Рекомбинантные аналоги иммунодоминантных белков Treponema pallidum как основа гемагглютинационного диагностикума

• Автор: Чепурченко, Наталья Валерьевна
• Шифр специальности: 03.00.07, 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 132 с. : ил.

Оглавление

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Возбудитель сифилиса i.

1.2. Антигенные свойства белков i.

1.3. Эритроцитарные белковые диагностикумы.

1.4. РПГА в серодиагностике сифилиса.

1.5. Место РПГА в диагностике нейросифилиса

1.6. Ложноположительные реакции в РПГА. Применение рекомбинантных антигенов как способ повышения специфичности серодиагностики.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Рекомбинантные аналоги иммунодоминантных белков Г. i
2.2. Исследуемый материал
2.3. Тестсистемы сравнения
2.4. Получение сенсибилизированных куриных эритроцитов.
2.5. Реакция пассивной гемагглютинации РПГА
2.6. Иммуноферментный анализ.
2.7. Определение стабильности СЭ ускоренным методом
2.8. Статистическая обработка результатов
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Изучение иммунохимических свойств рекомбинантных антигенов аналогов иммунодоминантных белков Т. i. Сравнительный анализ антигенных свойств рекомбинантных белков в РПГА и ИФА
3.2. Разработка технологии производства гемагглютинационного диагностикума ДСРПГАантиЛюис, основанного на рекомбинантном антигене ТтрА. Характеристики теста ДСРПГАантиЛюис
3.3. Сравнительный анализ гемагглютинационных диагностикумов на основе рекомбинантных и лизатных трепонемных антигенов на разных стадиях сифилиса.
3.4. Сравнение динамики титров антител к кардиолипину и к белку ТтрА
Т. i в процессе проведения противосифилитической терапии.
3.5. Оценка возможности использования теста ДСРПГАантиЛюис для диагностики нейросифилиса.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Перспективным представляется изучение динамики титров специфических антител, определяемых гемаглютинационным диагностикумом, и оценка возможности использования данного теста для контроля эффективности терапии. Цель и задачи исследования. Целью работы явилось изучение иммунохимических свойств рекомбинантных аналогов основных иммунодоминантных белков ТтрА, кДа, кДа , кДа Т. Провести сравнительный анализ антигенных свойств рекомбинантных белков аналогов основных мембранных протеинов ТтрА, кДа, кДа , кДа Т. Выбрать рекомбинантные аналоги белков Г. Сравнить динамику титров антител к кардиолипину и к белку ТшрА Т. С использованием рекомбинантных белков методами РПГА и ИФА исследовать особенности антителопродукции в образцах ликвора и определить возможность использования гемагглютинационного теста для диагностики нейросифилиса. Методом РПГА в образцах сывороток крови больных сифилисом определяются в основном антитела к рекомбинантному аналогу антигена Т. ТгпрА и Тр. Рекомбинантные антигены аналоги иммунодоминантных белков Т. ТшрА антигена для мониторинга проводимого противосифилитического лечения и контроле в посттерапевтический период. Научная новизна исследования. Впервые методом РПГА исследованы иммунохимические свойства четырех рекомбинантных антигенов аналогов иммуиодоминантных белков ТшрА, , и кДа Т. Установлено, что гемагглютинационными диагностикумами в образцах сывороток крови больных сифилисом на разных стадиях инфекции определяются преимущественно антитела к белку ТшрА. Показано, что гемагглютинационный диагностикум, основанный на использовании рекомбинантного белка аналога иммунодоминантного эпитопа ТшрА антигена Т. Впервые показана возможность использования гемагглютинационного диагностикума на основе рекомбинантного аналога белка ТшрА для оценки эффективности противосифилитического лечения и при контроле в посттерапевтический период. Практическая значимость. На основе формалинизированных куриных эритроцитов, сенсибилизированных рекомбинантным антигеном ТшрА, сконструирован РПГА тест для диагностики сифилиса. Разработанная тестсистема ДСРПГАантиЛюис может применяться в комплексной диагностике заболевания в качестве скринингового и подтверждающего теста. Данный гемагглютинационный диагностикум адаптирован для тестирования образцов ликвора, что позволяет использовать его для выявления поражений ЦНС при сифилисе. Созданный гемагглютинационный диагностикум может использоваться для подтверждения динамических изменений титров антикардиолипиновых иммуноглобулинов, определяемых РМП, при проводимом лечении и в посттерапевтический период. Т. i ДСРПГАантиЛюис. В ООО НПО Диагностические системы налажен выпуск производственноэкспериментальных серий данной тестсистемы. Подана заявка на патент РФ на изобретение. Апробация работы. Результаты работы доложены на Научнопрактической конференции Актуальные вопросы инфекционной патологии, Барнаул, г. VIII Всероссийском съезде дерматовенерологов, Москва, г. Первом Российском конгрессе дерматовенерологов, СанктПетербург, г. Всероссийской конференции дерматовенерологов Современные направления диагностики, лечения и профилактики ИППП и дерматозов, Нижний Новгород, г. Европейском Конгрессе клинической микробиологии и инфекционных заболеваний, Копенгаген, Дания, г. IX Всероссийском съезде дерматовенерологов, Москва, г. Курсах информации для врачей курируемой зоны но лабораторной диагностике ИППП, Нижний Новгород, г. Областной научнопрактической конференции Итоги деятельности дерматологической службы Нижегородской области в г. Нижний Новгород, г. Областной научнопрактической конференции Актуальные вопросы дерматологии, Тюмень, г. V съезде дерматологов и венерологов Республики Беларусь, Минск, г. VI Научнопрактической конференции Социально значимые заболевания в дерматовенерологии. Диагностика, терапия, профилактика, Москва, г. Структура и объем диссертации. В текст включены таблицы и рисунков. По теме диссертации опубликовано печатных работ, в том числе одна в центральной печати.