Прионный детерминант (PSI + ) дрожжей Saccharomyces cerevisiae : Факторы, влияющие на индукцию de novo и поддержание

• Автор: Кочнева-Первухова, Наталья Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 113 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Прионы млекопитающих и низших эукариот сходство молекулярной природы

1. Прионы человека и животных

1.1. Природа инфекционного агента

1.2. Структура и свойства белка РгР

1.3. Процесс прионного перехода РгР i viv и i vi

1.4. Модели конверсии РгРс в

1.5. Штаммы прионов

2. Прионоподобные элементы низших эукариот
2.1. Факторы герминации трансляции и дрожжей
2.2. Структура и свойства гена и белка
2.3. Экспериментальные доказательства прионоподобной природы
2.4. Роль шаперонов в образовании и наследовании прионов дрожжей
2.5. Цитоплазматический детерминант I и его влияние на индукцию
v
3. Заключение
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ
1. Делении в гене i изменения в уровне экспрессии кодируемого им белка влияют на эффективность индукции I
1.1. Эффективность индукции I v зависит от уровня экспрессии белка
1.2. 3концевые делении в гене 3увеличивают эффективность индукции I
v
1.3. 3концевые делении в гене снижают уровень экспрессии белка
2. Влияние белка на детерминант I
2.1. Сверхэкспрессия снимает токсический эффект избытка в 5У штаммах
2.2. Влияние уровня экспрессии на эффективность индукции I
3. Влияние детерминанта на индукцию 1 v
3.1. Разделение фенотипов I и
3.2. Количественное влияние I детерминанта на индукцию v
4. Свойства штаммов I
4.1. Различные штаммы ЛУ отличаются по своим супрессорным свойствам
4.2. Для разных штаммов характерна различная стабильность наследования
4.3. Соотношение между разными Р4 штаммами зависит от условий индукции
4.4. Возможность существования нестабильных конформаций
5. Индукция I vмутантным белком 2
5.1. 2аллель гена способна индуцировать 1 v
5.2. , индуцируемый 2аллелью гена способен существовать лишь
в условиях избытка белка
6. Прионные свойства белка 3 5р дрожжей . i
6.1. Образование v гибридного ,5
6.2. Межвидовой барьер на пути передачи прионных свойств между и
6.3. Индукция vри сверхэкспрессии гетерологичного
6.4. Разные изоляты I отличаются по своим свойствам
6.5. Сверхэкспрессия вызывает изгнание но не антисупрессорный эффект
ОБСУЖДЕНИЕ
1. Сконцсвая часть ингибирует процесс прионного перехода
2. и взаимодействие белков в свете прионыой конверсии
3. Механизм элиминации .5, детерминанта под влиянием точечной мутации в
гене
4. Штаммы индукция и свойства
5. РБГ . i и . vii. сходство и различие
6. Преодолим ли межвидовой барьер между . i и . vii
7. Заключение
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Ирионные заболевания известны давно, скрейпи овец описана более 0 лет назад, а БКЯ около цит. Покровский и Киселев, , но природа их долгое время оставалась совершенно загадочной. Уникальной особенностью этих заболеваний является то, что они могут носить инфекционный характер как куру н скрейпи, могут возникать спорадически БКЯ, известны также наследственные формы подобных заболеваний БКЯ и ГШШ. Как правило, их отличает необычно долгий инкубационный период, измеряющийся годами или даже десятилетиями. Прионные нейродегенеративные заболевания редкие болезни, встречающиеся с частотой I на миллион населения в год, но куру, инфекционное нейродегенеративное заболевание, описанное у аборигенов Новой Гвинеи и, как полагают, связанное с ритуальным каннибализмом Сас1иек, , в начале нашего столетия приняло на Новой Гвинее эпидемический характер. С исчезновением обычаев каннибализма эпидемия куру пошла на убыль, и заболевание постепенно исчезло. I., i . Эпизоотия губчатой энцефалопатии, вспыхнувшая в Великобритании в г. В последние годы в Великобритании были отмечены случаи заболевания БКЯ с необычными нейропатологическими проявлениями новый вариант БКЯ, нвБКЯ, причем с очень ранним развитием болезни до лет i . Часть исследователей полагает, что нвБКЯ есть результат заражения человека от коров, больных губчатой энцефалопатией, в результате употребления в пищу зараженного мяса , . В связи с этим проблема прионов приобрела в последнее время существенное практическое значение. Попытки обнаружить связанное с прионными болезнями инфекционное начало делались на протяжении многих лет, но долгое время оставались безуспешными. Было, однако, обнаружено, что вызывающий скрейпи инфекционный агент необычайно устойчив к ультрафиолетовому облучению и другим видам воздействий, повреждающих ДНК и РНК, но в то же время чувствителен к обработке агентами, воздействующими на белки пит. В г. Гриффит высказал предположение, что инфекционный агент в случае нрионных заболеваний не содержит нуклеиновых кислот, а представляет собой белок, воспроизводящий свои свойства за счет автокагалитического механизма ii, . Впоследствии эту гипотезу поддержал и обосновал многочисленньши экспериментами Прузинер. В г. Прузинср с соавторами выделили из инфицированного скрейпи мозга овец фракцию, состоявшую из аморфных агрегатов и палочкообразных структур и обладавшую повышенным титром инфскционности i, . Обработка этой фракции протеиназой К и другими агентами, разрушающими белки, приводила к потере инфекционной способности, но обработка нуклеазами и ультрафиолетовым излучением никак не влияла на нее. Прузинером прион i, i i i. Этими же исследователями был идентифицирован белок, названный ими i i от i, выделявшийся вместе с инфекционностью. Этот белок обладал повышенной устойчивостью к обработке иротеиназой К и наблюдался только в инфицированном, но не здоровом мозгу а. Кинетика протеолиза и падения инфекционного тигра оказались сходными i, . Работы Прузинера, много сделавшего для утверждения белковой теории прионов, были постепенно признаны большей частью научного сообщества, а в г. Нобелевский комитет присудил ему премию в области физиологии и медицины за открытие нового биологического принципа инфекций. В настоящее время природу инфекционного агента нельзя считать полностью доказанной, но белковая гипотеза подтверждена многими вескими аргументами, хотя существует ряд исследователей, продолжающих считать, что инфекционный агент какойто еще доселе неидентифицированный вирус с необычными свойствами ii . Следует, однако, подчеркнуть, что многочисленные попытки выделить связанную с заболеванием нуклеиновую кислоту по сей день так и не увенчались успехом i . Недавно было показано, что возможно заразить мышей прионной болезнью, вводя им химически синтезированный пептид, представляющий собой часть последовательности прионного белка . Структура и свойства белка РгР При исследовании белка выяснилось, что он является
модифицированной формой одного из нормальных белков клетки, РгР , . РгР и различаются по ряду параметров.