Рецепторы эстрогенов в печени крыс и их возможная роль в реализации воздействия эстрадиола на продукцию ангиотензиногена у крыс с различным эндокринным статусом

• Автор: Гонтарь, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.13
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 192 c. : ил

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЩИЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ ЭСТРОГЕНОВ ИХ РЕЦЕПЦИЯ

КЛЕТКАМИ И ОСОБЕННОСТИ ЭФФЕКТОВ ПОЛОВЫХ ГОРМОНОВ

НА ПЕЧЕНЬ Обзор литературы

I. Общие представления о механизме действия

эстрогенов на клеткимишени.

1.Многообразие эффектов эстрогенов на организм млекопитающих

2.Специфические белкирецепторы эстрогенов

а Основные гормонсвязывающие свойства эстрогенных рецепторовII

б Основные физикохимические свойства рецепторов стероидных гормонов

3.Гетерогенность рецепторов стероидных гормонов
4.Транслокация гормонрецепторных комплексов
из цитоплазмы в ядро клетки
5.Активация рецепторов.
6.Природа взаимодействия ГЕК с ядерными структурами.
7 .Представление о рецепторном цикле.
8.Нерастворимые в КС1 ядерные рецепторы
9.Ключевая роль рецепторов в реализации гормональных эффектов.
П. Особенности действия половых гормонов на печень
I.Многообразие эффектов половых стероидов на функции печени
а Половая дифференцировка метаболизма стероидов в печени и влияние на этот процесс половых гормонов
б Влияние половых стероидов на содержание в печени особого эстрогенсвязывающего белка.
в Влияние половых стероидов на уровень транскортина в крови.
г Роль половых стероидов в регуляции обмена липидов и липопротеидов в печени.
д Ангиотензиноген и влияние половых гормонов
на его уровень в крови
2.Роль гипофиза в реализации эффектов половых гормонов на печень.
3.Рецепторы половых стероидов в клетках печени
Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
А. Материалы, буферные растворы и реактивы.
I.Экспериментальные группы животных.
2. Реактивы.
3.Буферные растворы.
Б. Метода
1.Получение цитозоля печени и матки крыс
2.Получение форм I и П эстрогенсвязывающих
белков печени.
3.Получение ядер печени и матки.
4.Определение связывания эстрадиола с эстрогенными рецепторами.
а Инкубация проб с гормоном
б Разделение свободной и связанной форм гормона методом адсорбции на декстранпокрытом угле
в Расчет параметров специфического связывания
5.Исследование транслокации ГРК в ядра в бесклеточной системе
6.Количественное определение ЭР в цитозоле и ядрах клеток печени И матки после введения Е животным
с различным эндокринным статусом организма
а Определение специфически связывающих Е участков в ядрах клеток
б Определение специфически связывающих Е
участков в цитозоле.
в Способы выражения концентрации рецепторов.
7.Определение ангиотензиногена в плазме крови крыс
8.0цределение радиоактивности в пробах.
9.Определение белка и ДНК
.Статистическая обработка результатов
Глава Ш. ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ РЕЦЕПЦИИ ЭСТРОГЕНОВ
КЛЕТКАМИ ПЕЧЕНИ
1.Изучение транслокации в клеточные ядра комплексов i с формами I и П ЭСБ печени крыс в бесклеточной системе.
2.Изучение закономерностей рецепции в печени после введения Е2 i viv
3.Уровень эстрогенных рецепторов у животных с различным эндокринным статусом
Глава 1У.ВЛИЯНИЕ ЭСТРАШОЛА НА УРОВЕНЬ АНГИОТЕНЗИНОГЕНА
В КРОВИ КРЫС И ВОЗМОЖНАЯ РОЛЬ ЭСТРОГЕННЫХ РЕЦЕПТОРОВ
ПЕЧЕНИ В РЕАЛИЗАЦИИ ЭТОГО ЭФФЕКТА.
I.Закономерности влияния эстрадаола на уровень и динамику ангиотензиногена в плазме крови крыс.
2.Влияние эстрогенов и андрогенов на уровень АГ
у самок и самцов крыс
3.Сравнительный анализ уровня и динамики эстрогенных рецепторов печени и уровня и динамики ангиотензиногена в плазме крови при различных эндокринных воздействиях
ЗАКЛЮЧЕН ИЕ .
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В настоящее время еще не получено прямых доказательств существования функциональной полиморфности рецепторных белков, однако многие факты могут служить косвенным подтверждением этой гипотезы. Сильным аргументом в пользу представления о физиологическом значении полиморфизма рецепторов определенной группы стероидных гормонов является факт раздельной регулируемости состава популяции стероидсвязывающих белков i . I7. Так, в эндометрии человека обнаружено два типа ЭР один с высоким сродством к эстрону, другой с высоким сродством к эстрадиолу и низким к эстрону. Их соотношение меняется во время менструального цикла и коррелирует с содержанием прогестерона в крови i . Транслокация гормонрецепторных комплексов из цитоплазмы в ядро клетки. Так как, согласно современным представлениям, основным местом действия стероидных горюнов является ядро компетентной клетки, вопросы, касающиеся переноса горюнов в ядро, являются одними из центральных в изучении механизма действия стероидных гормонов. Как известно, стероиды, в частности эстрогены, в отличие от белковых гормонов и катехоламинов, относительно свободно путем диффузии проникают в клетку ,,. Что происходит с ними в дальнейшей Ответ наэтот вопрос дает предложенная Дженсеном . Согласно этой модели, горюн, попадая в клетку, комплексируется с цитоплазматическим рецепторным белком, индуцируя его
структурные перестройки, в результате которых гормонрецепторный комплекс ГРК цриобретает повышенное сродство к компонентам клеточного ядра активируется. При этом активация является процессом, зависимым от температуры. После активации ГРК транслоцируются в ядро, где связываются с хроматином и увеличивают синтез иили цроцессинг РНК, включающихся в синтез функциональных или секретируемых белков . I2,. В настоящее время накоплено большое количество фактов, которые можно отнести к числу доказательств цредложенной Дженсеном модели В. Б.Розен, А. Н.Смирнов,Апйегзоп . I3 v . I6,I8i,I3. Активация рецепторов. Рецепторной активацией называют цроцесс гормониндуцируемой, температурнозависимой трансформации нативного рецептора, в результате которой он превращается в биохимически функциональную ядерную форму I8. Ранние исследования показали, что для активации необходима повышенная в физиологических пределах температура . I2i . При дальнейшем исследовании процесса активации в экспериментах i vi обнаружилось, что эффект, подобный температуре, на рецепторы оказывают и другие воздействия осаждение сульфатом аммония Н. А.Романова с соавт. М Ю. М.Селезнев с соавт. IIX . I2, повышенной ,5 i, i . Д4 разведение препарата цитозольных белков М. Х.Рукайя,бо1 . I7 диализ и гельфильтрация цитозоля М. Х.Рукайя,Саке ,I6 . Таким образом, разные по природе факторы вызывают один и тот же конечный результат активацию рецепторов. Можно цредположить, что механизмы активирующего действия этих факторов близки. Наиболее убедительным объяснением совокупности полученных фактов является цредположение о существовании низкомолекулярного ингибитора активации . I6i ,I7 . Согласно этой гипотезе, неактивированные рецепторы находятся в комплексе с неким низкомолекулярным ингибитором, который мешает их цревращению в активированную форму. Связывание с гормоном, повышенная температура, высокая ионная сила среды, разведение ускоряют диссоциацию ингибитора из комплекса с рецептором, а диализ и гельфильтрация отделяют его от рецептора, превращая, таким образом, неактивированный рецептор в активированную форму. Подтверждением единого механизма активации служит отсутствие прироста активированных рецепторов после инкубации преактивированных диализом рецепторов при повышенной температуре . Поскольку при использовании некоторых из вышеперечисленных факторов происходит активация рецепторов, не связанных с гормоном, можно допустить, что это связывание не является необходимым условием активации . Было показано, что активированная форт ЭР связывает более прочно, чем нативная. Это проявляется в значительном уменьшении константы скорости диссоциации ЭРК и в повышении их устойчивости i .