Влияние химических мутагенов на репродукцию и изменчивость ортомиксовирусов

• Автор: Ахматуллина, Назира Бадретдиновна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Алма-Ата
• Количество страниц: 380 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.
Глава I. КРАТКИЕ СВЕДЕНИЯ О КЛАССИФИКАЦИИ И НОМЕНКЛАТУРЕ ОРТОМИКСОВИРУСОВ. ОСНОВНЫЕ СВОЙСТВА,

СОСТАВ И СТРУКТУРА .

Глава 2. ОСОБЕННОСТИ РЕПРОДУКЦИИ ОРТОМИКСОВИРУСОВ

В КЛЕТКЕ

Глава 3. РАЗЛИЧНЫЕ АСПЕКТЫ ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ

МУТАГЕНОВ НА ВИРУСЫ

3.1. Основные механизмы мутагенного и инактивирующего действий алкилирукхцих соединений. .

3.2. Мутагенез ортомиксовирусов

3.2.1. Нелетальные мутации у ортомиксовирусов, индуцированные воздействием химических мутагенов.
3.2.2. Условнолетальные мутанты у ортомиксовирусов
3.3. Действие малых доз химических мутагенов .
Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ .
4.1. Материалы
4.2. Методы исследований
4.2.1. Методы физикохимического анализа ортомиксовирусов и их субчастиц, формируемых
в зараженной клетке
4.2.2. Методы математического планирования и анализа, использованные в работе . . . .
4.2.3. Воздействие на ортомиксовирусы химическими мутагенами.
4.2.4. Воздействие химическими мутагенами
на индикаторные штаммы салмонелл .
4.2.5. Индуцирование различных мутаций и селекция мутантных клонов у ортомиксовирусов . . .
Глава 5. РЕПРОДУКЦИЯ ОРТОМИКСОВИРУСОВ В КЛЕТКЕ
5.1. Инфекционная и гемагглютинирущая активность субфракций клеток в ранней стадии инфекции вирусом гриппа
5.2. Инфекционность вирусспецифических РШ клеток, зараженных вирусом чумы птиц
5.3. Вирусспецифический РНКсинтезирущий комплекс при гриппозной инфекции
Глава 6. СТИМУЛЯЦИЯ РЕПРОДУКЦИИ ОРТОМИКСОВИРУСОВ
В КЛЕТКЕ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ МАЛЫМИ ДОЗАМИ ХИМИЧЕСКИХ МУТАГЕНОВ
6.1. Подбор и определение субмутагенных концентраций химических мутагенов в опытах на индикаторных штаммах салмонелл.
6.2. Изучение действия субмутагенных доз химических мутагенов на репродукцию вирусов гриппа
6.3. Использование метода математического планирования для изучения и интерпретации действия малых доз химических мутагенов
6.4. Влияние длительного воздействия малых доз химических мутагенов на репродукцию вируса гриппа.
6.6. Изучение действия стимулирующих доз химических мутагенов на ранние этапы взаимодействия вируса с клеткой.
6.7. Изучение влияния последовательного воздействия малыми и большими дозами химических мутагенов
на репродукцию вируса гриппа
Глава 7. КИНЕТИКА. ИНАКТИВАЦИИ И МУТАГЕНЕЗА ОРТОМИКСОВИ
РУСОВ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ХИМИЧЕСКИМИ МУТАГЕНАМИ. .
7.1. Некоторые закономерности действия НММ и
НЭМ на вирусы гриппа.
7.2. Действие этиленимина на внеклеточный
вирус гриппа.
7.3. Действие этиленимина на реплицирующийся
вирус гриппа.
7.4. Действие НММ и ДАВ на реплицирующийся вирус гриппа.
Глава 8. ИНДУЦИРОВАННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ПАТОГЕННОСТИ ВИРУСОВ ГРИППА.ИССЛЕДОВАНИЕ КОРРЕЛЯЦИИ С ДРУГИМИ ГЕНЕТИЧЕСКИМИ ПРИЗНАКАМИ, ОПРЕДЕЛЯЕМЫМИ I VI.
8.1. Изменения признака патогенности вирусов
гриппа для мышей
8.2. Патогенность для мышей мелкобляшечных
мутантов ортомиксовирусов .
8.3. Изучение корреляции признаков термочувствительности и патогенности ортомиксовирусов. .
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


I клетки заражали вирусом с меченым по тритию РНК, а новосинтезированцую РНК метили радиоактивным фосфором и обе метки выявляли седиментационным и плотностным анализом цитоплазматических и ядерных экстрактов 2 в каждой фракции градиента определяли РНКполимеразцую активность i vi в присутствии АКД. В цитоплазме функционально активные родительские структуры обнаруживались в области нуклеокапсидов . При рецентрифугировании в градиенте хлористого цезия часть этих структур имела плотность 1, гсм3, а другая 1,1, гсм3. В нуклеоплаэме функционально активные структуры через 2 часа после заражения седиментировали в области , и имели такие же плотности, как и цитоплазматические структуры 1,1, гсм3. Предполагается, что к этому времени родительские цуклеокапеиды в нуклеоплаэме деспирализуются и в такой форме вовлекаются в синтез РНК, а именно в транскрипцию. Распределение и свойства родительских структур в разрешающих и неразрешающих клеточных системах были сходными. Следовательно, лимитирующие инфекцию события в асцитных клетках происходят в более поздних стадиях репродукции вируса. Эти данные находят подтверждение в ряде других работ. Так, . РНП проникают в ядра зараженных клеток, где могут оставаться до 7 часов. С, в присутствии 3Нуридина показали, что большая часть меченых родительских РНК и белков, а также вновь синтезированная РНК обнаруживается в нуклеоплаэме. Увеличение температуры инкубации приводило к перемещению в течение мин метки в цитоплазму. РНП, обнаруживаемые в ядре, имели плотность в метризамиде 1,5 гмл, а вирионные и цитоплазматические 1, гмл. Новые доказательства подучила также гетерогенность РНП, формируемых в зараженных клетках. РНП в зараженных клетках. РНП с плавучей плотностью в ренографине 1, гмл имели дефицит к Рбелкам, после обработки глютаральдегидом в градиенте хлористого цезия вели себя сходно с вирионными. РНГ1 же с плотностью в ренографине 1, гмл были обогащены Р белками и выявлялись преимущественно в ядерной фракции в виде самостоятельного пика. В цитоплазме содержание этого класса РНП было ничтожным. Таковы основные результаты исследований транскрипции генома вирусов гриппа, занимавшей центральное место в особенностях их репродукции. Именно они внесли ясность в проблему роли ядра в репродукции ортомиксовирусов, установив, что синтез их иРНК осуществляется в ядрах зараженных клеток. РНК кэп структуры, заимствованной от хозяйской иРНК и внутреннего тА остатка, характерного для РНК, синтезирующихся только в ядре е. РНП структур, содержащих родительские и новосинтезированные РНК Мустафин, Ахматуллина, Ахматуллина, Мустафин, , Букринская и др. Саiii, i , . Транскрипцию генома вируса гриппа принято делить на первичную, катализируемую полимеразой, ассоциированной с вводимым в клетку вирусом, и вторичную, осуществляемую новообразованным ферментом. При первичной транскрипции скорость считывания отдельных генов зависит от их молекулярной массы и общее количество продуцированных транскриптов приблизительно равное е. Вторичная транскрипция носит селективный характер с наибольшей скоростью в клетках куриных фибробластов начинают синтезироваться транскрипты генов ,I, Р2, РЗ и КР белков вируса чумы птиц. Гены ГА, НА и Мбелков транскрибируются значительно позже , , а, в. Такая последовательность накопления отдельных транскриптов коррелирует с появлением соответствующих белков в динамике инфекции. Иными словами, ранние и поздние фазы белкового синтеза коррелируют с ранними и поздними фазами вторичной транскрипции. Сама корреляция указывает, что синтез вирусспецифических белков регулируется на уровне вторичной транскрипции. Но скорость синтеза отдельных транскриптов изменяется и в зависимости от клетки хозяина. Так, в абортивных клетках ь клетки, клетки асцитной оцухоли Эрлиха скорость транскрипции генов НА и Мбелка и соответственно синтез этих белков значительно снижены i е. Надо полагать, что особенности репродукции вирусов гриппа в клетке не ограничиваются транскрипцией их генома. Если подходить строго, особенности репродукции вируса гриппа начинаются не с транскрипции генома, а еще раньше. I. и др. С температурах, при которых другие вирусы животных лишь адсорбируются на них.