Исследование некоторых поведенческих и биохимических особенностей в линиях Drosophila melanogaster, мутантных по гену flamenko

• Автор: Субочева, Евгения Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил

Содержание

Список использованных сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы.

I. Геномные факторы, регулирующие транспозиции мобильных элементов дрозофилы.

. Ретротранспозоны дрозофилы. Ю

Б. Геномные факторы, контролирующие транспозицию рстротрзнспозонов

. МДГ4 первый ретровирус, обнаруженный у беспозвоночных.

Г. Генетический контроль транспозиций МДГ4 со стороны гена .

II. Дрозофила как объект генетикоповеденческих исследований I

Л. Относительная роль генотипа и среды в формировании поведения. I

Б. Гснстичсскнс подходы к решению вопросов о механизмах поведения
В. Репертуар поведенческих реакций дрозофилы
1. Простейшие формы поведения таксисы
2. Реакция на вкусовые и запаховыс раздражители
3. Основные формы обучения и мутации, нарушающие способность к обучению и память, у дрозофилы.
4. Репродуктивное поведение дрозофилы
Глава 2. Материалы и методы
I. Линии дрозофилы, использованные в работе.
II. Выявление мутации в локусс .
III. Анализ активности эстсра.зы
. Метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле
Б. Определение ферментативной активности зстсраз
. Анализ уровня активности эстераз статистическая обработка данных
IV. олучснис конструкций типа
V. Изучение поведенческих характеристик.
А. Анализ двигательной активности.
Ь. Исследование ольфакторной чувствительности.
В. Изучение способности к ассоциативному обучению с использованием
запаховых раздражителей при подкреплении электрошоком
Г. Исследование репродуктивного поведения самцов, ухаживающих за
девственными самками.
Д. Регистрация поведения ухаживания и выработка условнорефлекторно о подавления ухаживания у самцов в экспериментах с оплодотворенными самками
Е. Статистическая обработка результатов.
VI. Рсстрикгный анализ геномной ДНК мух
Глава 3. Результаты и обсуждение.
I. Изучение поведенческих характеристик в линиях с мутацией
. Спонтанная двигательная активность.
Б. Реакция на запаховыс раздражители
. Изучение способности к ассоциативному обучению с использованием запаховых раздражителей при подкреплении электрошоком
Г. Изучение обшей репродуктивной активности самцов и особенностей ритуала ухаживания в экспериментах с девственными самками
1. Изучение успешности спаривания самцов эксперименты в составе группы
2. Изучение особенностей ритуала индивидуальных ухаживания самцов.
II. Анализ акИВностн эасразы6 в линиях с мутацией
III. Получение конструкции
IV. Введение в эксперимент новых линий
А. Выявление мутации в локусе
Б. Молекулярногенетический анализ копий МДГ4.
V. Изучение поведенческих характеристик в линиях, различающихся по аллелям генов i, и по присутствию активных копий МДГ4.
. Спонтанная двигательная активность.
Б. Ольфакторное восприятие
. Изучение способности к ассоциативному обучению в ольфакторной парадигме при подкреплении электрошоком
Г. Изучение репродуктивного поведения самцов в экспериментах с девстаепшАш самками
1. Оценка репродуктивной активности самцов в составе группы
2. Изучение особенностей ритуала ухаживания индивидуальных самцов.
Д. Изучение особенностей ритуала ухаживания и выработка
условнорсфлскторного подавления ухаживания у самцов в экспериментах с оплодотворнными самками.
1. Изучение особенностей ухаживания
2. Выработка умовнорефлекторного подавления ухаживания.
Заключение.
Выводы.
Литература


Особенности его структуры и инфекционные свойства позволяют говорить о МД1 4 как о первом ретровирусе, обнаруженном у беспозвоночных i . I. . Несмотря на то, что ретровирусы долгое время являются предметом пристального внимания исследователей, на данный момент очень мало сведений об их генетической связи с хозяином. Это обуслоазено тем. Наличие хорошо изученного регротранспозока МДГ4 в геноме такого удобного объекта, как . Как и другие транспозиционные элементы и эндогенные ретровирусы, МДГ4, подобно ядерным генах, обычно передатся по вертикали. Однако в определнном генетическом окружении число копий этого элемента, унаследованных при половом размножении, может увеличиваться i . Сравнение линий с низким и высоким числом копий МДГ4 привело к открытию гена, получившею название , который контролирует транспозицию 1ДГ4 . МДГ4. В настоящее время является единственным геномсупрессором ретротранспозиции, который удалось обнаружить у лрозофилы. Другие биологические функции гена пока точно не установлены, однако есть основания предполагать, что репрессия транспозиций МДГ4 не является его первичной и основной функцией. Вопервых, узкая специфичность репрессии, осуществляемой , говорит в пользу того, что этот механизм защиты был выработан клеткой при появлении в е геноме транспозиционно активных копий МДГ4 i . Кроме того, большинство известных клеточных генов, участвующих в регуляции транспозиций ретрозлементов, характеризуется плейотропным действием. Среди них есть локусы модификаторы транскрипции, гены гомеобелков, а также гены, участвующие в процессинге и поддержании стабильности транскриптов Ким и др. Некоторые из них вовлечены в контроль развития нервной системы или обеспечивают процессы, связанные с поведением . В связи с этим следует отметить, что последние исследования в области генетики поведения показывают, что мутации, фенотипически проявляющиеся как нарушения различных поведенческих характеристик, нередко затрагивают локусы, которые принимают участие в фундаментальных клеточных процессах или процессах развития . Нередко анализ конкретного поведенческого фенотипа мутации и сравнение его с действием известных поведенческих мутаций позволяет сделать выводы о природе тена и сто предполагаемой клеточной функции. Подобран наджный контроль, который позволит определить вклад гена в наблюдаемое поведение и исклюют, влияние других факторов. Сконструировать линию в которой нормальный аллель находится в генетическом окружении исходной стабильной линии . Изучить ферментативную активность эстсразы6 в мутантных и нормальных по линиях и оценить сс роль в наблюдаемых изменениях поведенческих характеристик. Глава 2. Мобильные генетические элементы МЭ дрозофилы были открыты болсс лет назад . ДНК. За это время было установлено, что геном дрозофилы содержит множество разнообразных по структуре и способу транспозиции МЭ. Они составляют по некоторым оценкам даже до всей ядерной ДНК. Отличительным свойством МЭ является их способность к автономным перемещениям внутри генома как в пределах одной хромосомы, так и между негомолошчными хромосомами. Они играют существенную роль в обеспечении функционирования генома, влияя на экспрессию генов достаточно упомянуть лишь тот факт, что значительная часть всех исследованных к настоящему времени морфолшических мутаций у дрозофилы до обусловлена ннсерциямн МЭ. Однако в свою очередь они сами подвержены котролю со стороны хозяйского генома клетки. Природа этого контроля зависит от структуры мобильного элемента. Исходя из особенностей структуры и механизмов транспозиции у дрозофилы выделяют два основных типа МЭ Таблица 1 i, это элементы, использующие для своих перемещений ДНКинтермедиагы. МЭ, перемещающиеся посредством РНКинтсрмсднатов, или рстротранспозоны. Б геноме дрозофилы наиболее распространенными являются рстротранспозоны, получившие название изза сходства их строения и жизненного цикла с ретровирусами позвоночных животных. Аминокислотная последовательность, колируемая рсгроэлсмснтамн, проявляет сильную гомологию обратной транскриптазс рсвсртаэс ршровирусов , .