Моделирование антигенного дрейфа вирусов гриппа А (HINI), выделенных от диких птиц

• Автор: Дубова, Евгения Александровна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Алма-Ата
• Количество страниц: 142 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. СТРУКТУРА И АНТИГЕННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ВИРУСОВ

ГРИША А.
1.1. Краткая характеристика основных белковых компонентов и антигенной структуры вирусов гриппа А. .

1.2. Происхождение пандемических и эпидемических штаммов вируса гриппа А . .

Глава 2. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ В ИЗУЧЕНИИ

СТРУКТУРЫ И ИЗМЕНЧИВОСТИ ПОВЕРХНОСТНЫХ АНТИГЕНОВ ВИРУСОВ ГРИППА .

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Сбор материала от диких птиц для вирусологических
и серологических исследований .
3.2. Характеристика мест сбора биологического материала
3.3. Методы выделения и идентификации вирусов
3.4. Иммунологические методы .
3.5. Методы изучения биологических свойств вирусов гриппа
3.6. Биохимические методы исследования .
3.7. Получение гибридомных моноклональных антител
к вирусу Ачайка озернаяКазахстан0 .
3.8. Получение антигенных вариантов с использованием моноклональных антител .
3.9. Приготовление эритроцитарного диагностикума
на основе моноклональных антител
ЗЛО. Статистическая обработка результатов.
Глава 4. ИЗОЛЯЦИЯ ВИРУСОВ ГРИППА ОТ ДИКИХ ПТИЦ
В КАЗАХСКОЙ ССР
4.1. Выделение и идентификация вирусов гриппа
4.2. Иммунологический анализ вирусов НШ1, изолированных от диких птиц, с использованием моноклональных антител
Глава 5. ИЗУЧЕНИЕ СПЕЦИФИЧНОСТИ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ
К ВИРУСУ АЧАИКА ОЗЕРНАЯКАЗАХСТАН0
Глава 6. МОДЕЛИРОВАНИЕ АНТИГЕННОГО ДРЕЙФА ВИРУСОВ НШ
РАЗЛИЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
6.1. Селекция и иммунологический анализ антигенных вариантов вирусов Ачайка озернаяКазахстан
0 и АСССР0 с использованием моноклональных антител
6.2. Сравнительное изучение биохимической структуры и биологических свойств селектированных вариантов .
ОБСУВДЕЫИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ . .
ЛИТЕРАТУРА


i , . Частично определена первичная структура всех подтипов гемагглютинина i ,. Углеводы, в состав которых входят галактоза, глюкоза, манноза, фукоза и глюкозамин см. Харитоненков, , являются важным структурнофункциональным компонентом молекулы гемагглютинина. Строение и локализация олигосахаридных цепей определяются особенностями гликозилтрансферазной системы клеткихозяина и структурой самого полипептида , ,, , . Имеется 2 типа углеводных цепочек, входящих в состав гликопротеидов вирусов гриппа тип I сложный, который содержит глюкозамин, маннозу, галактозу и фукозу моносахаридных остатков с молекулярной массой дальтон, и тип 2 простой, включающий маннозу и глюкозамин молекулярная масса дальтон, 7 остатков. Молекулярная масса цепочки I типа зависит от клеткихозяина v . , ,. Сахарные цепочки присоединены к остаткам аспарагиновой кислоты, находящимся по соседству с остатками серина или треонина. i . На основании результатов аминокислотного анализа . ., . Цепочки в положениях 8, , и принадлежат к первому, а в положениях 5 и 5 ко второму ТИПУ . . . А и I на легкой 3 цепочки, выявленные на I и I на НА2 относятся к сложному типу. Из 2 остальных на молекуле I одна простая, а другая имеет структуру, которую можно определить как промежуточную между двумя типами. Одной из предполагаемых функций углеводов является стабилизация и защита биологически активной части белка. В.Э. Е.С. Исаевой показано, что гемагглютинин, обработанный гликозидазами, обладает повышенной чувствительностью к протеолитическому ферменту бромлайну. Отсутствие углеводных цепочек на молекуле гемагглютинина приводит к резкому снижению способности к гемагглютинации . , , Березин, Харитоненков, . Влияние углеводов на иммунологические свойства вирусов гриппа до конца не выяснено. Есть данные, что удаление около сахарных остатков с вируса гриппа штамм II почти не влияет на иммунохимические свойства его гемагглютинина Шендерович и др. В опытах . показано, что изменения в характере гликозилирования, связанные с изменениями первичной структуры молекулы, не оказывают существенного влияния на антигенные свойства вируса чумы птиц. Однако по данным Р. Сопсап I4, наличие дополнительного антигенного сайта в молекуле гемагглютинина I в сравнении с НЗ связано с различиями в характере гликозилирования этих гликопротеидов. концевого остатка ацетилнейраминовой кислоты с остальной частью рецептора. Функционально активная нейраминидаза имеет грибовидную форму кубообразная головка связана с вирусной мембраной нитевидной ножкой i . . Углеводная часть молекулы сформирована сахарами глюкозамином, маннозой, галактозой и фукозой . В настоящее время полностью расшифрована первичная структура молекул нейраминидазы 1 и 2 и частичноостальных подтипов ,. Показано, что нейраминидаза вируса АРР8 имеет 5 потенциальных сайтов гликозилирования x. x. i . Изучение первичной структуры нейраминидазы вируса АУдорн 32 позволило . .. i сделать заключение, что, несмотря на имеющиеся различия в аминокислотном составе, расположение сайтов гликозилирования на полипептидах 1 и 2 аналогично. Сравнение ферментов двух подтипов обнаружило несколько консервативных аминокислотных участков, которые, по предположению авторов, связаны с функциональным сайтом фермента. Рентгеноструктурный анализ головки нейраминидазы 2 показал, что в тетрамере размер 0x0x А каждый мономер состоит из 6 топологически идентичных структур, организованных в форме лопастей пропеллера. Полипептид обладает циркулярной симметрией, которая стабилизируется частично с помощью ионов кальция. Углеводные цепочки присоединены к 4 из 5 потенциальных сайтов гликозилирования V .