Биотехнологические аспекты сохранения генетических ресурсов животных

• Автор: Багиров, Вугар Алинияз оглы
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.13
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: п. Дубровицы, Московской обл.
• Количество страниц: 245 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Общая характеристика работы

Глава 1 Сохранение и рациональное использование

генетических ресурсов 1.1. Обзор литературы

1.1.1. Сохранение генетических ресурсов

Общая характеристика овцебыков

vi

1.1.3. Общая характеристика яков

1.1.4. Общая характеристика сайгаков i i

1.1.5. Сперматозоиды животных

1.1.6. Воспроизводительная функция у кроликов

1.1.7. Воспроизводительные особенности у кроликов
1.1.8. Биотехника воспроизведения кроликов
0 1.1.9. Криоконсервация семени кроликов
1.2. Материалы и методы исследований
1.3. Результаты исследований и обсуждение
1 Усовершенствование технологии криоконсер
вации семени кролика
1.3.1.1. Совершенствование криопротективной среды
1.3.1.2. Оптимизация режима замораживания семени
1.3.1.3. Выбор способа замораживания семени
Усовершенствование инструментария для
искусственного осеменения крольчих.
Усовершенствование технологии криоконсервации эпидидимального семени как метода
1.3.2. сохранения и рационального использования
генетических ресурсов редких и исчезающих видов животных
Односторонняя кастрация самцов как метод
1.3.2.1. сохранения и рационального использования
генетических ресурсов
3 Создание банка семени редких, исчезающих и
уникальных видов животных
1.3.3.1. Банк семени трансгенных кроликов
1.3.3.2. Банк семени трансгенных баранов
1.3.3.3. Банк семени трансгенных хряков
1.3.3.4. Банк семени овцебыков
1.3.3.5. Банк семени яков
1.3.3.6. Банк семени сайгаков Изучение морфологических и гистологических
1.3.4. особенностей гонад и видовых характеристик сперматозоидов различных видов животных
1.3.4.1. Биологические особенности гонад овцебыка
4 Изучение гистологических особенностей разных органов овцебыка
1.3.4.2. Биологические особенности гонад яка
1.3.4.3. Биологические особенности гонад сайгака
5 Сравнительный анализ сперматозоидов
различных видов животных
1.3.6. Внутритрубное осеменение свиней
Изучение возможности получения трансгенных свиней после многолетнего хранения семени
1.4. Заключение
Глава 2 Новые подходы к генетической трансформации животных
2.1. Обзор литературы
2.1.1. Трансгенные животные
2.1.2. Методы получения трансгенных животных
2.1.3. Ретровирусные векторы.
2.1.4. Использование половых клеток семенников
2.1.5. Связывание чужеродной ДНК сперматозоидами
Влияние отдельных факторов на процесс
связывания чДНК сперматозоидами 2 7 Возможность проникновения чДНК в ядра
сперматозоидов
2.1.8. Строения ДНК сперматозоидов
2.1.9. Нукпеазы семени как фактор защиты от чДНК
2.2. Материалы и методы исследований
2.3. Результаты исследований и обсуждение
2 з Использование сперматозоидов в качестве
естественного вектора для переноса чДНК
2 Введение ретровирусных конструкции в семенники
животных
2 3 3 Оптимизация технологии временного
блокирования сперматогенеза у кроликов
2.4. Заключение
Глава 3 Цитогенетические исследования в сохранении
генетических ресурсов
3.1. Обзор литературы
3.1.1. Цитогенетические различия и видовая изоляция
3.1.2. Проявление хромосомного дисбаланса у животных
3.1.3. Нарушения в кариотипе при трансгенезе
3.2. Материалы и методы исследований
3.3. Результаты исследований и обсуждение
3.3.1. Усовершенствование метода кариотипирования
различных видов животных с использованием прикладных компьютерных программ
3.3.1.1. Этапы цитогенетического анализа
3.3.1.2. Анализ препаратов
З.З.1.З. Подсчет и измерение хромосом
3.3.1.4. Кариотипирование
3.3.2. Изучение и сравнительный анализ кариотипов яка,
крупного рогатого скота, овцебыка и овец
3.3.3. Анализ хромосомных аберраций у трансгенных
животных
З.З.З.1. Цитогенетическое обследование трансгенных
кроликов
3.3.3.2. Изучение влияния чДНК на стабильность
кариотипа трансгенных кроликов
З.З.З.З. Цитогенетическое обследование трансгенных
свиней
3.3.3.4. Изучение влияния чДНК на стабильность
кариотипа трансгенных свиней
3.4. Заключение
4. Выводы
5. Практические предложения
6. Список литературы
7. Список сокращений
Общая характеристика работы.
Актуальность


Процесс созревания продолжается во время перемещения сперматозоидов в половых путях самца и самки вплоть до самого момента оплодотворения. Как правило, морфологическая дифференцировка сперматозоидов предшествует физиологической РузенРанга, . Тестикулярные сперматозоиды имеют следующие особенности. В семенниках млекопитающих сперматозоиды слабо подвижны. Сперматозоиды в семенниках содержат резидуальные капли, которые являются остатками цитоплазмы, элиминирующейся в процессе спермиогеиеза. Цитоплазматические капли сбрасываются, когда сперматозоиды проходят по половым путям самца. Сперматозоиды, извлеченные из гонад млекопитающих, неспособны к оплодотворению i . Эпидидимальные сперматозоиды у млекопитающих после выхода из семенника сперматозоиды попадают в эпидидимис сначала в часть, называемую головкой, затем переходят в тело эпидидимиса и, наконец, поступают хвост эпидидимиса, где и хранятся до эякуляции. Экспериментально было показано, что частота оплодотворения при искусственном осеменении увеличивается, если сперматозоиды берут из все более удаленных от семенника участков семявыводящего канала. Оптимум фертильности достигался если сперму брали из хвоста эпидидимиса, тогда как сперма, находящаяся в головке эпидидимиса, не обладала оплодотворяющей способностью. Таким образом было установлено, что оплодотворяющую способность сперматозоиды приобретают в эпидидимисе i . В эпидидимисе происходят изменения, позволяющие реализовать заложенную в сперматозоидах потенцию движения. Было показано при помощи микроспектрофотометрии, что во время созревания происходят и количественные изменения ДНКАвторы установили, что количество измеренной в ультрафиолетовом свете ДНК на клетку остается неизменным от стадии сперматид до конца созревания с эпидидимисе i . Эякулированные сперматозоиды более зрелые, активно подвижные, популяция их является гетерогенной, так как в нее попадают сперматозоиды разной степени зрелости. Во время транспортировки сперматозоидов половых путях самца и самки происходят физиологические и ультраструктурные изменения сперматозоидов, связанные с созреванием и приобретением оплодотворяющей способности. В половых путях самца происходит стабилизация мембран, предохраняющая от преждевременной активации Данилова и др . Воспроизводительная функция у кроликов. Известно, что у большинства сельскохозяйственных животных наблюдается спонтанная овуляция, но некоторым, таким как кошка, хорек, кролик и норка, требуется нервный стимул, получаемый при коитусе с самцом , Милованов, Ерохин, . Дикий кролик отличается резко выраженным сезоном спаривания, который начинается в январе и заканчивается в июне , . Более того, сезонность размножения у самцов домашних кроликов четко проявляется при их содержании под навесом и слабо в крольчатнике. Растимешин, . Таким образом, в условиях крольчатника с регулируемым микроклиматом воспроизводительная способность самцов мало изменяется в зависимости от сезона года. Воспроизводительные особенности у кроликов. Особенность воспроизведения кроликов состоит в том, что при отсутствии цикличности функций яичника, самки могут длительное время находиться в состоянии охоты. Созревание фолликулов происходит каждые 7 дней и при отсутствии спаривания, а следовательно и овуляции, фолликулы подвергаются атрезии. Соколовская, . Овуляцию у животных с отсутствующим половым циклом можно также вызвать с помощью различных искусственных обработок. Так, при механическом раздражении шейки матки овуляция наступала лишь у животных в различных временных интервалах. При раздражении поясничной области крольчихи переменным электрическим током напряжением вольт, в течение секунд, овуляция наступала через сутки V, , и через часа при раздражении гипофиза, гипоталамуса и синего бугра i, , . Все вышеперечисленные методы вызывания овуляции не могут быть рекомендованы в широкую практику кролиководства. В году была открыта способность мочи беременной женщины вызывать овуляцию у крыс i, . Это открытие дало толчок к разработке гормональных способов овуляции. Рисунок 5 Половая система самцов кроликов. Рисунок 6. Половая система крольчихи.