Специфический гуморальный иммунитет при вирусном гепатите С

• Автор: Николаева, Людмила Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 260 с. : ил.

Введение.
Иммунный ответ на антигены вируса гепатита С обзор литературы. Л 8 Глава 1. Вирус гепатита С.

1.1.Организация генома вируса

1.2. Строение вириона

1.3. Вирус гепатита С как представитель семейства ПауМпбае

Глава 2. Основные антигены вируса гепатита С

2.1. Структура и эпитопы оболочечных белков вируса.

2.2. Нуклеокапсидный антиген и его детерминанты

2.3. Биологическая роль и эпитопы белка

2.4. Полипептиды Ыа и ИЬ и их детерминанты.

2.5. Биологическое значение и эпитопы белков 5а и

Глава 3. Роль иммунной системы в ограничении ВГСинфекции.
3.1. Основные факторы иммунной системы, влияющие на элиминацию вируса в острой фазе инфекции.
3.2. Специфический Тклсточный ответ при гепатите С
3.3. Гуморальный ответ на антигены вируса
Заключение по обзору литературы.
Собственные исследования
Глава 4. Материалы и методы.
4.1. Материалы исследований
4.2. Сорбция антигенов для твердофазного ИФА.
4.3. Ориентированная посадка пептидов для ИФА
4.4. Синтез пептидных антигенов
4.5. Определение концентрации белков.
4.6. Твердофазный иммуноферментный анализ
4.7. Выявление и титрование специфических иммуноглобулинов М.
4.8. Определение и титрование специфических иммуноглобулинов
в к антигенам капсидный, , и 8.
4.9. Выявление антикапсидных иммуноглобулинов
методом оптического биосенсора.
4 Определение фрагментов генома вируса.
4 Анализ активности аланин и аспартатаминотрансфераз
4 Статистическая обработка данных
Результаты исследовании.
Глава 5. Специфический гуморальный иммунитет при
естественном течении острого гепатита С.
5.1. Вирусспецифические антитела класса М
5.2. Иммуноглобулины в к оболочечным антигенам.
5.3. Появление антител класса в к капсидному белку и неструктурным антигенам и изменение их содержания при развитии хронической инфекции.
5.4. Изменение титров иммуноглобулинов б к капсидному и неструктурным антигенам при элиминации вируса.
Глава 6. Специфический гуморальный иммунитет при
естественном течении хронического гепатита С.
6.1. Частота выявления и титры вирусспецифических иммуноглобулинов М
6.2. Вклеточный ответ на оболочечные антигены вируса
6.3. Титры антител класса в к нуклеокапсидному белку.
6.4. Частота обнаружения и уровень иммуноглобулинов в к неструктурным антигенам.
Глава 7. Динамика показателей специфического гуморального
иммунитета при этиотропной терапии больных хроническим
гепатитом С
7.1. Изменение титров ВГСсгецифических антител класса М
7.2. Динамика содержания иммуноглобулинов к оболочечным белкам вируса
7.3. Изменение титров антител класса к капсидному антигену
7.4. Динамика содержания иммуноглобулинов
к неструктурным антигенам вируса
Глава 8. ВГСспецифический гуморальный иммунитет у людей,
перенесших острую инфекцию с выздоровлением.
8.1. Результаты обнаружения специфических иммуноглобулинов М
и антител класса к оболочечным и неструктурным белкам.
8.2. Обнаружение иммуноглобулинов к капсидному антигену.
Глава 9. Вирусспецифический гуморальный иммунитет у детей с
маркерами ВГСинфекции
9.1. Частота выявления специфических иммуноглобулинов М
у детей старше 2х лет больных хроническим гепатитом С
9.2. Антитела класса к капсидному антигену
у детей старше 2х лет больных хроническим гепатитом С
9.3. Иммуноглобулины к неструктурным антигенам
у детей старше 2х лет больных хроническим гепатитом С
9.4. Изменения титров антител класса к капсидному и неструктурным антигенам у детей до 2х лет, рожденных матерями с маркерами ВГСинфекции
Обсуждение.
Заключение.
Выводы.
Практические рекомендации
Список литературы


Самый стабильный участок РНК ВГС около гомологии находится в 5концевой нетранслируемой области . Vi . Благодаря наличию такого консервативного участка стало возможным выявление вирусной РНК из разных изолятов с помощью методов обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции I . В каждом инфицированном макроорганизме ВГС существует в виде набора генетически разнородных, но близких вариантов различия в нуклеотидной последовательности не превышают 3, называнных квазивидами М. При развитии персистентной инфекции в организме хозяина вирус подвергается иммунному прессу одни генетические варианты удаляются иммунной системой, а другие возникают ii . Причина появления новых вариантов ВГС связана с отсутствием у вирусной РНКзависимой РНКполимеразы корректирующей экзонуклеазной активности. Поэтому ошибки, возникающие в процессе репликации, не устраняются . Большинство нуклеотидных замен в геноме ВГС встречается в так называемых синонимических участках сайтах, мутации в которых не влияют на свойства вируса. Сравнение последовательностей синонимических сайтов позволяет установить дивергенцию сопоставляемых вариантов вируса. ВГС, удалось установить, что проникновение вируса в человеческую популяцию произошло около лет назад i . Первый элемент генома, 5концевая НТО, состоящий из 1 нуклеотидного остатка, участвует в формировании внутреннего рибосомального участка связывания сокращенно называемый в английской аббревиатуре I от i i i i . Он выполняет важную биологическую функцию обеспечивает связывание ВГС с рибосомой, формируя сложный по вторичной структуре I . I. . В состав I входит небольшой фрагмент генома, кодирующий с 1ой по ую аминокислотные остатки нуклеокапсидного белка. М. . Во вторичной структуре I выделяют четыре основных домена I, II, III, IV, псевдоузел и дополнительные элементы рис. II с субъединицой рибосомы и обеспечивает трансляцию генома ВГС по кэпнсзависимому механизму, используя для инициации кодон в позиции 2 рис. М. . При контакте РНК ВГС с субъединицой рибосомы в последней происходят сложные конформационные изменения . V. . Для эффективной трансляции генома ВГС необходимы канонические факторы I2 и I3 и ряд неканонических трансактиваторных белков. К последним относят нуклеокапсидный белок ВГС i . В. . I

. V
0
О
и
. Рис. I обладает невысокой активностью, которую могут ингибировать ряд клеточных белков, пептидов и модифицированных нуклеиновых кислот i . Витамин Вц селективно ингибирует I . Интерфероны альфа, вета, гамма ингибируют репликацию ВГС на уровне Iопосредованной трансляции . Короткие РНК могут интерферировать с последовательностью I и тем самым останавливать трансляцию М. Но и I способен ингибировать фермент протеинкиназу , активируемую интерферонами V . Обнаружено, что у ВГС есть изолятные различия в структуре I . Возможно, что это один из способов, обеспечивающих персистенцию вируса в различных типах клеток . В процессе репликации генома ВГС образуется РНК с отрицательной полярностью, так называемая минус цепь РНК. Она нестабильна и быстро расщепляется ферментами почти на в первые мин после разрушения клеток . В инфицированной клетке соотношение плюс и минусцепей РНК составляет 1 , . Установлено, что белок РТВ связывающий полиниримидиновый тракт необходим для эффективной репликации вирусного генома , . В модельных экспериментах подсчитано, что в одной инфицированной клетке в сутки образуются около плюсцепей РНК и около 0 минусцепей РНК i . В структуре 3 концевой НТО выделяют три элемента 1 короткий генотипспецифический участок, 2 вариабельный по длине полиуридиновый тракт и 3 уникальный регион X, содержащий консервативных нуклеотидов v А. А . Регион X, обнаруженный в году, имеет уникальную нуклеотидную последовательность Т. Т. . Кроме этого он обладает сложной вторичной структурой, в которой выделяют длинную шпильку 1, две короткие шпильки 2 и 3 и структуру, напоминающую псевдоузел i , i С. М., i . Вторичная структура региона X представлена на рис. САСсс Г 0

1





ЮСС

Рис. Схема вторичной структуры региона X для плюс цепи РНК ВГС i , i С. М., I Т.