Консервативный конформационный эпитоп в стержневом регионе гемагглютинина вирусов гриппа А филогенетически близких подтипов H1, H2, H5 и H6

• Автор: Липатов, Александр Серафимович
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 128 с.

Сравнительное исследование взаимодействия моноклонального антитела С9, распознающего консервативный эпитоп в стержневом регионе гемагглютпшша, с гемагглютининами подтипов Н1, Н2, Н5 и Н6 и выявление структурных основ и особенностей его взаимодействия с гемагглютининами разных подтипов. Получение и характеризация высокопатогенного для мышей, пневмовирулентного варианта вируса гриппа птиц подтипа Н5. Изучение влияния адаптации вирусов гриппа птиц подтипов Н2 и Н5 к млекопитающим на структуру конформационного эпитопа в стержневом регионе гемагглютинина и его распознавание моноклональным антителом С9. Определение эффективности моноклонального антитела С9 для защиты и лечения экспериментальной бронхопневмонии, вызванной у мышей вирусами гриппа с подтипами гемагглютинина И1, Н2 и Н5. Научная новизна и практическая ценность работы. В результате исследования вирусов гриппа А подтипов Н5 и Н6 в реакциях с МКА С9 обнаружен общий конформашюнный эпитоп в стержневом регионе НА, аналогичный описанному ранее для вирусов подтипов Н1 и Н2. Показано, что взаимодействие МКА с гемагглютинином штаммов Н1, Н2 и Н5 подтипов нейтрализует ннфекцнонность вирусов. Для вирусов подтипа Н6 показано, что гликозилирование молекулы НА влияет на распознавание МКА С9 конформационного эпитопа и препятствует их нейтрализации. Для моделирования гриппозной инфекции на мышах получен и охарактеризован адаптированный к мышам вариант непатогенного птичьего штамма с подтипом гемагглютинина Н5. Изучен процесс адаптации непатогенного вируса гриппа птиц к млекопитающему. Определены изменения в НА, сопровождающие преодоление межвидового барьера и приобретение вирулентности для нового хозяина. НА, не влияя на его распознавание МКА С9 и нейтрализацию вирусов. В экспериментах на животных показано, что применение МКА С9 эффективно для профилактики и лечения летальной бронхопневмонии, вызываемой вирусами гриппа А подтипов , Н2 и Н5. Поскольку вирусы гриппа с подтипом Н2 могут рассматриваться в качестве вероятного донора гена НА для возможного нового пандемического штамма . Полученные данные демонстрируют наличие консервативного перекрестнонейтрализующсгося эпитопа в НА подтипов 1, 2 и 5 и показывают эффективность МКА к нему для профилактики и лечения экспериментальной инфекции, вызванной штаммами этих подтипов. Поиск других таких консервативных детерминант может быть одним из перспективных направлений в создании профилактических и лечебных противогриппозных препаратов с широким спектром активности. Положения, выносимые на защиту. Гемагглютнннн вирусов гриппа А, Н1, Н2, Н5 и Н6 подтипов, содержит общий, консервативный конформационный эпитоп в стержневом регионе, который распознается МКА С9. Для вирусов гриппа , Н2 и Н5 подтипов данный эпигоп является нейтрализующим. Гликозилирование молекулы НА подтипа Н6 влияет на распознавание эпитопа и препятствует нейтрализации вирусов этого подтипа МКА С9. Серийное пассирование непатогенного вируса гриппа птиц с подтипом НА Н5 в легких мышей приводит к его адаптации и приобретению вирулентности. Процесс адаптации сопровождается постадийными изменениями первичной структуры НА и его антигенности. Адаптация вирусов гриппа птиц Н2 и Н5 подтипов к млекопитающим приводит к изменению первичной структуры одного из участков конформационного эпитопа в стержневом регионе НА. Применение МКА С9 эффективно для профилактики и лечения экспериментальной легальной бронхопневмонии у мышей, вызванной адаптированными вариантами штаммов вируса гриппа подтипов I, Н2 и Н5. ГГ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Данный раздел диссертации представляет собой анализ литературных данных о структуре вириона вируса гриппа А, функциях его белков. Большая часть обзора посвящена структуре и функциям гемагглютинина вируса гриппа. Особое внимание уделено изменениям гемагглютинина, происходящим в процессе адаптации вируса к новому хозяину, сопровождающимся приобретением вирулентности. II. Общее строение вириона вируса гриппа и функции вирусных белков. Вирусы гриппа относятся к семейству ivvii. На основании антигенных свойств главных внутренних белков их разделяют на типы А, В и С. Внрноны вируса гриппа А представляют собой в основном сферические частицы диаметром 0 нм, но встречаются также нитевидные, филаментозные и гигантские сферические формы iv .