Протеолитическая активность возбудителя сибирской язвы

• Автор: Шевченко, Оксана Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 99 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Современные представления о молекулярных основах патогенности возбудителя сибирской язвы

1.1. Факторы вирулентности В. аМкгаш, кодируемые генами плазмидной локализации

1.2. Факторы вирулентности, кодируемые хромосомой сибиреязвенного

микроба

Глава 2. Значение протеолитических ферментов в вирулентности микроорганизмов

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3. Материалы и методы

3.1. Штаммы бактерий, питательные среды

3.2. Тестирование протеолитичсской активности штаммов В. амНгасЬ

3.3. Методы, использованные при изучении Срг мутантов В. аыНгаш
3.4. Статистическая обработка данных
Глава 4. Разработка сред для определения протеолитичсской, гемолитической активности, пигментсинтеза и пигментсорбции возбудителя сибирской язвы
4.1. Среда для определения протеолитичсской активности и способности к синтезу желтого диффузного пигмента возбудителем сибирской язвы
4.2. Среда для регистрации гемолитической активности В. апВггаш
4.3. Среда для детекции пигментсорбции возбудителя сибирской язвы
Глава 5. Изучение популяционной изменчивости сибиреязвенного микроба но протеолитичсской активности и другим признакам, кодируемым генами хромосомной локализации
5.1. Выделение и характеристика спонтанных мутантов В. аШкгаш с изменением протеолитической активности
5.2. Корреляционная взаимосвязь между изменением уровня протеолитической активности и выражением гемолитической активности, пигментсинтсза, пигментсорбции и спорообразования
5.3. Влияние собственных плазмид возбудителя сибирской язвы рХ и рХ на частоту образования спонтанных мутантов с измененной способностью к деградации казеина
5.4. Вирулентность спонтанных мутантов В. апаск9 характеризующихся изменением ассоциированного комплекса признаков протеолитической, гемолитической активности, пигмснтсинтеза, пигментсорбции и спорообразования
Глава 6. Изучение внеклеточных протеаз спонтанных мутантов В. апМгасм с
измененной способностью к деградации белковых субстратов
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ


Глава 1. Факторы вирулентности В. Глава 2. Глава 3. Тестирование протеолитичсской активности штаммов В. Методы, использованные при изучении Срг мутантов В. Глава 4. Среда для регистрации гемолитической активности В. Глава 5. Выделение и характеристика спонтанных мутантов В. Вирулентность спонтанных мутантов В. Глава 6. Изучение внеклеточных протеаз спонтанных мутантов В. САМ таксономическая группа бактерий, включающая В. В. i, В. Т номенклатурное обозначение штаммов В. В i номенклатурное обозначение штаммов В. Обозначения хромосомных маркеров даны по В. К. плазмидных по М. М. . Актуальность проблемы. Возбудитель сибирской язвы, i i, впервые обнаруженный Р. Кохом в г. Эпидемические и эпизоотологические проявления этой инфекции имеют большое социальное и экономическое значение. По данным ВОЗ случаи заболевания сибирской язвой крупного и мелкого рогатого скота официально зарегистрированы в 8 странах x . При этом, остается достаточно высоким уровень заболеваемости людей на энзоотичных территориях. Только в Российской Федерации за г. Здоровье населения . Определенные успехи, достигнутые в профилактике и диагностике инфекционных болезней свидетельствуют о том, что эти вопросы не могут быть решены без глубокого изучения основ жизнедеятельности микроорганизмов, механизмов, обеспечивающих реализацию их патогенных и иммуногенных свойств. На сегодняшний день принято считать, что вирулентность В. Структурные и регуляторные гены синтеза этих детерминантов находятся в составе двух высокомолекулярных плазмид X и рХ i Р. I. , , , . Между тем, имеется ряд фактов, не укладывающихся в рамки существующих представлений о природе вирулентности В. Так, штаммы близкородственных видов таксономической группы САМ, унаследовавшие в результате трансдукционной передачи плазмиду рХ из высоковирулентного штамма В. КМ, не повышали вирулентность для лабораторных животных. Кроме того, были обнаружены штаммы В. Степанов с соавт. Очевидно, что подобные факты обусловлены наличием детерминантов, кодируемых генами хромосомной локализации. В настоящее время охарактеризованы внеклеточные и поверхностные протеазы целого ряда микроорганизмов , , ii . I i, i, i i, i i, Vii . Бактериальные протеазы выделяют как дополнительные факторы вирулентности, участвующие в патогенезе инфекционного заболевания несколькими возможными механизмами 1 повреждением тканей хозяина путем лизиса поверхностных клеточных белков, 2 деструкцией тканей через активацию комплекса металлопротеаз или других систем протеазного каскада, 3 инактивацией ключевых белков, важных в защите макрооргаиизма, 4 активацией собственных бактериальных факторов вирулентности В . М., i . Несмотря на то, что протеолитические ферменты многих видов i изучены достаточно хорошо i , i . В. i крайне ограничена, хотя о наличие протеолитической активности у возбудителя сибирской язвы известно давно Цыганкова О. И., Буравцева Н. П., . Все вышеизложенное свидетельствует об актуальности исследований, направленных на изучение признака протеолитической активности В. Цель работы комплексное исследование признака протеолитической активности возбудителя сибирской язвы, изучение харакгера популяционной изменчивости и взаимосвязи с другими характеристиками В. Разработать питательную среду для определения протеолитической активности В. Изучить характер популяционной изменчивости В.