ортомиксовирусов имеют липидосодержащие наружные оболочки, на которых расположены большие поверхностные выступы шипы. Вирусные оболочки окружают спиральный нуклеокапсид, имеющий диаметр от 9 до нм. Характер укладки нуклеокапсида в вирионе неизвестен. Геном ортомиксовирусов состоит из восьми молекул одноцепочечной негативной РНК и имеет суммарную молекулярную массу 5 6 Да 5. Все вирусы семейства имеют от семи до десяти главных полипептидов. Вирусы обладают гемагглютинирующей активностью, обусловленной наличием гликопротеинового комплекса поверхностных шипов. Репродукция ортомиксовирусов происходит в ядре и в цитоплазме, а сборка включает этап отпочковывания от плазматической мембраны. При смешанном заражении вирусы этого семейства могут обмениваться сегментами генома. Это явление получило название реассортации сегментов или рекомбинации вирусов гриппа. Обнаружено, что ортомиксовирусы распространены в природе чрезвычайно широко, как в плане географическом, так и в плане круга хозяев вируса. Важность вирусов, входящих в это семейство настолько велика для гуманитарной грипп занимает третье место по наносимому ущербу 9 и ветеринарной медицины, а сами вирусы настолько интересны своей антигенной и генетической структурой, что вирус гриппа стал одной из наиболее часто встречающихся моделей в исследованиях по иммунологии, молекулярной биологии и генетике. Следствием такого внимания к ортомиксовирусам стал огромный по объему и значению поток информации по различным аспектам их биологии , , , 9. Однако, подавляющее большинство получаемых данных и в настоящее время относится к вирусам гриппа человека. Это естественно, учитывая его уникальную роль в патологии человека, но существенно затрудняет понимание общих закономерностей, свойственных природе вирусов гриппа в целом.