Изучение роли транскрипционных факторов HNF3 и рецепторов ксенобиотиков в механизме видовой специфичности действия гепатоканцерогенных аминоазокрасителей

• Автор: Пахарукова, Мария Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 122 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Химический канцерогенез

2.2. Транскрипционные факторы 3

2.2.1. Доменная организация 36

2.2.2. Позиционирование нуклеосом НЫЕЗбелками

2.2.3. Взаимодействие 3 с другими белками

2.3. Влияние гепатоканцерогснов на транскрипционные

факторы 3

2.4. Внутриклеточные рецепторы, способные связывать

ксенобиотики и участвовать в реализации их эффектов
2.4.1. Ядсрные рецепторы
2.4.1.2 Конститутивный рецептор андростанов
2.4.2. Арилгидрокарбоновый рецептор
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. Исследование роли белкапосредника в действии ОАТ,
ЗМеДАБ и ДЭНА НА транскрипционные факторы 3
4.1.1. Специфичность действия белковпосредников в механизме
влияния ОАТ, ЗМеДАБ па транскрипционные факторы семейства 3
4.1.2. Исследование участия белкапосредника в действии ДЭНА
4.2. Влияние ОАТ, ЗМеДАЬ и ДЭНА на ДНКсвязывающую
активность рецепторов ксенобиотиков
4.3. Содержание рецепторов ксенобиотиков и в экстрактах ядер печени до и после обработки
гепатоканцерогенами
4.4. Изучение связывания гепатоканцерогеннных
аминоазокрасителей с
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
7. СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ТФ транскрипционный фактор
ТАТ тирозинаминотрансфераза
1 1 ядерный фактор гепатоцитов
3 3 ядерный фактор гепатоцитов
4 4 ядерный фактор гепатоцитов
X iv X печеночный Хрецептор
X X прегнановый X рецептор
iiv , конститутивный
рецептор андростанов
xi ii iv рецептор
активаторов пролиферации пероксисом
арилгидрокарбоновый рецептор
X ii i X X рецептор ретиноевой кислоты
iii малый партнер гетеродимеризации
i i цитоплазматический удерживающий белок
i белок теплового шока
X x белки, содержащие домен

ii iv ii
МАРК iiv ii митогенактивирусмая
протеи нкиназа
ii С протеи нкиназа С
iixixi спиральпетлясиираль ФБ фенобарбитал
iii i лигандсвязьтвающий домен
ii i ДНКсвязывающий домен
iv i домен активаторной функции
iv сайт связывания рецептора
iv гормончувствительный элемент
ТХДД 2,3,7,8тетрахлордибензордиоксин
ТСРОВОР 1,4бис23,5дихлоропиридоксибензол
О АТ ортоаминоазотолуол
3 МеДАБ 3 метил4диметиламиноазобснзол
4МеДАБ 4 метил4диметиламиноазобензол
ДЭНА диэтилнитрозамин
ПААТ полиакриламидный гель
ДМСО диметилсульфоксид
АТ антитела
1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Кроме того, показано, что канцерогенное соединение другого класса диэтилнитрозоамин ДЭНА, вызывающее опухоли печени и у крыс и у мышей, также снижает активность тех же транскрипционных факторов. Дальнейшие исследования показали, что влияние ОАТ и ЗМеДАБ на транскрипционные факторы 3 осуществляется, не напрямую, а, повидимому, посредством некоего ядерного белка белков Меркулова и др. Было выдвинуто предположение, что этот белокпосредник является ксеносенсором, воспринимающим сигнал гепатоканцерогенного соединения и передающим его на транскрипционные факторы 3 и, возможно, другие регуляторные белки. 3 ДНКсвязываюшую активность, так и для выяснения причин видоспецифического действия ОАТ и ЗМеДАБ. Было выдвинуто предположение, что в качестве такого белка могут выступать рецепторы ксенобиотиков, связывающие многочисленные химические соединения и опосредующие их плейотропные эффекты на организм. Цель и задачи исследования. Целью данного исследования было изучение механизмов, обусловливающих видовую специфичность действия гепатоканцерогенных аминоазокрасителей у мышей и крыс, а также поиск ксеносенсорных белков, способных принимать участие в передаче сигнала от ОАТ и ЗМеДАБ на 3. Выяснить, связана ли видовая специфичность гепатоканцерогенов ОАТ, ЗМеДАБ с различным действием белковпосредников на транскрипционные факторы 3 крысы и 3 мыши или же она обеспечивается избирательной активацией белкапосредника под действием специфичного для данного вида канцерогена. Исследовать участие белкапосредника в действии видонеспецифического гепатоканцерогена ДЭНА на 3 белки. Изучить влияние ОАТ, ЗМеДАБ И ДЭНА на ДНКсвязывающую активность рецепторов ксенобиотиков печеночного Хрецептора X, прегнанового X рецептора X конститутивного рецептора андростанов , рецептора активаторов пролиферации пероксисом , арилгидрокарбонового рецептора в печени мышей и крыс. Выяснить, обусловлено ли увеличение ДНКсвязывающей активности и под действием гепатоканцерогенных аминоазокрасителей изменением содержания этих рецепторов в экстрактах ядер печени. Изучить способность О АТ и ЗМеДАБ специфически связываться с конститутивным рецептором андростанов . Научная новизна и практическая значимость. Установлено, что механизмы влияния гепатоканцерогенных аминоазокрасителей ОАТ и 3МеДАБ и диэтилнитрозоамина ДЭНА на ДНКсвязывающую активность транскрипционных факторов 3 различны. Видоспецифичность действия аминоазокрасителей на II3 определяется избирательной активацией ядерного белкаов под влиянием гепатоканцерогенного для данного вида вещества ЗМеДАБ для крыс, ОАТ для мышей. Показано, что избирательное увеличение ДНКсвязывающей активности рецепторов ксенобиотиков и под действием гепатоканцерогенных аминоазокрасителей ОАТ и ЗМеДДБ как i viv, так и i vi соответствует способности этих веществ снижать ДНКсвязывающую активность 3 белков. Обнаружено, что при действии видонеспецифического гепатоканцерогена ДЭНА, не активирующего белокпосредник, также не активируются и . связано, повидимому, с видоспецифическими различиями в связывании этого рецептора с ОАТ и ЗМеДАБ. 3 определяется избирательной стимуляцией белкаов1Юсредникаов, который активируется у крыс гепатоканцерогенным для них ЗМеДАВ, а у мышей гепатоканцерогенным для них ОАТ. Этот белок кипосредникки неспецифичсски снижает ДНКсвязывающую активность II3 мыши и 35 крысы. Избирательная активация рецепторов ксенобиотиков и под действием гепатоканцерогенных аминоазокрасителей но не их неканцерогенных аналогов как i viv, так и i vi сопряжена со способностью этих соединений снижать ДНКсвязываюшую активность 3 белков. Неспецифичсски й гепатоканцероген ДЭНА снижает ДНКсвязывающую активность 3 в отсутствии белкапосредника и не изменяет активность и . Увеличение ДНКсвязьтваклцей активности и не обусловлено изменением содержания этих белков в ядрах клеток печени под влиянием аминоазокрасителей.