Изучение роли альвеолярных макрофагов и нейтрофилов в развитии гриппозной инфекции на фоне действия глюкокортикоида кеналога

• Автор: Сметанникова, Мария Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Кольцово
• Количество страниц: 155 с. : 27 ил.

Глава

1.1.
1.2.
1.2.1.
1.2.2.
1.2.3.
1.2.4.
1.2.5.
1.2.6.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Обозначения и сокращения
Введение
Обзор литературы «Роль клеточных и гуморальных 15 факторов в формировании резистентности организма к вирусу гриппа»
Вирус гриппа и его репродукция в клетках-мишенях. 15 Механизмы повреждения респираторных органов при вирусной гриппозной инфекции
Влияние экзогенных и эндогенных факторов на 20 инфекционность вируса гриппа, восприимчивость клеток-мишеней и резистентность организма к вирусу гриппа Система интерферона
Генетически опосредованная врожденная резистентность к 26 ортомиксовирусам - ген Мх
Клетки неспецифического противовирусного иммунитета — 27 нейтрофилы и макрофаги
Особенности гемагглютинина ВГ, обусловливающие 32 тропизм вируса к различным тканям и его инфекционность Воздействие экзогенных факторов на ВГ и резистентность к 33 ВГ организма хозяина
Значение белков сурфактанта для защиты легких от 35 вирусной гриппозной инфекции
Влияние глгакокортикоидов на общую резистентность 37 организма и восприимчивость клеток-мишеней к вирусу гриппа
Влияние глюкокортикоидов на функциональную активность 43 нейтрофилов и макрофагов бронхоальвеолярного тракта как факторов резистентности при вирусной гриппозной

инфекции
1.5 Легкие как орган секвестрации и метаболизации 45 нейтрофилов в норме и при инфекционном воспалении. Механизмы реализации и значение этой функции легких в развитии воспалительного процесса
2 Материалы и методы
2.1. Лабораторные животные
2.2. Вирус гриппа и определение его концентрации
2.3. Используемые препараты
2.4. Определение почечных индексов (ПИ) органов мышей
2.5. Получение первичных культур клеток легких и трахеи
2.6. Цитологические исследования
2.7. Получение бронхоальвеолярной лаважной жидкости 68 (БАЛЖ)
2.8. Получение монослоя клеток БАЛЖ мышей
2.9. Определение фагоцитарной активности АМф и Нф(а) БАЛЖ
2.10. Определение потенциальной биоцидной активности АМф и
Нф(а) БАЛЖ по продукции ими супероксид-анионрадикалов
в НСТ-тесте
2.11. Интраназальное заражение животных ВГ и определение 50%
летальной дозы (ЛД50) ВГ
2.12. Аэрозольное заражение животных и определение 50%
аэрогенной инфицирующей дозы (АИД50) для легких и трахеи мышей
2.13. Оценка восприимчивости к ВГ клеток легких и трахеи in
vitro
2.14. Определение наличия ВГ в ткани легких и трахеи или в
суспензии клеток легких и трахеи
2.15. Определение титра интерферона в легких
2.16. Микроскопические исследования тканей органов мышей
2.17.
2.18.

3.1.
3.2.
3.3.
3.4.

Статистические методы
Экспериментальные группы мышей и схемы введения 74 препаратов
Результаты собственных исследований
Изучение влияния глюкокортикоида пролонгированного 78 действия кеналога на органы-мишени для ГКГ и клетки крови у мышей. Выбор доз и схем введения кеналога для последующего моделирования и исследования пониженной резистентности мышей к вирусу гриппа
Изучение показателей резистентности мышей к вирусу 85 гриппа А/АюЫ/2/68 после предварительного введения глюкокортикоида пролонгированного действия кеналога Изучение восприимчивости клеток-мишеней и активности 99 фагоцитов легких при снижении резистентности мышей к вирусу гриппа после введения глюкокортикоида пролонгированного действия кеналога
Изучение возможности коррекции пониженной 113 резистентности к вирусу гриппа, возникающей после введения глюкокортикоида пролонгированного действия кеналога, с помощью иммуностимулятора
хитокарбоксиметилглюкана
Обсуждение результатов собственных исследований
Выводы
Список использованной литературы

увеличение концентрации ВГ в легких наряду с повышением заболеваемости инфицированных грызунов [Hurd J. and Heath R.B., 1975; Frankova V., 1989].
На модели грызунов было также показано, что на течение вирусной инфекции оказывает влияние воздействие выхлопных газов. ВГ репродуцируется преимущественно в клетках, которые также являются главными мишенями для поллютантов (эпителий респираторного тракта). При использовании растворенных выхлопных газов в культуре клеток респираторного эпителия человека было обнаружено, что поллютанты повышают чувствительность клеток к вирусу гриппа. Эти изменения не сопровождаются подавлением продукции антивирусных медиаторов, поскольку отмечается повышение уровня ИФН-В и усиление интерферон-зависимой передачи сигналов и стимуляции экспрессии соответствующих генов. Большинство эффектов, индуцированных воздействием поллютантов, обусловлены окислительным стрессом и увеличением сродства ВГ к респираторным эпителиальным клеткам [Jaspers I. et al., 2005].
1.2.6. Значение белков сурфактанта для защиты легких от гриппозной инфекции
В защите организма от внедрения разнообразных патогенов, включая ВГ А, важную роль играют коллектины - секреторные коллагеноподобные белки, которые, как было показано, связывают, агглютинируют и нейтрализуют ВГ in vitro [Heasman S.J. et al., 2003; Hartshorn K.L. et al., 2000]. Белки сурфактанта A и D (SP-A и SP-D) относятся к коллектинам, синтезируемым в воздухоносных путях и в легких и оказывающим влияние на течение гриппозной инфекции in vivo [Hawgood S. et al., 2004]. SP-D продуцируется альвеолоцитами 2 типа и нереснитчатыми бронхиолярными эпителиальными клетками (клетки Клара) и секретируется в просвет воздухоносных путей [Durham P.L. et al., 1993; Ballard P.L. et al., 1997; Dong Q. and Wright J.R., 1998; Tan R.C. et al., 1999; Cole T.J. et al., 2004; Provost P.R. and Tremblay Y., 2005].
Ранее было обнаружено, что связывание SP-D с вирусом гриппа А находится в зависимости от гликозилирования специфических сайтов на НА1-