Иммунобиологическая характеристика бесклеточной коклюшной вакцины

• Автор: Устюгов, Яков Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.07, 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Пермь
• Количество страниц: 118 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВОЗБУДИТЕЛЯ И ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКА КОКЛЮША ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ СОСТАВА, ТОКСИЧНОСТИ И АЛЕР ИЗИРУ ЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ БЕСК ЗI ВТ ОЧНОГО

КОКЛЮШНОГО ПРЕПАРАТА

3.1 Исследование состава бесклеточного коклюшного препарата

3.1.1 Биохимическая характеристика бесклеточного коклюшного

препарата

3.1.2 Гельхроматография

3.1.3 Электрофорез

3.1.4 Иммунохимическая характеристика бесклеточного

коклюшного препарата
3.2 Исследование токсичности бесклеточного коклюшного
препарата
3.2.1 Оценка острой токсичности бесклеточного коклюшного препарата
3.2.2 Оценка хронической токсичности бесклеточного
коклюшного препарата
3.2.3 Оценка токсичности в тесте изменения массы мышей
3.2.4 Оценка гистаминсенсибилизирующей активности
3.2.5 Оценка лейкоцитозстимулирующей активности
3.3 Оценка аллергизирующих свойств бесклеточного коклюшного препарата Глава 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БЕСКЛЕТОЧНОГО КОКЛЮШНОГО ПРЕПАРАТА
4.1. Исследование протективной активности
4.1.1 Оценка протективной активности по проценту выживаемости мышей
4. .1.2 Исследование возможности адоптивного переноса иммунитета в эксперименте с сил генной трансплантацией спленоцитов
4.2 Сравнительная оценка способности корпускулярного и бесклеточного коклюшных препаратов к индукции гуморального иммунного ответа
4.3 Оценка активности кроличьих коклюшных сывороток
4.4 Получение аффинноочищенных коклюшных антител и использование их для конструирования коагглютинационных реагентов
4.5 Исследование коклюшных сывороток в тестах пассивной защиты и реакции нейтрализации на мышах
4.6 Определение аффинности коклюшных антител
4.7 Исследование возможности переноса клеток памяти на мышах линии
4.8 Сравнительная оценка иммуномодулирующей активности коклюшных препаратов в реакции бласттрансформации лимфоцитов с Тклеточным митогеном
4.9 Сравнительная оценка активности коклюшных препаратов в реакции бласттрансформации лимфоцитов с клетками В. i
4. Сравнительная оценка интенсивности воспаления при реакции гиперчувствительности у животных, иммунизированных бесклеточным и корпускулярным коклюшными препаратами
ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КОМБИНИРОВАННЫХ ВАКЦИН С КОРПУСКУЛЯРНЫМ И БЕСКЛЕТОЧНЫМ КОКЛЮШНЫМ КОМПОНЕНТАМИ ОБСУЖДЕНИЕ ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Целыо настоящей работы явилось проведение лабораторноэкспериментального доклинического исследования иммунобиологических свойств разработанного бесклеточного коклюшного препарата. Оценить токсичность и аллергизирующее действие бесклеточного коклюшного препарата. Изучить иммуногенность бесклеточного коклюшного препарата на экспериментальных животных. Сконструировать комбинированную вакцину для профилактики дифтерии, столбняка и коклюша с использованием бесклеточного коклюшного компонента и оценить ее иммуногенность на экспериментальных животных. Научная новизна. Впервые проведена комплексная оценка токсичности и иммуногенной активности отечественного бесклеточного . В экспериментах показано отсутствие у бссклеточной коклюшной вакцины токсичности, аллергизирующей, гистаминсенсибилизирующей и лейкоцитозстимулирующей активностей. Новая бесклеточная коклюшная вакцина подобно цсльноклеточной защищает мышей от интрацеребрального заражения вирулентным штаммом В. Протективная активность и аффинность антител, образующихся в ответ на иммунизацию бесклеточным и цельноклеточным препаратами, оказались сходными. Пролиферативный ответ лимфоцитов i vi на фитогемагглютинин после иммунизации бссклеточной коклюшной вакциной выше, чем после иммунизации цельноклеточной. Патоморфологические исследования показали значительно меньшую степень выраженности вторичной альтерации в тесте гиперчувствительности при введении бесклеточного препарата. Полученные результаты уточняют представления о природе приобретнной противокоюношной резистентности. Принципиально важно, что новая бесклеточная коклюшная вакцина обладает сходной с традиционной цельноклеточной вакциной протективной активностью и иммуногенностью при меньшей токсичности. Проведенные исследования существенная часть доклинических испытаний новых вакцин на пути их продвижения в практику, в частности, для представления в Государственный Институт стандартизации и контроля им. Л.И. Тарасевича. Пермь, ул. Букирева, . В лекционном курсе Биотехнология кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии ГОУ ВПО Пермская государственная фармацевтическая академия , г. Пермь, ул. Ленина, . Бесклеточный коклюшный препарат обладает более низкой токсичностью и аллергизирующей активностью в сравнении с цельноклеточной вакциной. Новая бесклеточная коклюшная вакцина подобно цельноклеточной защищает мышей от интрацеребрального заражения вирулентным штаммом В. Бесклеточная и традиционная цельноклеточная коклюшные вакцины обладают сопоставимой способностью к индукции иммунного ответа. Стимулирующее влияние бесклеточного препарата на пролиферацию Тлимфоцитов в культурах с фитогемагглютинином более выражено, а проявления вторичной альтерации при реакции гиперчувствительности менее значительны. Замена в вакцине АКДС цельноклеточного коклюшного компонента на новый бесклеточный создает новую комбинированную вакцину, которая не уступает традиционной по иммуногенной активности. Апробация работы и публикации. Основные положения работы доложены, на Межрегиональной конференции молодых ученых Современные проблемы экологии, микробиологии ииммунологии, Пермь, Международной конференции молодых ученых Биология наука XXI века, Пущино, Международной научной конференции Студент и научнотехнический прогресс, Новосибирск, Объединенном иммунологическом форуме, СанктПетербург, . По материалам диссертации опубликовано научных работ. Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН Пермь, и рекомендована к защите. Объем и структура диссертации. Работа изложена на 8 стр. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, трех глав экспериментальных исследований, обсуждения, выводов, списка цитируемой литературы, включающего 9 источников литературы, из них отечественных и 2 иностранных авторов. Связь работы с научными программами. Диссертационная работа выполнена в соответствии с основным планом НИР Института экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН номер госрегистрации темы . Филиала государственного унитарного предприятия НПО Микроген Минздравсоцразвигия РФ Пермское НПО Биомед.