Разработка питательных сред на основе сырья растительного происхождения для культивирования возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы

• Автор: Курилова, Анна Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Ставрополь
• Количество страниц: 149 с.

1.1 Характеристика ферментов поджелудочной железы.

1.2 Питательные потребности изучаемых микробов

1.2.1 Питательные потребности чумного микроба.

1.2.2 Питательные потребности холерного вибриона

1.2.3 Культивирование и питательные потребности сибиреязвенного микроба и спорообразующих сапрофитов

Собственные исследования

Глава 2 Материалы и методы исследования.

2.1 Материалы исследования

2.1.1 Штаммы микроорганизмов

2.1.2 Реактивы, сырье.

2.1.3 Лабораторное оборудование.

2.1.4 Питательные основы и питательные среды
2.2 Характеристика используемого сырья
2.2.1 Картофель свежий продовольственный ГОСТ Р 8
2.2.2 Свекла столовая свежая ГОСТ Р 1.
2.2.3 Морковь столовая свежая ГОСТ
2.2.4 Капуста белокочанная свежая ГОСТ Р 9
2.2.5 Солод пивоваренный ячменный ГОСТ 4.
2.2.6 Соя, бобы ГОСТ 9.
2.2.7 Соевое молоко ТУ 5.
2.2.8 Меласса свекловичная ГОСТ Р 4
2.3 Методы приготовления питательных сред.
2.4 Методы исследования.
2.4.1 Методы физикохимического контроля питательных основ и сред.
2.4.2 Методы биологического контроля питательных основ и сред.
2.4.3 Методы статистической обработки полученных результатов.
Глава 3 Получение различными способами питательных основ микробиологических сред из сырья растительного происхождения, сравнительная характеристика их физикохимических свойств и аминокислотного состава.
3.1 Методы приготовления питательных основ микробиологических
3.1.1 Получение ферментативных основ микробиологических сред
3.1.2 Получение кислотных основ микробиологических сред
3.1.3 Получение щелочных основ микробиологических сред
3.2 Изучение свойств экспериментальных питательных основ микробиологических сред из сырья растительного происхождения
3.2.1 Характеристика физикохимических свойств экспериментальных основ микробиологических питательных сред.
3.2.2. Изучение аминокислотного состава экспериментальных основ микробиологических питательных сред.
Глава 4 Применение экспериментальных питательных основ в составе микробиологических сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской ЯЗВЫ
4.1 Принцип получения микробиологических питательных сред на растительных гидролизных основах
4.2 Изучение качества питательных сред
4.2.1 Физикохимические показатели питательных сред.
4.2.2 Определение биологических показателей жидких сред.
4.2.3 Определение биологических показателей плотных сред
4.2.4 Оценка качества соевых сред по пигменто и индолообразова
нию тестштаммов
4.2.5 Биохимические свойства чумного микроба, выращенного на питательных средах из ферментативных соевых гидролизатов
4.2.6 Изучение стабильности сохранения основных свойств чумного
и холерного микробов в процессе длительного хранения на соевой питательной среде.
Глава 5 Изучение возможности применения питательных сред на основе мелассе свекловичной патоке рафинадной для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы
5.1 Методика приготовления микробиологических питательных сред
на основе мелассе свекловичной патоке рафинадной
5.2 Изучение ростообеспечивающей способности основы мелассы свекловичной на примере сибиреязвенных и сапрофитных бацилл.
5.3 Сравнительная характеристика физикохимических свойств основы мелассы свекловичной патоки рафинадной и основы мелассы свекловичной патоки рафинадной, обогащенной дрожжевым экстрактом.
5.4 Изучение аминокислотного состава мелассовых основ.
5.5 Получение питательных сред на основе мелассы свекловичной патоки рафинадной для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы
5.5.1 Приготовление питательных сред на основе мелассы свекловичной для культивирования холерного вибриона.
5.5.2 Приготовление питательных сред на основе мелассы свекловичной для культивирования сибиреязвенного микроба и близкородственных ему сапрофитов.
5.5.3 Изучение пригодности питательной среды на основе мелассы свекловичной для восстановления утраченных фенотипических признаков чумного микроба.
5.5.4 Изучение стабильности сохранения основных свойств чумного и холерного микроорганизмов в. процессе длительного хранения на
мелассовых питательных средах в лабораторных условиях
Заключение
Выводы
I фактические рекомендации
Список использованной литературы


V групп патогенности и лаборатории биологического и технологического контроля ФГУЗ СтавИПЧИ Роспотребнадзора от г. Коллекция патогенных микроорганизмов ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора от г Плотная среда на основе ФГС пригодна для получения капсульной формы сибиреязвенного микроба акт испытаний в научнопроизводственной лаборатории препаратов для диагностики особо опасных и других инфекций от г По культуральным свойствам разработанные питательные среды не уступают коммерческим аналогам, приготовленным на ферментативной основе говяжьего мяса бульону Хоттингера и агару Хоттингера, при этом среды на соевых и картофельных основах в 3,5 раза, а на мелассовых основах в 5 раз выгоднее экономически. Методики приготовления и рецептура сконструированных питательных сред изложены в 6 методических документах Методических рекомендациях по использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов сои бобов и соевого молока для культивирования чумного микроба протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ 4 от апреля г. Ученого совета СтавНИПЧИ от декабря г. Методических рекомендациях по приготовлению и использованию питательной среды жидкой для культивирования холерного вибриона на основе патоки рафинадной протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ 3 от марта г. Методических рекомендациях по технологии приготовления агаровой питательной среды для культивирования микроорганизмов рода i протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ 5 от мая г. Методических рекомендациях по приготовлению и использованию жидких и плотных питательных сред на основе ферментативного гидролизата картофеля для культивирования чумного микроба протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ 4 от мая г. Методических рекомендациях по приготовлению и использованию плотной питательной среды на основе ферментативного гидролизата картофеля для культивирования холерного вибриона протокол заседания Ученого совета СтавНИПЧИ 5 от 7 июня г г. ФГУЗ СтавНИПЧИ Роспотребнадзора после согласования на федеральном уровне 2 нормативных документа ТУ 2 на Питательный бульон для культивирования микроорганизмов, готовый к применению Бульон Хоттингера и ТУ 4 на Питательный агар для культивирования микроорганизмов, готовый к применению Агар Хоттингера, а также Инструкции по применению этих сред, постоянно используемых в ходе проведения исследований в качестве контрольных. Основные положения, выносимые на защиту. Питательные основы из растительного сырья пригодны для использования в составе питательных сред для культивирования возбудителей чумы, холеры и сибирской язвы. Штаммы возбудителей чумы и холеры при культивировании и длительном хранении на соевых питательных средах стабильно сохраняют свои культуральноморфологические свойства в течение месяцев срок наблюдения. Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на VI Межгосударственной научнопрактической конференции государсгвучастников СНГ Санитарная охрана территорий государствучастников содружества независимых государств проблемы биологической безопасности и противодействия биотерроризму в современных условиях, г. VII Международной конференции Циклы природы и общества, г. Естествознание и гуманизм в честь 0летия со дня рождения Г. Н. Потанина, г. Опыт работы органов и учреждений Роспотребнадзора в Ставропольском крае по обеспечению саиэпидблагополучия и защите прав потребителей, 9я и я Ежегодные Недели медицины Ставрополья, и г. Втором съезде военных врачей медикопрофилактического профиля вооруженных сил Российской Федерации Современные проблемы военной профилактической медицины, пути их решения и перспективы развития, г. СанктПетербург, г. Современные аспекты эпидемиологического надзора за особо опасными инфекционными заболеваниями на Юге России, г. Публикации. По теме диссертации опубликована научная работа, в том числе 1 в издании, включенном в перечень ведущих рецензируемых научных журналов, утвержденных ВАК Министерства образования и науки России и рекомендованных для публикации основных научных материалов диссертации на соискание искомой ученой степени, получено в соавторстве 4 патента РФ на изобретение.