Дифференциация вируса болезни Тешена от энтеровирусов свиней на основе анализа генома

• Автор: Жигалева, Ольга Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Покров
• Количество страниц: 118 с. : ил.

Впервые она была описана в году в Чехословакии. В бывшем СССР заболевание было диагностировано в году в Закарпатской области Украины. Эпизоотическая обстановка в России по болезни Тешена осложнилась в середине х годов и, несмотря на значительные усилия, предпринимаемые ветеринарной службой России, заболевание было зарегистрировано в Брянской, Смоленской, Орловской, Воронежской и Тульской областях, а также в Белоруссии, Украине и Молдавии 9. Сложность борьбы с этой инфекцией обусловлена тесным антигенным родством вируса болезни Тешена с энтеровирусами свиней и сходными клиническими признаками болезни, вызываемыми этими возбудителями, что затрудняет проведение диагностических исследований . В частности, энцефаломиелиты у свиней, кроме вируса болезни Тешена, вызывают и энтеровирусы свиней, что создает дополнительные сложности при разработке мер борьбы с этой болезнью. Репродуктивные расстройства, также характерные для болезни Тешена, вызывают представители энтсровирусов 8 ссротипа. В то же время ряд штаммов вируса болезни Тешена не вызывает характерных для данной болезни признаков, являясь слабовирулентными . Тешена от энтеровирусов. Избирательная амплификация отдельных участков вирусного генома с помощью полимеразной цепной реакции и их рестрикционный анализ, дополняя серологические методы, открывает новые возможности для совершенствования дифференциации вируса болезни Тешена от энтсровирусов свиней. Одним из перспективных направлений является разработка тестсистемы, основанной на использовании ПЦР, с последующим рестрикционным анализом и секвенированием ампликонов участков РНК ВБТ и энтеровирусов свиней. В связи с вышеизложенным, разработка методов дифференциации вируса болезни Тешена от энтеровирусов свиней имеет важное эпизоотологическое и диагностическое значение и является актуальной. Цель и задачи исследований. Целью данной работы является дифференциация вируса болезни Тешена от энтеровирусов свиней на основе анализа генома. Тешена от энтеровирусов свиней на основе ПЦР и рестрикционного анализа ПЦР продуктов. Молдавский и Смоленский вируса болезни Тешена, которые депонированы в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ РОССЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ. Практическая значимость. Набор препаратов для выявления РНК энтеровирусов методом ПЦР и Набор препаратов для выявления РНК вируса болезни Тешена методом ПЦР позволяют обнаруживать РНК этих вирусов в инфицированных культурах клеток, пробах головного мозга зараженных свиней и фекалий. Данный метод может быть включен в схему диагностики этой болезни . Рестрикционный анализ ПЦР продукта амплификации консервативного участка гена РНК полимеразы позволяет проводить дифференциацию вируса БТ от энтеровирусов свиней. Рестрикционный анализ ПЦР продукта амплификации вариабельного участка гена VI позволяет дифференцировать референсштамм вируса болезни Тешена. Депонированные в коллекции микроорганизмов института штаммы Молдавский и Смоленский вируса болезни Тешена используют в ГНУ ВНИИВВиМ при проведении НИР и текущих диагностических исследованиях. Личный вклад соискателя. Отдельные этапы экспериментальных работ выполнены совместно с сотрудниками лабораторий Эпизоотологии и Диагностики. В выполнении исследований по разделам 4. Биофизики, кандидат биологических наук Пантюшенко М. С., научный сотрудник лаб. Эпизоотологии, кандидат ветеринарных наук Андреева О. Н., старший научный сотрудник лаб. Диагностики, кандидат биологических наук Балашова Е. А., за что автор выражает им глубокую признательность. Апробация результатов исследований. Исследования по диссертационной работе выполнены в гг. ВНИИВВиМ в соответствии с утвержденными плановыми заданиями НИР Россельхозакадемии темы . Материалы диссертационной работы были доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ВНИИВВиМ, Международной научнопрактической конференции Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов ВЫИИВВиМ г. Покров г. Международной научнопрактической конференции Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных ВНИИЗЖ г.