Исследование локализации гена предрасположенности к каталепсии у мышей с помощью полиморфных микросателлитных маркеров

• Автор: Базовкина, Дарья Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 95 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. Обзор литературы. Использование полиморфных микросателлитов для ф Генстического анализа и картирования поведенческих признаков

1.1. Микросателлиты и теория их использования.

1.1.1. Микросателлитные повторы, их локализация в геноме, полиморфизм, функции.

1.1.2. Микросателлитные повторы как генетические маркеры

1.1.3. Сравнение микросателлитов с другими генетическими молекулярными маркерами.

1.2. Методы генетического анализа признаков поведения, использующие

микросателлиты

1.2.1. Особенности генетической структуры признаков поведения.

1.2.2. СНГ анализ, его принципы, преимущества и недостатки

р 1.2.3. Метод геновкандидатов и принцип позиционного клонирования мутаций.

1.2.4. Генетический анализ реакции замирания. Применение ОТЬ анализа для ф картирования галоперидоловой каталепсии
ГЛАВА 2. Материалы и методы
1.1. Экспериментальные животные. .
1.1.1. Условия содержания.
1.1.2. Гибридологический эксперимент
1.1.3. Селекционный эксперимент.
1.2. Измерение каталепсии.
1.3. Выделение ДИК
Р1 1.4. Выбор микросателлитных маркеров.
ф 1.5. ДНКтипирование.
1.6. Тестирование функциональной активности 5НТА рецепторов
1.7. Статистическая обработка результатов.
1.7.1. Оценивание выраженности каталепсии.
1.7.2. Проверка гипотезы о сцеплении альтернативнго признака с неполной пеиетрантностыо.
ГЛАВА 3. Результаты исследования.
1.1. Доля каталептиков у мышей линий СВА, АКЛ и их гибридов Е и бэккроссов.
1.2. Локализация гена предрасположенности к каталепсии методом
одномаркерного анализа
1.3. Локализация гена предрасположенности к каталепсии методом интервального оценивания
ф 1.3.1. Картирование гена каталепсии по методу ВгосИоп е а1. .
1.3.2. Картирование гена каталепсии методом максимального правдоподобия и минимума х2.
1.4. Динамика выраженности каталепсии в ходе селекции на данный признак
1.5. Изменение концентрации генотипов и соответствующих аллелей СВА и АКК. у мышей в ходе селекции на каталепсию.
1.5.1. Бэккроссы
1.5.2. Мыши поколения селекции и Бг.
1.5.3. Мыши поколения Беи 2.
1.6. Изучение функциональной активности 5НТД рецепторов у мышей линий
СВА, АКБ. и Б поколения селекции
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


У некоторых особей этого вида кратковременную реакцию замирания можно вызвать раздражением рефлексогенной зоны шеи i, i, , . Полагают, что эта рефлекторная реакция имеет адаптивное значение и в естественных условиях проявляется у самок при копуляции, у детенышей при их транспортировке матерью и т. Выявлены межлинейные различия по скорости развития каталепсии у мышей i, i, . Высокая предрасположенность к щипковой каталепсии по сравнению с мышами других линий была обнаружена у мышей линии СВ А Куликов и др. У самцов и самок этой линии развивалась стойкая реакция замирания. Для изучения закономерностей наследования предрасположенности животных к каталепсии был проведен гибридологический анализ признака на мышах двух контрастных линий СВ А с максимальной его выраженностью и некаталептической . Анализ показал, что этот признак является аутосомиым, рецессивным, моно или олигогенным с неполной пенетрантностыо Куликов, iv . Однако генетическая структура каталепсии и локализация гена или генов, определяющих данную патологию, до настоящего времени оставалась не выясненной. Общеизвестна ключевая роль дофаминовых особенно 2 типа рецепторов в проявлении каталепсии , . Работами, проводимыми в Институте цитологии и генетики СО РАН iv . i и 5НТ2Л рецепторы вовлечены в регуляцию каталепсии у мышей. Большая часть поведенческих признаков являются количественными, контролируются полигенно и значительно зависят от факторов внешней среды Мазер, Джинкс, Васильева, i, , но при этом можно выделить главные гены с большим вкладом в изменчивость признака, чем остальные гены Мазер, Джинкс, . Для изучения генетической структуры количественных признаков был разработан специальный подход iiv i i анализ. i а. , i, x, . Одними из лучших маркеров для анализа являются микросателлитные последовательности, поскольку обладают такими свойствами, как полиморфность, кодоминантность и достаточно высокая частота встречаемости в геноме . , i, i, , . Так, у мышей был проведен анализ каталепсии, возникающей при введении галоперидола. В результате было показано, что этот тип реакции замирания связан с геном дофаминовых 2 рецепторов , Iii, . Такое заключение не являлось неожиданным, поскольку галоперидол по механизму воздействия является блокатором дофаминовых рецепторов, преимущественно 2 типа. Природа же генетических факторов, контролирующих щипковую каталепсию, до настоящего времен оставалась невыясненной. Сложность картирования щипковой каталепсии у мышей в том, что она относится к альтернативным признакам с неполной пенетраитностыо, и для картирования ее генов не приемлемы существующие программы подхода, основанные на регрессионном анализе. Целыо настоящего исследования было выявление генетической структуры щипковой каталепсии у мышей СВА и картирование генов или гена, определяющих у этих животных высокую предрасположенность к каталепсии. Научная новизна. ТЬ анализа с использованием полиморфных микросателлитных маркеров. Научнопрактическая ценность. Результатами данной работы установлена юнная структура сложного поведенческого признака щипковой каталепсии у мышей СВА, которая у данных животных выражается в гипертрофированной форме. Поскольку реакция замирания представляет собой важный элемент пассивнооборонительного поведения, то изучение ее генетического механизма способствует более глубокому пониманию эволюционной значимости каталепсии. Кроме этого, была продемонстрирована возможность картирования альтернативного признака с неполной пеиетрантност ью классическим подходом ЗТЬ анализа с помощью полиморфных микросателлитных маркеров. В данном исследовании показана также тесная связь предрасположенности к каталепсии с участком ДНК мыши, несущим ген 5НТ1Л рецепторов нейромедиатора серотонина, что привлекает внимание исследователей к более детальному изучению функций этих рецепторов и их роли в формировании поведенческих признаков.