Факторы и условия, влияющие на адгезивную активность Candida albicans в системах с буккальными эпителиоцитами

• Автор: Махрова, Татьяна Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 96 с. : 36 ил.

Содержание
Введение

Г лава 1 .Обзор литературы

1.1. Кандиды: экология, морфо-функциональные особенности

и факторы патогенности

2.1. Реактивность буккальных эпителиоцитов

Глава 2. Материалы и методы исследований

Глава 3. Собственные исследования

1. Общая характеристика адгезивной активности Candida albicans

1.1. Стандартизация тест-системы

1.2. Сравнение спектра адгезивных реакций С. albicans, полученных из разных экологических ниш (свежевыделенные штаммы)
1.3. Сравнение адгезивной,активности музейных и свежевыде-
ленных штаммов C.albicans
1.4. Выбор времени инкубации буккальных эпителиоцитов с
C.albicans
1.5. Сравнение адгезивной активности живых и убитых С. albicans
1.6. Оценка прочности адгезивных контактов между C.albicans и буккальными эпителиоцитами
1.7. Показатели естественной и искусственной колонизации буккального эпителия у взрослых и детей
2. Изучение метаболической и цитоскелетной активности буккальных эпителиоцитов.
2.1. Влияние температуры на адгезивную активность C.albicans
2.2. Влияние блокады гликолиза
2.3. Влияние колхицина и цитохалазина В
2.3.1. Влияние колхицина
2.3.2. Влияние цитохалазина В
2.3.3. Влияние обработки С. albicans колхицином и цитохалазином В
2.4. Влияние циклогексимида (ингибитор синтеза белка)
3. Влияние препарата «Кодивак» на адгезивную активность С. albicans
4. Влияние продуктов стафилококков на адгезивные реакции в системе
«C.albicans - буккальные эпителиоциты»
4.1.5* aureus
4.1.1. Влияние смеси метаболитов S. aureus на адгезивную активность С. albicans
4.1.2. Влияние метаболитов различных штаммов S. aureus на адгезивную активность С. albicans
4.2. Изучение механизма снижения адгезивных свойств С. albicans
золотистым стафилококком
4.3. S.epidermidis
4.4. Влияние метаболитов стафилококков на адгезивный потенциал буккальных эпителиоцитов
5. Влияние продуктов нейтрофилов на взаимодействие С. albicans
с эпителиальными клетками
6. Влияние сывороточных факторов на адгезивную активность C.albicans
6.1. Стандартизация тест-системы
6.2. Влияние антител
6.3.Антиадгезивные факторы, не имеющие отношения к антителам
6.4. Влияние комплемента на адгезивную активность С. albicans
7. Влияние секрета ротовой полости на адгезивные реакции в системе С. albicans - буккальные эпителиоциты
7.1. Цельная слюна
7.2. Значение антител
7.3. Влияние муцина на адгезивную активность С. albicans в системе с буккальными эпителиоцитами
Заключение
Выводы
Список литературы

Введение
Последние годы ознаменовались заметным повышением интереса к эпителию слизистых оболочек. Это связано с признанием координирующей позиции мукозального эпителия в реакциях, обеспечивающих взаимодействие механизмов врожденного (неспецифического) и специфического иммунитета, для инициации и стабилизации воспалительных процессов слизистых оболочек [88, 95, 102, 113, 126, 142, 146, 172, 174]. Мукозальные эпителиоциты обладают значительным эффекторным потенциалом в реакциях воспаления и иммунитета, реализуя его в ответ на стимулирующие воздействия как эндогенной (цитокины и пр.) так и экзогенной природы, в частности в системе с микроорганизмами [25, 40, 74, 120, 126, 142, 148,168, 192].
Отсюда, несомненный интерес вызывает изучение взаимоотношений между эпителиоцитами и такими патогенами как кандиды, поскольку полагают, что кандидоз является результатом нарушения баланса между механизмами клиренса в системе мукозального эпителия и, условиями, обеспечивающими активное размножение и персистенцию грибов на слизистых оболочках [39]. Актуальность данной темы сопряжена еще и с тем, что в настоящее время отмечается рост кандидозных оппортунистических инфекций [20] среди населения, при этом основным патогеном является Candida albicans [39, 59].
Адгезия С. albicans на эпителиоцитах является первым и обязательным этапом развития кандидоза. При этом, на реализацию адгезивного потенциала в системе "кандиды - эпителиоциты " могут оказывать влияние многие факторы, как со стороны кандид, так и со стороны организма хозяина. К последним, в частности, принадлежат секреторные продукты ротовой полости (антитела, гуморальные факторы, продуцируемые эпителиальными клетками).
Известно, что выход кандид за пределы очага первичной колонизации сопровождается выраженным воспалительным процессом, в развитие кото-

2.3. Оценка адгезии в системе «С.albicans- буккальные эпителиоциты»
Равные объемы (по 0,5 мл) взвеси эпителиоцитов и кандид инкубировали в течение 30 мин при 37°С в растворе Хенкса без фенолового красного, встряхивая каждые 5 мин. Эпителиоциты трехкратно отмывали ЗФР от не прикрепившихся кандид (40g, 5 мин).
Из осадка клеток готовили мазок, который после фиксации этанол-эфирной смесью окрашивали 0,25% раствором азура А. Определяли индекс адгезии, т.е. среднее количество кандид в пересчете на один эпителиоцит (учитывали 100 клеток) (рис. 1).
Обычной концентрацией была дозировка 107 кандид/мл, которая в опытах со штаммом 601 давала максимальные показатели адгезии и требовала меньшее количество отмывок для получения препаратов свободных от не прикрепившихся к эпителиоцитам кандид (рис. 2).
Рис. 1. Адгезия кандид (С. albicans 601) на буккальных эпителиоцитах.
Увеличение х 630.