Комплексный подход к цитогенетике эмбрионального развития человека

• Автор: Кузнецова, Татьяна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 357 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Материал и методы исследовании.

ГЛАВА 2. Современные подходы к анализу хромосомных аберраций у

человека.

2.1. Общие представления о гаметогенезе.

2.2.Снерматогене з.

2.2.1. I Апологические методы учета нарушений сперматогенеза

2.2.2. Цитогенетические методы.

2.2.2.1. Анализ хромосом спермагоцитон.

2.2.2.2. Синаптонемные комплексы.

2.2.3. Анализ хромосомною набора сперматозоидов
2.2.3.1. Метод гетерологнчного оплодотворения
2.2.3.2. Примой анализ хромосомного набора спермня с
номошью метола I.
2.2.4. Молекулярная диагностика мужского бесплодия.
2.2.5. Алгоритм генетического обследования пациентов с
нарушениями репродуктивных функций
2.3. Оогенез
2.3.1. Первое деление мейоза.
2.3.2. Второе деление мейоза.
2.4. Ранний эмбриогенез.
2.5. ПостимплаитационныЙ период.
2.5.1. Клетки хориона плаценты.
2.5.2. Клетки амниотической жидкости
2.5.3. Лимфоциты пуповинной крови плода.
2.6. Принципы изучения возникновения хромосомных аберраций в ПОСТИМПЛагтацнонном и постнатальном периодах развития.
ГЛАВА 3. Хромосомные аберрации у человека.
3.1. Механизмы возникновения хромосомных аберраций.
3.1.1. Механизмы нсрасхождсния хромосом в мейозе
3.1.2. Мозанцизм хромосом.
3.2. Частота спонтанных хромосомных аберраций на разных стадиях внутриутробного развития человека
.1. До имплантации.
3.2.2. После имплантации
3.3. Спектр спонтанных хромосомных аберраций на разных стадиях внутриутробного развития человека
3.4. Факторы, предрасполагающие к возникновению хромосомных
аберраций.
3.4.1. Возраст.
3.4 2. Гетерозиготное носительсгно структурных аберраций.
3.4.2.1. Реципрокные трапслокащш.
3.4.2.2. Робертсоновские транслокации
3.4.2.3. Инверсии
3.4.3. Числовые хромосомные аберрации у родителей
3.4.3.1. Мозаичные варианты трисомии
3.4.3.2. Синдром Клайнфсльтера , XX.
3.4.3.3. Кариотип .X.
ЗАЗА Синдром ТриплоХ XXX
3.4.3.5. Синдром ШерешевскогоТсрнсра , X
3.4.3.6. Кариотип ,ХХ,ттг.
3.4.4. Наличие в семье ребенка с синдромом Дауна и другими
численными аномалиями кариотипа 1М
3.4.5. Множественные пороки развития у предыдущего ребенка
3.4.6. Привычное невынашивание беременности
ГЛАВА 4. Хромосомный мозаицнзм
4.1. Хромосомный мозаицнзм в антенатальном периоде .
4.2. Хромосомный мозаицнзм в постнатальном периоде .
ГЛАВА 5. Фенотипические особенности змбрнонов человека
с хромосомными аберранмнми.
5.1. Состояние проблемы.
5.2. Трисо.чня .
5.3. Трисом ия .
5.4. Трисомня
5.5. Кариотип .Х .
5.6. Кариотипы .XX и ,XXX
5.7. Триплоидия.
5.8. Стратегия комплексного подхода в исследованиях корреляций кариотинфенотип в эмбриогенезе человека
ГЛАВА 6. Состоящее и перспективы пренатальной диагностики
хромосомных болезней.
6.1. Общие принципы пренатальной диагностики
6.2. Методы пренатальной диагностики
6.2.1. Биохимический скрининг.
6.2.2. Ультразвуковой скрининг
6.2.3. Цитогенетический скрининг
6.3. Iоказания для пренатальной диагностики
6.4. Инвазивные методы пренагачьной диагностики.
6.5. Основные принципы цитогенетического анализа
6.6. Эффективность цитогенетической пренатальной диагностики
6.7. Диагностические проблемы кариотипирования плода
6.8. Алгоритм пренатальной диагностики хромосомных болезней.
6.9. рппциииальная схема верификации пренатального диагноза.
6 Докмплантационная диагностика.
6 Нетрадиционные методы пренатальной диагностики
ГЛАВА 7. Особенности структурнофункциональной организации
хромосом н змбрио енезе человека.
7.1. Полиморфизм ядрышкообразующих районов ЯОР хромосом у эмбрионов человека.
7.1 Л. Полиморфизм ЯОР у эмбрионов 8 недель развития.
7.1.2. Полиморфизм ЯОР у плодов недель развития
7.2. Метилирование ДНК в эмбриогенезе.
7.2.1. Метод пиктрансляцни i i
7.2.2. Распределение сигнала на метафаэных хромосомах клеток цитотрофобласта.
7.2.3. Гетерогенность гетерохроматиновых районов хромосом.
7.3. Морфометрнческнй анализ гетерохроматиновых районов хромосом 1.
9, в эмбриогенезе человека
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В ПРАКТИКУ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Согласно рекомендациям ВОЗ ,, сисрмограмма должна учитывать следующие критерии концентрацию сперматозоидов в 1 мл эякулята, соотношения живых и мертвых, подвижных и неподвижных, морфологически нормальных и аномальных сперматозоидов наличия незрелых половых клеток. Разработаны критерии оценки морфолоши сперматозоидов , . Будучи ограниченной изучением зрелых половых клеток, спсрмограмма позволяет косвенно судить о состоянии сперматогенеза на основании морфологических показателей заключительных этапов этого сложного и длительного процесса. ККАНПК является одним из наиболее доступных методов анализа состояния сперматогенеза. Метод основан на определении числа клеток, находящихся на разных стадиях сперматогенеза, путем их подсчета на цитогенетических препаратах из бноптатов семенников или эякулята человека Курило с соавт. Изменения соотношения клеток снсрматогеныого ряда позволяет определить стадии деления или дифферемцировки клеток, на козорых сперматогенез оказывается заблокирован. Информативность метода ККАНПК доказана при исследовании эякулятов в группах пациентов с нарушениями сперматогенеза различной этиологии Курило с соавт. К недостаткам метода можно отнести затруднения при идентификации клеток но стадиям развития вследствие дегенерации большой части эякулированных клеток сиерматогенного ряда. Мами был проведен количественный кариологический анализ незрелых половых клеток в эякулятах пациентов, обратившихся в Центры репродукции СанктПетербурга в связи с бесплодием и имеющих аномальные спсрмограммы. ККАНПК проводили на суховоздушных препаратах из нативного эякулята после окрашивания флурохромом НоссЬз Кузнецова н др или Гнмзой. Идентификацию стадий и подсчет клеток осуществляли согласно схеме Курило Л. Ф. и др . Определяли долю клеток каждой стадии в общем числе НПК. При подсчете выделяли сперматоциты на стадии предпахитеипого этапа развития клетки на стадиях прелептотены. В отдельную труппу объединяли клетки, идентификация которых была невозможна Хклетки рнс. Несмотря на выраженные индивидуальные различия в соотношении НПК, можно отметить некоторые общие тенденции в разных группах пациентов табл. Так, при астеиозооспермни и астенотератозооспермии был выявлен частичный блок сперматогенеза на предиахитенных стадиях и отмечено снижение числа сперматоцктов 2 и сперматид. И. Сперматоциты II и сперматиды К. Рис. Клетки сперматогенпого ряда из эякулята пациентов с азооспермией. При олигоастснозооспермин наблюдалось увеличение количества сперматоциюв 2. При азооспермии незрелые клетки выявлялись в следовых количествах, обнаруживались эпителиальные клетки и лейкоциты, наличие которых в эякуляте может быть связано с воспалительными и дегенеративными процессами в семенных канальцах. Соотношение клеток НГ1К в эякуляте, в определенной степени служит показателем продолжительности этих стадий i. Кузнецова н др. Любопытно, что у всех пациентов доля клеток, находящихся в профазе 1 мейоза, продолжительность которой у человека составляет недели i . Исключение составили пациенты с астенотерагозооспер. Можно предположить, что к частичному блоку клеток на этих стадиях приводят аномалии конъюгации и синапсиса а, в дальнейшем, и нарушения сегрегации хромосом в М I или М II. Связь нарушений формирования головки спсрмия тератоспсрмия и его подвижности астсноспсормия с аномалиями карнотипа, возникающими в мейозе. Данные литературы о морфологических особенностях головки сперматозоидов с несбалансированным хромосомным набором и их подвижности весьма противоречивы. Некоторые исследователи отмечают корреляцию между хромосомными аномалиями и морфологическими признаками сперматозоида v Шароннн и др. В любом случае, соотношение НПК в эякуляте дает наглядное представление о реальном существовании презиготической селекции мужских гамет и способствует пониманию биомеханизмов ее реализации. Табл. До пахитсны 4,,3 5,,4 1,,9 0,,7 0. Пахитена 0,,6 0,,2 0,0, 0. ДиплотенаДнакннез 2. Метафаза 1 и 2 0 0. Спсрматоциты 2 1 спсрматнды ,,6 ,,8 ,,2 . Нсразошедшнеся сиерматнды . X клетки 9 5 1,0. Эпителиально клетки 2. Лейкоциты 1. Курило с соавт.