hobo-элемент как фактор нестабильности генома Drosophila melanogaster в клетках генеративных и соматических тканей

• Автор: Коваленко, Людмила Викторовна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 116 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ИНСЕРЦИОННЫЙ МУТАГЕНЕЗ

1.1.1. МУТАЦИОННЫЙ ПРОЦЕСС.

1.1.2. ОТКРЫТИЕ МЭ.

1.1.3. ВЛИЯНИЕ МЭ НА НЕСТАБИЛЬНОСТЬ ГЕНОМА.

1.1.3.1. Классификация МЭ

1.1.3.2. Структурная организация транспозонов Р и .

1.1.3.3. Свойства МЭ.

1.1.3.4. МЭ в системе гибридного дисгенеза.
1.1.3.5. Механизмы перемещения МЭ
1.1.3.6. Регуляция транспозиций и количества МЭ в
РМ и НЕ системах гибридного дисгенеза.
1.1.4. ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ НА ПЕРЕМЕЩЕНИЕ МЭ
1.2. МЭ В ПРИРОДНЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ
1.3. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ НЕСТАБИЛЬНОСТЬ В ЛИНИЯХ ИЗ ПРИРОДЫ.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. МАТЕРИАЛЫ
2.1.1. Линии мух.
2.2. МЕТОДЫ
2.2.1. Процедура получения производных линий.
2.2.2. Метод Мллер5 или РЦПЛМ для обнаружения и учета рецессивных летальных мутаций в Ххромосоме
2.2.3. Тест на соматические мутации и рекомбинации .
2.2.4. Облучение мух.
2.2.5. Методика приготовления давленых препаратов слюнных желез личинок
.
2.2.6. Мечение ДНК зондов
2.2.7. Флуоресцентная i гибридизация.
2.2.8. Выделение ДНК.
2.2.9. ПЦРанализ.
2.2 Статистическая обработка данных.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.
3.1. Анализ популяции . Умани на наличиеотсутствие
и Рэлементов.
3.2. Оценка линии7 с помощью теста РСПЛМ
3.3. Анализ распределения и Рэлементов
в Ххромосомах линии7 и ее производных
3.4. Анализ линий . на активность элемента в клетках соматических тканей.
3.5. Исследование влияния радиации на карину распределения юбсэлементов в хромосомах линии77
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ.
4.1. и элементы в популяции . Умани.
4.2. Рецессивные летальные мутации в7Ххромосоме.
4.3. Распределение и элементов в Ххромосомах
.
4.4. Активность юбоэлемента в клетках
соматических тканей . .
4.5. Воздействие радиации на поведение элтекта в линии7
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Исходя из этого, можно предположить, что МЭ играют важную роль в геноме как контролирующие элементы. Из стрессовых воздействий наиболее мощное влияние на индукцию транспозиций оказывают внутригеномные процессы изогенизация, аутбридинг, гибридный дисгенез. Он является одним из трех мобильных элементов, наряду и элементами, обусловливающих гибридный дисгенез у . i, . . , . Перемещения МЭ при гибридном дисгенезе у дрозофилы происходят преимущественно в клетках зародышевого пути. Причина различной активности МЭ в клетках соматических и генеративных тканей подробно изучена у . элемента и заключается в особенностях тканеспецифичного сплайсинга транспозазной премРНК i . i, i, . Однако в ряде работ были описаны случаи перемещения ретротранспозонов в соматических клетках у высших организмов iv . . , v i, Ким, Беляева, , однако, в целом, вопрос об активности транспозонов в соматических клетках у i остается открытым. Выявление возможности и изучение особенностей транспозиций МЭ в соматических клетках имеет большое значение, поскольку в ряде работ описан повреждающий эффект соматических перемещений Рэлеменга . , . Более того, соматические мутации представляют собой потенциальную угрозу малигнизации клеток. Таким образом, изучение особенностей поведения в геномах разных линий . МЭ имеют существенное значение в формировании генетической изменчивости. Целью данной работы является исследование транспозиционной активности юбоэлемента в клетках генеративных и соматических тканей в линиях i , выделенных из природной популяции Умани в период вспышки мутаций по гену . Описать распределение полноразмерных и делегированных копий элементов в геноме . Умани в динамике за период гг. . Умани, используя метод рецессивных, сцепленных с полом летальных мутаций. Провести исследование транспозиционной активности юбоэлеменгов в ряду последовательных поколений в линии у27 . Ххромосомах самцов. Тмгибридизации на политенных хромосомах клеток слюнных желез. Изучить влияние радиации, как внешнего мутагенного фактора, на картину распределения юбоэлементов в политенных хромосомах в линии у27 . Научная новизна работы. Для генетически нестабильных линий i , выделенных из природной популяции Умани, впервые получены цитогенетические данные о распределении и транспозиционной активности йобоэлеменгга в гене и других локусах Ххромосомы, которые дополняют проведенные ранее молекулярногенетические исследования локусспецифической нестабильности гена . Показано, что нестабильность гена исследованных у2 7 про из водных, вызванная активностью юоэлемента, является маркером активности и Рэлементов в других локусах Ххромосомы. Впервые описано, что в у27Ххромосоме при проведении скрещиваний с самками со сцепленными Ххромосомами у2 7Ххромосома наследуется патрилинейно, наряду с межаллельными переходами в локусе наблюдается увеличение числа копий . В ряду Упроизводных, отмечена особенность в поведении юбоэлеменгов преобладание частоты инсеций над частотой эксцизий в Ххромосомах. В выделенной из природной популяции i у линии, не подвергавшейся воздействиям, индуцирующим транспозиции МЭ, обнаружена способность к перемещениям в клетках соматических тканей. Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные результаты развивают теоретическое представление о закономерностях поведения в геноме дрозофилы, а также дополняют картину происходящих с юбоэлементом процессов в локусе и в геноме линий уманской популяции i . В работе получены экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что эяемет способен проявлять транспозиционную активность в клетках соматических тканей i , выделенных из природной популяции.