Применение полимеразной цепной реакции для диагностики и оценки эффективности химиотерапии туберкулеза

• Автор: Александров, Андрей Александрович
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 94 с. : 6 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Ограни ца

Перечень условных обозначений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Микробиологическая диагностика туберкулеза

1.2. Применение молекулярно генетических методов в лабораторной диагностике туберкулеза

1.3. Методы видовой идентификации микобактерий

1.4. Применение молекулярногентических методов в оценке эффективности проводимой химиотерапии

Глава 2. Материалы и методы

2.1 .Структура работы и характеристика больных

2.2.Реагенты и основное лабораторное оборудование
2.3.Штаммы микобактерий
2.4.Описание методов и статистический анализ результатов
Глава 3.Диагностическая эффективность ПЦРанализа
у больных туберкулезом легких
Глава 4. Применение ПЦРанализа для оценки эффективности
химиотерапии туберкулеза легких
Глава 5. Применение ПЦР анализа для видовой идентификации
микобактерий
Заключение
Выводы
Список литературы


Традиционные микробиологические методы видовой идентификации являются длительными в исполнении, трудоемкими, требуют наличия специализированного дорогостоящего оборудования. Нередко результаты такой идентификации базируются на субъективных оценках. Широко используемые за рубежом, современные высокоспецифичные и надежные молекулярно генетические методы видовой идентификации микобактерий, к сожалению, еще не заняли своего достойного места в отечественных практических лабораториях. На протяжении последних нескольких лет в зарубежной печати появились сообщения об успешном применении молекулярно генетических методов для видовой идентификации микобактерий, входящих в комплекс М. Кроме решения ряда практических вопросов лечение, эпидемиология, дальнейшее изучение межвидовых различий среди представителей комплекса МБТ сможет пролить свет на эволюционное развитие возбудителя туберкулеза 1. Изучить эффективность ПЦРанализа в качестве метода оценки результативности проводимого лечения у больных туберкулезом. Изучить возможности применения ПЦРанализа для видовой идентификации микобактерий. Продемонстрирована эффективность применения нового, основанного на иммуномагнитной сепарации, метода пробоподготовки диагностических материалов мокроты для определения МБТ с помощью ПЦР. При использовании ПЦРанализа в процессе динамического наблюдения за эффективностью специфической химиотерапии, показана четкая корреляция прекращения бактериовыделения, тестируемого методом ПЦР, и клиникорентгенологическими признаками эффективного лечения туберкулеза легких. I.Исследование образцов мокроты для обнаружения МБТ методом ПЦР обладает высокой диагностической эффективностью чувствительность анализа для впервые диагностированных пациентов , специфичность ,4, диагностическая эффективность метода ,3. Метод ПЦРанализа при исследовании мокроты или промывных вод бронхов может служить достаточно надежным критерием слежения за эффективностью лечения больных туберкулезом легких. Методы на основе ПЦР и ПЦРрестрикционного анализа могут быть использованы для видовой идентификации микобактерий. Обоснование высокой эффективности применения ПЦРанализа для выявления МБТ в диагностических материалах позволит ускорить внедрение этого метода в клиническую практику фтизиатрических учреждений с целью своевременной диагностики и контроля лечения, больных туберкулезом легких. Возможности молекулярногенетической идентификации микобактерий штамма БЦЖ, показанные в настоящей работе, открывают перспективу практического применения этого метода в исследовании материалов, полученных при поствакцинальных осложнениях. Материалы работы внедрены в практику клиники фтизиопульмонологии ММА им. И. М. Сеченова. Материалы диссертации используются при чтении цикла лекций на курсах усовершенствования врачей клиникодиагностических лабораторий на кафедре иммунологии РМАПО и в семинарских занятиях для аспирантов и ординаторов НИИ и клиники фтизиопульмонологии. Практические рекомендации. Полученные результаты работы отражены в приказе Минздрава РФ 9 от г. О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации, в котором отмечено, что допускается применение ПЦРанализа для ускоренной идентификации микобактерий туберкулезного комплекса и для их обнаружения в мокроте и промывных водах бронхов. Генодиагностика инфекционных заболеваний , международной конференции Туберкулез старая проблема в новом тысячелетии , 7ом Российском съезде фтизиатров , конференции молодых ученых НИИ Фтизиопульмонологоии ММА им. И. М. Сеченова . По теме исследования имеется печатных работ. Апробация диссертации состоялась . НИИ фтизиоггульмонологии ММА им. И.М. Сеченова. Структура и объем диссертации Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 2 страницах машинописного текста, иллюстрирована 7 рисунками и 6 таблицами. Список литературы содержит отечественных и 9 зарубежных источников.