Биомасса микроорганизмов Al-Fe-гумусовых подзолов Кольского полуострова в условиях промышленного загрязнения

• Автор: Паникова, Анна Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 151 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение 1

Глава 1. Методы определения численности и биомассы микроорганизмов в

почве. 3

1.1. Отбор образцов почвы для изучения численности и активности

микроорганизмов. 4

1.2. Количественные методы учета 8

1.2.1. Метод посева. 8

1.2.2. Прямые микроскопические методы. 9

1.2.2.1. Использование красителей и для дифференцированного учета живых и мертвых

клеток
1.2.2.2. Микроаигорадиография
1.2.2.3. Использование солей тетразолия
1.2.2.4. Ингибирование деления.
1.2.2.5. Проращивание спор и мицелия грибов
1.2.3. Биохимические методы.
Глава 2. Содержание микробной биомассы как показатель жологичсского
состояния почв
Глава 3. Краткая характеристика района
3.1 Рельеф.
3.2 Климат.
3.3 Растительность..
3.3.1. Еловые леса..
3.3.2. Сосновые леса
3.4. Характеристика почв лесных биогеоценозов Севера
3.5. Воздушное промышленное загрязнение.
3.5.1. Роль атмосферных выпадений в формировании свойств
лесных почв.
3.6. Состояние лесных биогеоценозов.
3.6.1 Еловые леса.
3.6.2 Сосновые леса.
Глава 4. Объекты и методы.
4.1 Объекты исследования.
4.2. Методика подготовки образцов почвы к микробиологическому
анализу.
Глава 5. Микроорганизмы Агумусовых подзолов сосняков
лишайниковых в условиях азротехногенного
загрязнения.
Глава 6. Особенности распространения микроорганизмов в 1
гумусовых подзолах северотаежных еловых лесов природные и техногенные аспекты. 0
Заключение 7
Выводы 3
Литература


Чаще всего исследуется определенная таксономическая группировка или Функциональный процесс, причем обычно анализ сам по себе ведет к нарушению или разрушению природной микроэкосистемы. Методы определения и учета бактерий и грибов, используемые в почвенной микробиологии можно разделить на четыре типа метод пссева. Однако основная его ценность в том, что он дает возможность выделять чистые культуры микроорганизмов, а использование сред различного состава позволяет вести дифференцированный учет микроорганизмов с различными пищевыми потребностями. Прямые микроскопические методы позволяют определять общее количество различных групп микроорганизмов обитающих в почве, дают более точную информацию о численности и биомассе, но не способны различать видовой состав исследуемых микроорганизмов, что и отличает их от метода посева. Хотя появление методов иммунофлуоресценции позволяет до известной степени снять эти ограничения, но они связаны с чрезвычайно трудоемкими операциями для каждой группы родственных популяций, каковых в почве может содержаться десятки или даже сотни Для количественного определения биомассы почвенных бактерий используют различные прямые микроскопические методы, каждый из которых включает несколько этапов 1 диспергирование почвы, 2 приготовление препаратов для микроскопии. Методы прямой микроскопии включают светлое поле, темное поле, фазовый контраст, отраженную, поляризованную, флуоресцентную, дифференциальную интерференцию. Для того чтобы отделить живые клетки от твердой фазы, используют разнообразные методы предварительной подготовки встряхивание, ультразвуковую обработку растирание, изменение ионной силы и раствора, обработку поверхностноактивными агентами ПАВ Звягинцев, , . Что касается, использования в микробиологии специальных счетных камер Горяева. и Не1Ьегидр. i . Поэтому во избежание ошибок в результате неравномерности распределения почвенной суспензии необходимо правильно выбрать способ сканирования препарата. При использовании агаровых пленок, по Джонсу и Моллисону, достигается более равномерное нанесение почвенной суспензии, в то же время, значительная толщина пленки мкм приводит к ошибке при учете клеток на Мирчинк, Паников, . Несмотря на то, что большинство методов микроскопии связано с применением красителей, изучение бактерий, актиномицетов, грибов, простейших и нематод в естественных почвенных образцах может проводиться и без окрашивания с помощью цветной инфракрасной микрофотосъемки, отраженной и отраженно поляризованной световой микроскопии, фазового контраста с переменной амплитудой i. При светлопольной микроскопии мембранные фильтры обычно окрашивают эритрозином, анилиновым голубым и другими красителями и исследуют микроскопией светового поля , , . i, . При использовании мембранных фильтров основным источником ошибки является экранирование клеток почвенными частицами. Если разрешающая способность для оптической микроскопии обычно 0, мкм , , , то для сканирующей электронной микроскопии, трансмиссионной электронной микроскопии и других видов электронной микроскопии разрешение на несколько порядков выше, что позволяет обнаружить бактерии с размером менее 0. . Не всегда обнаруженные клетки являются живыми, хотя в ряде работ показана хорошая сходимость численности бактерий, полученной в сзетовой и электронной прямой микроскопией , . . i. Использование флуоресцентной микроскопии в проходящем и. Этот вид микроскопии применяется для определения первичной флуоресценции автофлуоресценции клеток, исследования вторичной флуоресценции после окрашивания флуорохромами . , или меченными ферментами лизоцим меченный родамином i, i, . Ограничения всех этих методик связаны с собственной флуоресценцией минералов и органического вещества в природных средах, хотя правильно подобранные красители и время окрашивания снимают эти ограничения. Автофлуоресценция успешно используется при изучении эукариотных микроводорослей Домрачева и др.