Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий

• Автор: Золотухин, Сергей Николаевич
• Шифр специальности: 03.00.23, 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Ульяновск
• Количество страниц: 341 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Биологические свойства энтеробактерий и их роль в патологии

животных и человека

Биологические свойства и практическое применение бактериофагов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Материалы и методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Выделение бактериофагов и селекция клонов фагов.

Морфология негативных колоний селекционированных бактериофагов

Литическая активность.
Изучение диапазона литической активности
Иммуногенные свойства бактериофагов.
Взаимодействие селекционированных бактериофагов
с индикаторными культурами энтеробактерий
Изучение действия инактивирующих факторов на бактериофаги.
Определение типа нуклеиновой кислоты и молекулярной массы генома
Изучение морфологии фаговых корпускул.
Изменение литической активности бактериофагов при хранении
Разработка оптимальных количественных параметров соотношния фаговых
корпускул к клеткам хозяев для приготовления препаратов с высоким титром
Изготовление и контроль индикаторных фагов
Разработка схем исследования материала с целью выделения и ускоренной идентификации энтеробактерий видов . ii,
М. ii, Е i сероваров Н7 и Н, родов , i, i и
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Вслед за зарубежными исследователями морганеллы оказались в поле зрения отечественных микробиологов, подтвердивших их этиопатогенетическую роль при желудочнокишечных и септических заболеваниях людей А. М. Казановский, Е. В. Холодкова и др. Н.С. Горячкина, и др. М.А. Борисова и др. И.И. Артющенко, . . Коновалов, А. П. Батуро и др. М.В. Прошутинская, . Вместе с тем, разные авторы отмечали, что в большинстве случаев в развитии патологического процесса наряду с морганеллами участвуют еще и другие виды патогенных энтеробактерий. Несмотря на большое количество работ медицинских исследователей, посвященных изучению морганелл как возбудителей диарейных и других заболеваний людей, роль этих бактерий в ветеринарной практике, и в частности, патологии разных видов сельскохозяйственных животных до х годов оставалась неизвестной. Исследованиями I. Штаммы морганелл довольно часто циркулируют на свиноводческих и молочных фермах, неблагополучных по массовым желудочнокишечным заболеваниям молодняка. По данным I. . Каврука и С. В. Бритовой , при изучении видового состава и биологических свойств микрофлоры фекалий больных диареей поросятсосунов и новорожденных телят из свиноводческих и молочных ферм 9 областей и 1 края Российской федерации и двух областей Украины в период массовых желудочнокишечных заболеваний молодняка штаммы морганелл были обнаружены на свиноводческих и 6 молочных фермах разных областей и регионов страны. Частота находок морганелл в исследуемых пробах фекалий варьировала и составляла в разных хозяйствах от 8 до случаев, а в двух хозяйствах одной свиноводческой и одной молочной фермах соответственно в случаев. При бактериологическом исследовании трупов поросят и трупов телят, погибших от диареи и поступивших из хозяйств, где циркулировали морганеллы, авторы выделяли патогенные штаммы этих бактерий из различных внутренних органов и тканей соответственно в случаев наряду с другими видами энтеробактерий, а у одного поросенка чистые культуры морганелл. На фермах, благополучных по массовым желудочнокишечным заболеваниям новорожденного молодняка, находки морганелл являлись довольно редкими, а выделенные из фекалий клинически здоровых поросят и телят штаммы были преимущественно непатогенными для белых мышей при внутрибрюшинном заражении их в дозе 1 млрд. Е.С. Воронин, Д. А. Девришов , Л. Я. Ставцева и др. Бактерии неприхотливы к питательным средам и хорошо размножаются на всех простых средах в аэробных и анаэробных условиях факультативные анаэробы при температуре от до С, оптимальными режимами роста являются температура С и 7,07,4. В жидких средах МПБ, бульоне Хоттингера, пептонной воде через ч дают рост в виде равномерного помутнения среды, осадок легко разбивается при встряхивании пробирки. На плотных средах МПА, агаре Хоттингера в первые сутки роста образуют мелкие и средние по размеру выпуклые колонии округлой формы с ровными краями, гладкой блестящей поверхностью, сероватобелого цвета. На агаре Плоскирева колонии в первые сутки роста имеют росинчатые вид, полупрозрачные, голубоватосерого цвета на вторыетретьи сутки колонии увеличиваются в размере и приобретают сероватобелый цвет. На висмутсульфит агаре вырастают колонии зеленоватооливкового цвета 8формы с более плоской поверхностью средних размеров. Культуры морганслл при длительном хранении и многократных пересевах способны диссоциировать с переходом от Б в форму. Данная изменчивость особенно часто наблюдается у лабораторных штаммов. Характерной особенностью морганелл является их низкая ферментативная активность. В частности, из числа многочисленных сахаров и многоатомных спиртов они сбраживают с образованием кислоты и газа только глюкозу, другие сахара лактозу, сахарозу, маннит, дульцит, мальтозу, сорбит, салицин и пр. Симонса не растут, дают положительную реакцию с метилротом и отрицательную реакцию ФогесПроскауэра, мочевину расщепляют, желатин не разжижают, дезаминируют фенилаланин, декарбоксилируют орнитин, не изменяют лизин.