Использование люминесцирующих микроорганизмов для биотестирования минеральных вод

• Автор: Алешина, Елена Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Оренбург
• Количество страниц: 182 с. : ил.

Содержание
Введение.

Глава 1 Обзор литературы

1.1 Лгаминесцирующие бактерии систематика, экология,

молекулярногенетическая характеристика

1.2 Прикладные аспекты использования бактериальной

биолюминесценции.

Глава 2 Материалы и методы исследований

2.1 Используемые биолюминесцентные системы.

2.1.1 Природный и рекомбинантный люмипссцируюише

бактериальные биосенсоры

2.1.2 Ферментная система генерации свечения
2.2 Исследованные минеральные воды.
2.2.1 Общая характеристика минеральных вод.
2.2.2 Методы исследования ионного состава минеральных вод
2.3 Методы биолюминссцснтного биотестирования.
2.3.1 Биотестирование с использованием бактериального
биосенсора Микробиосснсор В 7б
2.3.2 Биотестирование с использованием бактериального
биосенсора Эколюм9
2.3.3 Исследование с использованием комплекта реактивов для биолюминесцентного анализа КРАБ
2.3.4 Регистрация биолюминесценции используемых
бактериальных биосенсоров и ферментной системы генерации свечения.
2.3.5 Обработка, оценка и оформление результатов.
2.4 Дополнительные методы исследования.
2.5 Методы статистической обработки результатов и
математического моделирования
Глава 3 Исследование биотоксичности бугилированных
минеральных вод с использованием традиционных методов
биолюминесцентного анализа
Глава 4 Экспериментальное изучение влияния основных, входящих в состав минеральных вод, катионов и анионов на уровень свечения люминесцирующих микроорганизмов и ферментной системы генерации свечения
4.1 Исследование эффектов катионов К, , 2 или Са2 на бактериальную биолюминесценцию i viv и i vi
4.2 Изучение влияния галогенидов, сульфатов, гидрокарбонатов и карбонатов на биолюминесценцию i vi и i viv.
Глава 5 Разработка подходов к адаптации биолюминесцентного анализа для оценки биотоксичности минеральных вод
5.1 Идентификация причин, определяющих эффекты
минеральных вод в отношении люминесцирующих бактериальных биосепсоров
5.2 Адаптация биолюминесцентного анализа для оценки биотоксичности минеральных вод.
Заключение.
Выводы.
Список использованной литературы


Так комплексное филогенетическое исследование бактерийсимбионтов из световых органов глубоководных рыб, проведенное на основе анализа нуклеотидных последовательностей генов , и x, свидетельствовало об их существенной обособленности от классических представителей вида Р. Р. iiii . Возможно, подобные наблюдения являются первыми шагами на пути дальнейшего уточнения и расширения спектра видов, составляющих рассмотренный род. В г. Флоренции во время эпидемии холеры итальянский врач ii ii, изучая образцы слизистой оболочки кишечника погибших от холеры людей под микроскопом, описал присутствие в них изогнутых палочек вероятных возбудителей холеры Vii . Чистая же культура данного микроорганизма впервые была выделена тридцатью годами позже во время эпидемии холеры в Индии, когда . описал V. Люминесцирующий же микроорганизм был выделен из пресной воды и описан как один из разновидностей холерного вибриона V. I i, особенностью которого были низкая потребность в ионах , содержание С пар на уровне мол ,8 , а также чрезвычайно высокий уровень до 0 гомологии при ДНКДНК гибридизации с типовым штаммом V. Дальнейшее изучение особенностей биологии и экологии рода Vii заставило признать его чрезвычайно высокое разнообразие, включающее большое количество видов, широко распространенных в морской среде и устьях рек, на поверхности морских животных и в их кишечнике, являющихся патогенами морских позвоночных и беспозвоночных, а также человека. Так, Vii vi имеет прямое отношение к видимому в ночное время суток свечению моря, с XVII века описываемого мореплавателями как i ,. V.vi, находящимися в ассоциации с микроводорослями i ,. Кроме того, в настоящее время, что V. При этом для V. Наиболее же типичным является его этиологическая роль при так называемом люминесцентном вибриозе, являющемся ведущей причиной смертности среди разводимых в аквакультуре популяций креветки . В отличие от V. Vii ii ,. К тому же V. i и короткохвостых кальмаров семейства ii Еиргутпа Гавайские острова, США , Еиргутпа i Австралия и Еиргутпа i западное побережье Тихого океана. Некоторые кальмары могут регулировать излучение света путем сокращения мышц , в результате чего чернильный мешок сжимается и выталкивается в пространство между источником света и линзами. В свою очередь у обитающих в более холодных водах Средиземного моря кальмаров i ii и i наиболее типичным симбионтом оказывался Vii i . При этом симбиоз был относительно неспецифичен достаточно часто V. V.ii. Род является относительно недавно описанным и, в этой связи, значительно менее изученным по сравнению с прочими люминссцирующими бактериями, демонстрирующими признаки психрофилии . К настоящему времени в составе рода ЗИеюапеИа обнаружено два люминесцирующих вида Иапес1а и 5. На фоне существования обширной группы морских люминесцирующих микроорганизмов достаточно обособленный таксон формируют представители светящихся бактерий, первоначально описанных в году как симбионты энтомопато генных вызывающих заболевания насекомых нематод кШегогкаЬсИсИа ЬаМегюрИога РкоЮг1шЬс1т Ыт тезсет . Микроорганизмы рода РкоогкаЬЛш также как и таксономически близкие им ХепогкаЬскл. Считается, что свечение инфецированного трупа привлекает внимание личинок насекомых, которые съедают труп, после чего сами становятся инфецированными. Таким образом, жизненный цикл люминесцирующих бактерий в трехкомпоиеитной системе бактерия нематода насекомое характеризуется чередующимися фазами симбиотического и паразитического существования. В году похожие люминесцирующие бактерии были выделены от человека из крови и раневого отделяемого . При этом интересной особенностью таких инфицированных ран являлось их достаточно благоприятное течение, предположительно определяемое антибиотическим действием образуемых здесь же продуктов бактериального происхождения . Дендрогарамма, отражающая степень близости люминесцирующих микроорганизмов, выглядит следующим образом Рисунок 1.