Внеклеточные протеолитические ферменты несовершенных грибов

• Автор: Грубань, Татьяна Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 118 с.

Введение.

Список сокращений

I. Литературный обзор

1.1. Внеклеточные прогсолитическис ферменты грибов

1.1.1. О роли внеклеточных протеаз.

1.1.2. Классификация секретируемых эндопептидаз

1.1.1.1. Металлопротеазы

1.1.1.2. Аспартильные протеазы

1.1.1.3. Сериновые протеазы

I.1.1.4 Цистеиновые протеазы.

1.2. Влияние условий культивирования на секрецию грибами

протеолитических ферментов.
1.3. Роль секретируемых протеаз в инфекционном процессе.
1.4. Краткая характеристика микромицетов
II. Экспериментальная часть .1 .Материалы и методы
II.1.1. Методы исследования .
.2. Результаты и их обсуждение
Выводы.
Список литерату


Однако большая часть известных к настоящему времени эндопептидаз может быть отнесена к одному из четырех классов металлопротеаз, сериновых, цистеиновых и карбоксильных или аспартильных протеаз, ранее называвшихся кислыми Лобарева, Степанов, МсЕопаШ, . Класс образуется целым рядом ферментов, для которых харктерен однотипный механизм каталитического действия, обусловленный присутствием в активных центрах соответствующих реакционноспособных групп. Это проявляется, с одной стороны, в существовании для данного класса общих ингибиторов, с другой в сходстве диапазона , в котором ферменты определенного класса проявляют активность Павлюкова и др. Яао ег а1. Специфичность мало пригодна как признак для классификации, т. Внутри класса различаются семейства протеиназ. Для ферментов, входящих в семейство, характерны однотипно построенный каталитический центр и эволюционное родство, выраженное в гомологии первичных и сходстве пространственных структур. Металлопротеазы. Протеолитические ферменты часто секретируются в неактивной форме. Для активации металлопротеаз необходимо присутствие ионов металлов магния, марганца, кобальта, цинка. Л их активность подавляется веществами, связывающими эти металлы ЭДТА, 1,фенантролин, версен, цитрат, фосфамид. Ферменты этой группы можно разделить на две подгруппы. К первой принадлежат ферменты, у которых металл подвижно соединен с белковой частью и легко теряется при очистке, например лейцинаминопептидаза, пролидаза и др. Рис. Подвижное соединение металла с белковой чсстыо молекулы в случае лейцинаминопептидазы, цит. Кретовичу, . Рис. Неподвижное соединение металла с белком в случае карбокси пептидазы, цит. Кретовичу, . Кретович, . Другая подгруппа содержит металл прочно соединенный с белком. К ним относится карбоксипептидаза, в активном центре которой ион цинка и свободная карбоксильная группа координированы с белком рис. Степанов, Кретович, Прист, . В случае карбоксипептидазы природа металла оказывает влияние на специфичность действия и величину удельной активности фермента Кретович, . Механизм действия цинковых протеаз можно представить в виде схемы рис. З. Рис. З. Схема механизма действия мсталлопротеаз X2, цит. , . Карбоксильная группа глутаминовой кислоты атакуется цинксвязанной водой, что приводит к присоединению к ней водорода. Гидроксидион присоединяется к углеродному атому пептида с образованием промежуточного четвертичного атома углерода с последующим отщеплением от него 2 , . Егоров и др. Металлопротсаза, описанная , способна гидролизовать субстрат субтилизиниодобной протеазы химоэластазы . ii ii и vi i, проведенный с помощью изоэлектрического фокусирования, показал присутствие этого фермента в трех изоформах. ОписанЕше авторами металлопротеазы имели молекулярные массы , их ИЭТ лежали в интервале от 4,2 до 7,6 i . . . . , . , . Как правило, металлопротеазы секретируются в комплексе с другими протеазами. Так, i секретирует кислую протеиназу субтилизинового семейства, две металлопротеазы и 2 и аспартильную протеазу. i v секретирует сериновую и мсталлопротеазу , по гликозилированггости, молекулярной массе и термостабильности металломротеаза сходна с 2 . .i. Металлопротеаза из . , она расщепляла коллаген и полностью ингибировалась специфическими ингибиторами металлопротеаз. По физикохимическим характеристикам этот фермент сходен с Л. .i . Металлопротсаза, выделенная и охарактеризованная . .i, значительно отличалась по своим характеристика от металлопротеаз, изолированных . . Ваганова с сотр. К первой относятся ферменты, оптимум активности которых лежит при 7,0 протеиназы I . .i. Их молекулярная масса лежит в диапазоне и ингибируются они фосфоамидоном. Притеаза второй группы имеют оптимум гидролиза белков при 5,06,0. К ним относятся протеазы II . .i.