Изучение антибактериального действия низкомолекулярного поликатионного пептида варнерина на антибиотикорезистентные штаммы Staphylococcus epidermidis

• Автор: Титова, Анастасия Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Пермь
• Количество страниц: 134 с. : ил

Содержание
ВВЕДЕНИЕ.

Обзор литературы

Глава 1. УСТОЙЧИВОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ К АНТИБИОТИКАМ. АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ ПЕПТИДЫ И ПЕРСПЕКТИВА ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДЛЯ БОРЬБЫ С АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫМИ ШТАММАМИ МИКРООРГАНИЗМОВ

1.1. Проблема формирования антибиотикоустойчивости у микроорганизмов.

1.1.1. Антибиотикорезистеитность и механизмы ее появления у микроорганизмов

1.1.2. Механизмы устойчивости бактерий к антибактериальным средствам .

1.1.3. Пути преодоления устойчивости бактериальных клеток к

антибиотикам

1.2. Антибактериальные пептидные соединения как природные факторы ингибирования роста микроорганизмов

1.2.1. Пептиды млекопитающих.

1.2.2. Пептиды земноводных.
1.2.3. Пептиды насекомых.
1.2.4. Пептиды растений
1.2.5. Пептиды бактерий
1.2.6. Механизмы антибактериального действия поликатионных пептидов
1.2.7. Практическое использование поликатионных пептидов.
Экспериментальные исследования
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Бактериальные штаммы
2.2. Среды и условия культивирования.
2.3. Определение антибиотикочувствитсльности исследуемых штаммов
2.4. Получение антибиотикорезистентных штаммов ер1с1егпйсИь
2.5. Определение интенсивности роста и количества жизнеспособных клеток.
2.6. Получение препарата низкомолекулярного катионного пептидного антибактериального фактора.
2.7. Количественное определение антибактериального пептида в использованных препаратах
2.8. Определение антибактериальной активности варнерина
2.9. Выделение плазмидной ДНК
2 Анализ плазмидного спектра.
2 Анализ липидного состава цитоплазматических мембран клеток.
2 Статистическая обработка данных
Глава 3. ИЗУЧЕНИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ДЕЙС ТВИЯ НИЗКОМО
ЛЕКУЛЯРНОГО ПОЛТЕКАТИОННОГО ПЕПТИДА ВАРНЕРИНА НА АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫЕ ШТАММЫ III .
3.1. Получение антибиотикорезистентных штаммов . iii
3.2. Бактерицидное действие антибактериального пептида варнерина на различные штаммы . iii
3.3. Влияние варнерина на ангибиотикочувствительносгь клеток различных штаммов . iii.
3.4. Влияние различных по механизму действия антибиотиков на чувствительность клеток . iii к варнерину.
3.5. Роль трансмембранного потенциала клеток . iii в реализации бактерицидного эффекта варнерина.
3.6. Действие варнерина на клетки . iii в комбинации с
лизоцимом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ КАТИОННЫЕ ПЕПТИДЫ И ПЕРСПЕКТИВА ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДЛЯ БОРЬБЫ С АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫМИ ШТАММАМИ МИКРООРГАНИЗМОВ. После выделения А. Флемингом в г. Успешное применение пенициллина в борьбе с различными инфекционными заболеваниями и воспалительными процессами явилось мошным стимулом поиска новых, еще более эффективных антибиотических веществ, образуемых различными группами микроорганизмов, а также высшими растениями и животными организмами. Настойчивые поиски продуцентов новых антибиотиков увенчались блестящими успехами и в настоящее время ни у кого не вызывает сомнений ведущая роль антибиотиков в лечении инфекционных заболеваний человека и животных Егоров, . Кроме того, они применяются для защиты растений от болезней, вызываемых бактериями и грибами, для обеззараживания пищевых продуктов, для улучшения роста сельскохозяйственных животных. Многие антибиотики играют важную роль в качестве инструментов исследования специфических функций клеток Ланчини, Иаренти, . Из двадцати с лишним тысяч антибиотиков, известных к настоящему времени, только около 1 используегся в медицинской практике. Большинство описанных антибиотиков не находит применения изза высокой токсичности, быстрой инактивации или других причин Сазыкин, . По данным мировой статистики, за год от инфекций погибает более миллионов человек Навашин, . Сохранение высокого уровня инфекционной заболеваемости и ее рост во многом обусловлены широким распространением антибиотикорезистентных форм микроорганизмов. Любопытно отметить, что оксфордские классики Г. Абрахам и Э. Чейн еще до получения очищенного пенициллина описали бактериальный фермент, его разрушающий пенициллиназу Навашин, . Тем самым была показана возможность появления и распространения устойчивых к этому антибиотику форм возбудителей заболеваний. Как стало понятно уже через несколько лет после внедрения в клиническую практику пенициллина, формирование антибиотикорезистентных форм бактерий является постоянным спутником химиотерапии. Опыт последних лет показывает, что этиологическая структура инфекционных заболеваний человека подвержена определенным изменениям во времени. В х годах XX века ведущими патогенами были грамположительные бактерии. Внедрение и успешное применение пенициллинов привело к тому, что в е годы главным этиологическим фактором инфекционных заболеваний стали грамотрицательные бактерии. С конца х годов прошлого века и до настоящего времени вновь наблюдается возрастание клинической значимости грам положительной микрофлоры. При этом возбудителями инфекций становятся микроорганизмы, устойчивые к наиболее часто используемым антибиотикам Сидоренко, . Формирование антибиотикоустойчивых штаммов бактерий происходит за счет селекции в организме больного устойчивых клеток, появляющихся в микробной популяции па фоне применения антибактериальных препаратов. Навашин, Сазыкин, . Так, у штаммов стафилококков, выделяемых от больных, имеет место плазмидный тип устойчивости, поэтому более вероятным способом формирования резистентности штаммов является передача и амплификация в реципиенгных клетках плазмид, содержащих детерминанты антибиотикоустойчивости. Вместе с тем, относительно недавно были описаны несущие гены резистентности коныогативные транспозоны , iv, . Кроме того, распространению антибиотикорсзистентности способствует также передача генов устойчивости путем трансдукции, а также такое явление как ретранспорт Навашин, Сазыкин, . Химическая модификация токсического вещества. Классическим примером является устойчивость к группе Бактерии, резистентные к антибиотикам этого класса продуцируют фермент . Вильямс, . Деактивация антибиотиков другого класса аминогликозидов осуществляется при помощи трех групп ферментов аденилилтрансфераз, ацетилтрансфераз и фосфорилтрансфераз, осуществляющих ковалентную модификацию субстратов за счет соответственно аденилирования, ацетилирования и фосфорилирования молекулы антибиотика . Так, например, ферментативное ацетилирование является наиболее частым механизмом устойчивости и к хлорамфеииколу .